張超李鳳嬌，＃王敏姣趙艷黃國威楊駒于寧房琳郭維維薛希均縱亮關(guān)靜王秋菊

·實(shí)驗(yàn)研究·

正常成年Wistar大鼠短聲及短純音聽性腦干反應(yīng)波形分析△

張超1李鳳嬌1，2＃王敏姣1趙艷1黃國威1楊駒1于寧1房琳1郭維維1薛希均2縱亮1關(guān)靜1王秋菊1

目的 分析正常Wistar大鼠短聲（click）及短純音（tone burst，TB）誘發(fā)聽性腦干反應(yīng)（c ABR、tb-ABR）結(jié)果，標(biāo)準(zhǔn)化Wistar大鼠ABR測試方法，為大鼠聽覺研究提供參考。方法 正常成年雄性Wistar大鼠15只，分別進(jìn)行c ABR和tb ABR（4、8、12、16、24、32 k Hz）測試，觀察80、50、20 dB SPL強(qiáng)度下各波的引出率，以引出率最高的波來判斷閾值，同時(shí)量取該波的潛伏期和幅值，檢測ABR波Ⅱ、Ⅳ振幅I／O曲線。結(jié)果 ①20 dB SPL強(qiáng)度下c ABR和tb ABR波Ⅱ和波Ⅳ最晚消失的比例幾乎相同；②c ABR閾值為21.83±4.45 dB SPL，4～32 k Hz頻率tb ABR閾值分別為24.33±5.37、14.17±4.37、14.33±4.68、16.67±4.22、23.00±5.81、31.00±7.36 dB SPL；③80 dB SPL c ABR波Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ潛伏期分別為1.76±0.12、2.13±0.11、2.67±0.16、3.49±0.28、4.39±0.29、5.45±0.41 ms，tb ABR 4 k Hz波Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ潛伏期分別為2.02±0.09、2.88±0.16、3.77± 0.25、4.69±0.29、5.78±0.41 ms，8 k Hz分別為1.76±0.07、2.28±0.10、2.63±0.16、3.49±0.21、4.44±0.28、5.48±0.43 ms，12 k Hz分別為1.76±0.08、2.24±0.12、2.61±0.25、3.53±0.25、4.46±0.32、5.52±0.45 ms，16 k Hz分別為1.79±0.10、2.25±0.12、2.70±0.18、3.62±0.27、4.52±0.37、5.61±0.49 ms，24 k Hz分別為1.75± 0.09、2.27±0.11、2.67±0.16、3.60±0.27、4.52±0.38、5.60±0.51 ms，32 k Hz分別為1.77±0.10、2.24±0.12、2.64±0.20、3.59±0.34、4.52±0.40、5.61±0.52 ms；④I／O曲線示在高強(qiáng)度時(shí)波Ⅱ振幅明顯高于波Ⅳ，但在低強(qiáng)度時(shí)，波Ⅱ振幅與波Ⅳ基本相同，甚至波Ⅳ振幅高于波Ⅱ。結(jié)論 正常成年大鼠短聲及短純音誘發(fā)ABR波Ⅳ出現(xiàn)率最高，低強(qiáng)度聲刺激時(shí)，波Ⅱ、Ⅳ振幅基本相同，甚至波Ⅳ振幅高于波Ⅱ，可以波Ⅳ最后消失的強(qiáng)度為閾值。

大鼠； 短聲； 短純音； 聽性腦干反應(yīng)

聽性腦干反應(yīng)（ABR）是臨床上常用的聽覺功能測試方法，在各種不同的聽覺相關(guān)實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。ABR能夠在一定程度上評估聽覺傳導(dǎo)通路是否正常，易于操作，受清醒和非清醒狀態(tài)的影響較小。近年來常用Wistar大鼠進(jìn)行各種聽覺損傷的造模，研究其機(jī)理和轉(zhuǎn)歸，對于Wistar大鼠的ABR正常值也有較多報(bào)道，但是國內(nèi)外實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)相比較，存在一定的差異［1～7］。為此，本研究擬通過Wistar大鼠ABR測試中的信號采集及給聲參數(shù)設(shè)置、聲音校準(zhǔn)等，對其ABR反應(yīng)閾、潛伏期和波形分化進(jìn)行分析，以標(biāo)準(zhǔn)化Wistar大鼠ABR測試方法，為今后Wistar大鼠動物模型的聽覺研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 選取聽力正常雄性Wistar大鼠15只（30耳），8周齡，體重200～300 g，由解放軍總醫(yī)院動物實(shí)驗(yàn)中心提供。

1.2 ABR測試聲 測試聲生成使用美國TDT公司SigGen RP軟件，短聲（click）為0.1 ms時(shí)程的電脈沖方波沖擊耳機(jī)產(chǎn)生，無上升下降時(shí)間，采用Blackman非線性開窗，交替波；短純音（tome burst，TB）4、8、12、16、24、32 k Hz設(shè)置為1 ms時(shí)程，0.4 ms上升和下降時(shí)間，0.2 ms平臺，采用Blackman非線性開窗。

1.3 儀器校準(zhǔn) 采用丹麥Brüel＆Kj?r公司數(shù)據(jù)采集硬件模塊（Type3052-A-3／0）和測試探頭（2669 C 001）與電腦連接，使用丹麥Brüel＆Kj?r公司軟件PULSE對click聲進(jìn)行進(jìn)行等效峰值聲壓級（peSPL）校準(zhǔn)，對TB聲進(jìn)行峰值聲壓級（SPL）校準(zhǔn)。文中對于click聲和TB聲統(tǒng)一用聲壓級（SPL）表示。給聲喇叭口連接3 cm傳聲管，探頭距離傳聲管出聲口1 mm。

1.4 ABR測試方法 大鼠以1%戊巴比妥鈉50 mg／kg腹腔注射麻醉，用暖水袋保持體溫。動物完全麻醉后，記錄電極置于兩耳耳輪腳連線顱頂中央皮下，參考電極沿耳后溝中部向前扎入，置于測試耳耳甲艇皮下，接地電極置于非測試耳耳甲艇皮下，極間電阻小于1 kΩ。用美國TDT公司的聽覺電生理系統(tǒng)和其配套的BioSigRP系統(tǒng)軟件進(jìn)行給聲和記錄。刺激聲音為之前生成和校準(zhǔn)好的click和TB聲音，強(qiáng)度80 d B SPL到0 dB SPL，衰減間隔為10 dB，接近閾值時(shí)，衰減間隔為5 dB，帶通濾波300～3 000 Hz，開啟50 Hz陷波防止交流電干擾，信號放大50 000倍，觀察窗為10 ms，刺激速率為21次／秒，疊加1 024次。MF1－S磁性揚(yáng)聲器（頻響1～70 k Hz）整體用密孔黃銅網(wǎng)包裹并接地，喇叭出聲管口置于距動物外耳道口1 mm校準(zhǔn)距離處，開放聲場給聲。觀察80 d B SPL強(qiáng)度下各波的潛伏期；80、50、20 dB SPL時(shí)各波出現(xiàn)的頻率，依據(jù)出現(xiàn)率最高的波，得出各個(gè)頻率的閾值，量取出現(xiàn)率最高波的潛伏期和振幅。潛伏期的量取從聲音刺激開始到所測波峰值的時(shí)間差，振幅量取波峰和波谷的差值［8］。

2 結(jié)果

2.1 100 d B SPL強(qiáng)度下click聲及各頻率TB聲聲學(xué)波形圖 如圖1所示，實(shí)測click聲的聲學(xué)波形圖，量取峰值聲壓的強(qiáng)度，等效1 000 Hz純音在100 dB SPL時(shí)聲壓強(qiáng)度，換算成dB（允許誤差±1 dB）。此時(shí)得到的click聲即為100 dB peSPL聲強(qiáng)，click聲實(shí)測時(shí)程1 ms左右。TB聲校準(zhǔn)則只需直接測試聲壓級，得到校準(zhǔn)強(qiáng)度，圖1中可見各頻率TB聲實(shí)測得到的完整給聲聲波圖形。

2.2 不同給聲條件下各波潛伏期正常值 80 dB SPL強(qiáng)度下click聲和各頻率TB聲Wistar大鼠ABR各波潛伏期見表1，不同強(qiáng)度click聲Wistar大鼠ABR波形見圖2。

4 k Hz tb ABR各波潛伏期因聲音頻率低，在一個(gè)完整給聲時(shí)程中，平臺短，能量相對低，同時(shí)大鼠的4 k Hz聽力較差，相較于其他給聲頻率，4 k Hz tb ABR各波潛伏期相對較長，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

圖1 100 d B SPL強(qiáng)度下click和TB聲聲學(xué)波形圖 （x軸為時(shí)間ms，y軸為壓力pa）

表1 80 d B SPL強(qiáng)度下c ABR和tb ABR各波潛伏期（ms，±s）（n＝30耳）

表1 80 d B SPL強(qiáng)度下c ABR和tb ABR各波潛伏期（ms，±s）（n＝30耳）

注：因?yàn)榇笫? k Hz聽力較差，而Ⅰb又極易融合或消失，故未能引出Ⅰb

ABR波c ABR tb ABR 4 k Hz 8 k Hz 12 k Hz 16 k Hz 24 k Hz 32 k HzⅠa 1.76±0.12 2.02±0.09 1.76±0.07 1.76±0.08 1.1±0.49 5.60±0.51 5.61±0.52 79±0.10 1.75±0.09 1.77±0.10Ⅰb 2.13±0.11—2.28±0.11 2.24±0.12 2.25±0.12 2.27±0.11 2.24±0.12Ⅱ2.67±0.16 2.88±0.16 2.63±0.16 2.61±0.25 2.70±0.18 2.67±0.16 2.64±0.20Ⅲ3.49±0.28 3.77±0.25 3.49±0.21 3.53±0.25 3.62±0.27 3.60±0.27 3.59±0.34Ⅳ4.39±0.29 4.69±0.29 4.44±0.28 4.46±0.32 4.52±0.37 4.52±0.38 4.52±0.40Ⅴ5.45±0.41 5.78±0.41 5.48±0.43 5.52±0.45 5.6

2.3 80、50、20 dB SPL強(qiáng)度下c ABR和tb ABR各波引出率 從表2、3、4可以看出，在高強(qiáng)度和中等強(qiáng)度聲刺激時(shí)，正常成年的Wistar大鼠c ABR和tb ABR各波基本都可以引出，在低強(qiáng)度聲刺激時(shí)，Ⅱ波和Ⅳ波最晚消失，引出率幾乎相同。而Ⅰb因?yàn)槌霈F(xiàn)率較低，且只在較高強(qiáng)度聲刺激時(shí)出現(xiàn)，故未納入統(tǒng)計(jì)。

在click聲和不同頻率TB聲閾值強(qiáng)度刺激時(shí)，Ⅱ波最晚消失率為17.14%，Ⅳ波最晚消失率為18.57%，Ⅱ波和Ⅳ波同時(shí)消失率為64.29%；但波Ⅳ能反應(yīng)的聽覺通路層級更高，因此在判斷正常成年Wistar大鼠ABR反應(yīng)閾時(shí)，應(yīng)觀察波Ⅳ。

表3 50 dB SPL強(qiáng)度下c ABR和tb ABR各波引出率（%）（n＝30耳）

表4 20 dB SPL強(qiáng)度下c ABR和tb ABR各波引出率（%）（n＝30耳）

圖2 Wistar大鼠c ABR波形隨刺激聲強(qiáng)度變化圖

2.4 正常成年Wistar大鼠c ABR和tb ABR閾值click和4、8、12、16、24、32 k Hz TB聲刺激下正常成年Wistar大鼠ABR閾值分別為21.83±4.45、24.33±5.37、14.17±4.37、14.33±4.68、16.67± 4.22、23.00±5.81、31.00±7.36 dB SPL?？梢姡?、12、16 k Hz tb ABR反應(yīng)閾值最低，其聽覺最敏感的頻率為8、12和16 k Hz。

2.5 c ABR和tb ABR波Ⅱ和波Ⅳ振幅的輸入輸出函數(shù)曲線 從圖3可見，ABR振幅呈非線性變化，在高強(qiáng)度聲刺激時(shí)，波Ⅱ的振幅明顯高于波Ⅳ，但在低強(qiáng)度時(shí)，波Ⅱ和波Ⅳ的振幅基本相同，甚至波Ⅳ振幅高于波Ⅱ，32 k Hz聲刺激時(shí)，因聲音能量較低，波Ⅱ和波Ⅳ的振幅幾乎相同。這可能與波Ⅱ和波Ⅳ來自的聽覺核團(tuán)有關(guān)，Wistar大鼠波Ⅳ可能來自下丘。

2.6 ABR波Ⅰb的分化 在高強(qiáng)度聲刺激時(shí)，在分化較好的ABR波Ⅰ和波Ⅱ之間出現(xiàn)了一個(gè)分化較差的波（圖4），暫定為波Ⅰb。80 dB SPL強(qiáng)度下波Ⅰb的引出率c ABR為26.67%，tb ABR 4、8、16、24、32 k Hz分別為0、16.67%、23.33%、20%、26.67%、26.67%。

3 討論

誘發(fā)ABR的刺激聲種類有click、tone burst、tone pip和chirp聲等，實(shí)驗(yàn)中和臨床常用的是click聲，它瞬態(tài)特異性好，波形分化清晰，2007年國際標(biāo)準(zhǔn)化組織發(fā)布了《聲學(xué)校準(zhǔn)測聽設(shè)備的基準(zhǔn)零級第6部分短時(shí)程測試信號的基準(zhǔn)聽閾》［9］，但到目前為止，TB聲的標(biāo)準(zhǔn)和設(shè)置還沒有統(tǒng)一。

本實(shí)驗(yàn)中，click聲按照國際標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置，采用等效峰值聲壓的方法校準(zhǔn)。TB聲設(shè)置參照國際標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)結(jié)合國際上對于TB聲的流行設(shè)置［4，9～13］，1 ms時(shí)程，0.4 ms上升和下降時(shí)間，0.2 ms平臺，采用Blackman非線性開窗。因?yàn)? k Hz以上的刺激聲，用1 ms的時(shí)程較3 ms和5 ms更短，瞬態(tài)特異性更好，且有足夠的聲音周期，誘發(fā)的ABR波形分化更好，閾值更低。為了區(qū)別tone burst與tone pip的平臺期，本實(shí)驗(yàn)的刺激聲設(shè)置了0.2 ms的平臺，上升下降時(shí)間和平臺期的比值為2：1：2，因?yàn)? k Hz聲音周期較長，在這個(gè)設(shè)置下只有一個(gè)波峰達(dá)到平臺強(qiáng)度。

目前國內(nèi)各實(shí)驗(yàn)室在對動物進(jìn)行ABR測試時(shí)，對聲音的校準(zhǔn)方法、強(qiáng)度、聲音的形態(tài)描述都比較模糊，都是用廠家提供的設(shè)備和設(shè)置，但是耳機(jī)里出來的聲音的頻率、強(qiáng)度、波形關(guān)注較少。不同廠家的設(shè)置多有不同，因此相互間的可比性較?。煌瑫r(shí)，儀器設(shè)備在使用一段時(shí)間后，聲音會產(chǎn)生畸變，從揚(yáng)聲器出來的聲音和設(shè)置的聲音不同，所以必須每隔一段時(shí)間到專業(yè)機(jī)構(gòu)用專業(yè)的儀器校準(zhǔn)，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

ABR測試時(shí)電壓越大電阻越小，得到的信號就越好，那么ABR的波形分化就越好。在動物實(shí)驗(yàn)中，電極針之間的電勢差越大，電壓就越大，但在得到足夠大的電壓時(shí)，應(yīng)避免電阻增大。電阻包括儀器上測得的電阻、機(jī)體產(chǎn)生的各種干擾以及外界產(chǎn)生的電或者磁的干擾。有實(shí)驗(yàn)報(bào)道將記錄電極和接地電極置于大鼠的耳垂［3］，但大鼠的耳垂不明顯，無法固定電極。也有實(shí)驗(yàn)將電極置于大鼠乳突部［1，14］，但大鼠的乳突部比較小，也不易于固定電極，即使將電極固定好，電極針也會扎入頸部肌肉，產(chǎn)生較大的干擾，影響基線和波形分化。本實(shí)驗(yàn)將記錄電極置于兩耳輪腳連線顱頂中央皮下，參考電極沿耳后溝中部向前扎入，置于測試耳耳甲艇皮下，接地電極置于非測試耳耳甲艇皮下，這樣既可以保證良好的電勢差，又可以避免肌電干擾，得到分化清晰的ABR波形和平穩(wěn)的基線。

圖3 c ABR和tb ABRⅡ、Ⅳ波振幅輸入輸出曲線圖

本實(shí)驗(yàn)用于判斷大鼠ABR閾值的波為波Ⅳ，與Lin［6］、Alvarado［10］、Ahmed［15］報(bào)道相同，與其他文獻(xiàn)［1，2，16］報(bào)道的以波Ⅲ判斷閾值不同。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，本實(shí)驗(yàn)中大鼠ABR的波形分化非常好，50 d B SPL強(qiáng)度下，各波的出現(xiàn)率還是很高，可能與實(shí)驗(yàn)前的聲音設(shè)置、聲音校準(zhǔn)和各項(xiàng)條件的把控有關(guān)，也可能與不同廠家儀器的設(shè)置相關(guān)。雖然在某些頻率波Ⅱ最晚消失，從圖3中也能發(fā)現(xiàn)，波Ⅱ平均振幅高于波Ⅳ，但是在接近閾值時(shí)，波Ⅳ和波Ⅱ的振幅幾乎相同，甚至波Ⅳ振幅要高于波Ⅱ。對于人類ABR各波的起源，目前普遍認(rèn)為波Ⅰ來自第八對腦神經(jīng)近蝸端，波Ⅱ來自耳蝸核，波Ⅲ來自橄欖核，波Ⅳ來自外側(cè)丘系，波Ⅴ來自下丘［17］；有文獻(xiàn)報(bào)道大鼠的波Ⅳ來自下丘［18，19］，但也有報(bào)道認(rèn)為其不是來自下丘［20］，不過可以肯定的是波Ⅳ可以反應(yīng)更高一級的神經(jīng)中樞，能夠更準(zhǔn)確地反應(yīng)大鼠的聽功能，綜合考慮出現(xiàn)率、振幅、波形分化及波的起源，以波Ⅳ判斷大鼠ABR反應(yīng)閾更佳。

圖4 ABRⅠb波形分化示意圖

本實(shí)驗(yàn)中Wistar大鼠的click（dB SPL）聲和TB（dB SPL）聲誘發(fā)的ABR閾值與Tanaka等［4，5］的結(jié)果相似，與韓維舉等［16］、Kim［21］等結(jié)果存在一些差異，主要原因是各個(gè)實(shí)驗(yàn)室使用的短純音的設(shè)置、實(shí)驗(yàn)儀器及大鼠的品種不同。

本文結(jié)果所示Ⅰb在高強(qiáng)度聲刺激且波形分化較好時(shí)會出現(xiàn)，當(dāng)刺激聲強(qiáng)度降低，Ⅰb迅速消失，或者說是與Ⅱ波融合。Ⅰb在4 k Hz聲刺激時(shí)不出現(xiàn)，但在其它各頻率聲刺激時(shí)均出現(xiàn)，Ⅰb與人的Ⅱ波類似，來源于聽神經(jīng)近耳蝸核端和耳蝸核，因?yàn)榇笫蟮捏w積較小，波形分化不如人類的好，所以容易被Ⅱ波融合。依照這個(gè)假設(shè)，大鼠ABR的波形分化和閾值判斷和人類完全一樣，分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ波。

本研究結(jié)果中I／O曲線顯示，ABR波Ⅱ、Ⅲ振幅隨著強(qiáng)度的變化而變化，呈非線性，與Zhang等的大鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似［22］，其實(shí)驗(yàn)中刺激聲是白噪聲，與本實(shí)驗(yàn)中ABR振幅I／O曲線相似。后續(xù)可以根據(jù)這個(gè)現(xiàn)象，在行為學(xué)條件不允許時(shí)，通過量取大鼠ABR的波Ⅳ振幅I／O曲線，進(jìn)行聽覺過敏和耳鳴［23］相關(guān)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

（致謝：感謝中國人民解放軍總醫(yī)院解放軍耳鼻咽喉研究所李興啟教授、于黎明主任對本文的大力幫助?。?/p>

1 楊希林，廖華，陳抗松，等.慢性噪聲暴露對大鼠聽皮層及海馬腦區(qū)胰島素樣生長因子－1表達(dá)的影響［J］.聽力學(xué)及言語疾病雜志，2014，22：625.

2 劉芳利，羅彬，孫敬武，等.噪聲暴露對大鼠ABR反應(yīng)閾及聽皮層谷氨酸脫羧酶67表達(dá)的影響［J］.聽力學(xué)及言語疾病雜志，2014，22：268.

3 孫曉飛，廖華，楊琨，等.脈沖噪聲暴露后大鼠聽皮層神經(jīng)顆粒素的表達(dá)研究［J］.聽力學(xué)及言語疾病雜志，2012，20：250.

4 Tanaka C，Coling DE，Manohar S，et al.Expression pattern of oxidative stress and antioxidant defense－related genes in the aging Fischer 344／NHsd rat cochlea［J］.Neurobiol Aging，2012，33：1842.

5 Sun W，Manohar S，Jayaram A，et al.Early age conductive hearing loss causes audiogenic seizure and hyperacusis behavior［J］.Hear Res，2011，282：178.

6 Liu XP，Chen L.Forward acoustic masking enhances the auditory brainstem response in a diotic，but not dichotic，paradigm in salicylate－induced tinnitus［J］.Hear Res，2015，323：51.

7 Kim JY，Choi GS，Cho YW，et al.Attenuation of spinal cord injury－induced astroglial and microglial activation by repetitive transcranial magnetic stimulation in rats［J］.J Korean Med Sci，2013，28：295.

8 李興啟，主編.聽覺腦干反應(yīng)的特點(diǎn)及應(yīng)用［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2015.154～175.

9 Chen GD，Li M，Tanaka C，et al.Aging outer hair cells（OHCs）in the Fischer 344 rat cochlea：function and morphology［J］.Hear Res，2009，248：39.

10 Church MW，Blakley BW，Burgio DL，et al.WR－2721（Amifostine）ameliorates cisplatin－induced hearing loss but causes neurotoxicity in hamsters：dose－dependent effects［J］.J Assoc Res Otolaryngol，2004，5：227.

11 Alvarado JC，F(xiàn)uentes－Santamaria V，Jareno－Flores T，et al.Normal variations in the morphology of auditory brainstem response（ABR）waveforms：a study in Wistar rats［J］.Neurosci Res，2012，73：302.

12 Dehmel S，Eisinger D，Shore SE.Gap prepulse inhibition and auditory brainstem－evoked potentials as objective measures for tinnitus in guinea pigs［J］.Front Syst Neurosci，2012，6：42.

13 Church MW，Hotra JW，Holmes PA，et al.Auditory brainstem response（ABR）abnormalities across the life span of rats prenatally exposed to alcohol［J］.Alcohol Clin Exp Res，2012，36：83.

14 陳抗松，廖華，楊希林，等.水楊酸鈉致耳鳴大鼠的行為學(xué)及聽性腦干反應(yīng)改變［J］.聽力學(xué)及言語疾病雜志，2013，21：163.

15 Ahmed MA，Mohamed SA，Sayed D.Long－term antalgic effects of repetitive transcranial magnetic stimulation of motor cortex and serum beta－endorphin in patients with phantom pain［J］.Neurol Res，2011，33：953.

16 韓維舉，韓東一，楊偉炎，等.噪聲暴露引起大鼠聽覺器官線粒體DNA缺失［J］.中華耳鼻咽喉科雜志，2003，38：324.

17 Stone JL，Calderon－Arnulphi M，Watson KS，et al.Brainstem auditory evoked potentials－－a review and modified studies in healthy subjects［J］.J Clin Neurophysiol，2009，26：167.

18 Simpson GV，Knight RT，Brailowsky S，et al.Altered peripheral and brainstem auditory function in aged rats［J］.Brain Res，1985，348：28.

19 Henry KR.Differential changes of auditory nerve and brain stem short latency evoked potentials in the laboratory mouse［J］.Electroencephalogr Clin Neurophysiol，1979，46：452.

20 Chen TJ，Chen SS.Generator study of brainstem auditory evoked potentials by a radiofrequency lesion method in rats［J］.Exp Brain Res，1991，85：537.

21 Kim SE，Turkington K，Kushmerick C，et al.Central dysmyelination reduces the temporal fidelity of synaptic transmission and the reliability of postsynaptic firing during highfrequency stimulation［J］.J Neurophysiol，2013，110：1621.

22 Zhang C，F(xiàn)lowers E，Li JX，et al.Loudness perception affected by high doses of salicylate－－a behavioral model of hyperacusis［J］.Behav Brain Res，2014，271：16.

23 Ruttiger L，Singer W，Panford－Walsh R，et al.The reduced cochlear output and the failure to adapt the central auditory response causes tinnitus in noise exposed rats［J］.PLoS One，2013，8：e57247.

（2015－11－25收稿）

（本文編輯 周濤）

The Wave Analysis of Auditory Brainstem Responses in Normal Adult Wistar Rat

Zhang Chao*，Li Fengjiao，Wang Minjiao，Zhao Yan，Huang Guowei，Yang Ju，Yu Ning，F(xiàn)ang Lin，Guo Weiwei，Xue Xijun，Zong Liang，Guan Jing，Wang Qiuju
（*Department of Otolaryngology－Head and Neck Surgery，Chinese PLA lnstitute of Otolaryngology，Chinese PLA General Hospital，Beijing，100853，China）

Objective To investigate the click and tone burst evoked auditory brainstem responses（ABR）in normal Wistar rat，and to establish the standards of ABR testing method，and to provide a reference for studies rat audition.Methods Fifteen male Wistar rats（30 ears）were used in this sutdy.The latency and amplitude of ABR evoked by click and TB at 80，50 and 20 dB SPL were measured.Results The occurrence rate of waveⅡandⅣat lowlevels（20 dB SPL）was nearly the same according to the amplitude.The c ABR（dB peSPL）threshold was 21.83± 4.45 and tb ABR（dB SPL）thresholds were 2.02±0.09，2.88±0.16，3.77±0.25，4.69±0.29，and 5.78±0.41，respectively.80 dB stimulus evoked c ABR（peSPL）wave I，I b，II，III，IV and V latency（ms）were 1.76±0.12，2.13±0.11，2.67±0.16，3.49±0.28，4.39±0.29，and 5.45±0.41，respectively.tb ABR（SPL）of wave I，Ib，II，III，IV and V latency（ms）at 4 k Hz were 2.02±0.09，2.88±0.16，3.77±0.25，4.69±0.29，and 5.78± 0.41，respectively.At 8 k Hz they were 1.76±0.07，2.28±0.10，2.63±0.16，3.49±0.21，4.44±0.28，and 5.48±0.43；while at 12 k Hz were1.76±0.08，2.24±0.12，2.61±0.25，3.53±0.25，4.46±0.32，and 5.52± 0.45；at 16 k Hz were 1.79±0.10，2.25±0.12，2.70±0.18，3.62±0.27，4.52±0.37，and 5.61±0.49；at 24 k Hz were 1.75±0.09，2.27±0.11，2.67±0.16，3.60±0.27，4.52±0.38，and 5.60±0.51；at 32 k Hz were 1.77±0.10，2.24±0.12，2.64±0.20，3.59±0.34，4.52±0.40，and 5.61±0.52，respectively.Conclusion WaveⅣwas the best wave to determine threshold of click and tone burst evoked auditory brainstem response in rat.

Rat； Click； Tone burst； Auditory brainstem response

10.3969／j.issn.1006－7299.2016.04.010

時(shí)間：2016－6－29 16：11

R764.04

A

1006－7299（2016）04－0360－07

* 國家重大科學(xué)研究計(jì)劃項(xiàng)目（2014CB943001）、國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)國際合作項(xiàng)目（81120108009）、國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目（81530032）及全軍“十二五”重點(diǎn)項(xiàng)目（BWS11J026）聯(lián)合資助

1 中國人民解放軍總醫(yī)院 解放軍耳鼻咽喉研究所（北京 100853）； 2 昆明醫(yī)科大學(xué)昆明總醫(yī)院臨床醫(yī)院耳鼻咽喉科

張超，男，湖南人，技師，主要研究方向?yàn)槁犛X電生理；李鳳嬌，女，山東人，碩士研究生，主要研究方向?yàn)槎@及聽力學(xué)相關(guān)基礎(chǔ)與臨床。

王秋菊（Email：wqcr301＠sina.com；wqcr＠263.net）

＃ 共同第一作者

網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：／／www.cnki.net／kcms／detail／42.1391.R.20160629.1611.034.html