羅政權(quán) 王寶軍 杜秀杰 逯娟 鄭宏江

(1.河北邯鄲峰峰集團總醫(yī)院病理科，河北 邯鄲 056200；2.邯鄲市第四醫(yī)院病理科，河北 邯鄲 056200)

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細胞塊石蠟包埋切片鑒別良惡性胸腹腔積液的應(yīng)用價值

羅政權(quán)1王寶軍1杜秀杰2逯娟1鄭宏江1

(1.河北邯鄲峰峰集團總醫(yī)院病理科，河北 邯鄲 056200；2.邯鄲市第四醫(yī)院病理科，河北 邯鄲 056200)

目的 研究細胞塊石蠟包埋切片鑒別良惡性胸腹腔積液的應(yīng)用價值。方法 連續(xù)選擇68份高度懷疑惡性胸腹腔積液標(biāo)本，分別進行細胞塊石蠟包埋切片和細胞脫落病理學(xué)檢查，對比診斷敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值的差異性。結(jié)果 細胞涂片診斷惡性胸、腹腔積液的陽性率明顯低于最終結(jié)果，也明顯低于石蠟包埋，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；石蠟包埋與最終結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05). 細胞涂片診斷惡性胸、腹腔積液的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值明顯低于石蠟包埋。結(jié)論 細胞塊石蠟包埋切片鑒別良惡性胸腹腔積液具有較好的應(yīng)用價值。

細胞塊石蠟包埋切片； 胸腹腔積液； 細胞脫落病理學(xué)檢查

一直以來，細胞脫落病理學(xué)檢查被認(rèn)為診斷胸腹腔積液性質(zhì)的“金標(biāo)準(zhǔn)”[1]，然而H.Motherby[2]研究指出，其診斷惡性積液的陽性率僅為17.5%。對已知惡性積液的陽性診斷率為56%～65%，之所以出現(xiàn)較高假陰性原因可能與細胞學(xué)的制片技術(shù)有關(guān)[3]。常規(guī)細胞制片易受標(biāo)本質(zhì)量、涂片厚度、染色技術(shù)等影響[4]。細胞塊石蠟包埋切片利用組織團塊，聚集病變細胞，有效染色進行觀察，主要應(yīng)用在組織病理學(xué)診斷中[5]。本研究通過比較這兩種技術(shù)在鑒別胸腹腔積液性質(zhì)的價值，為臨床診斷提供新思路。

注：A、B為腺癌細胞；C、D為鱗癌細胞；A、C為石蠟包埋HE染色；B、D為細胞涂片巴氏染色。圖1 兩種檢測技術(shù)診斷惡性胸腹腔積液(400×)

1 材料與方法

1.1 材料來源 連續(xù)選擇2014年1月至2016年1月入我院行病理診斷，高度懷疑惡性胸腹腔積液標(biāo)本共68份，標(biāo)本無污染，采集后立即送檢。標(biāo)本來源男性41例，女性27例；年齡37～76歲，平均(52.5±13.3)歲；胸腔積液35份，腹腔積液33份。

1.2 標(biāo)本處理 52A 型醫(yī)用低速離心機(北京六一機械廠)，脫水機(ASP300，LEICA，德國)，包埋機(EG1160，LEICA，德國)，切片機(RM2235，LEICA，德國)，Olympus 光學(xué)顯微鏡(BX51，Olympus，日本)。

1.2.1 細胞脫落病理學(xué)檢查 預(yù)處理：標(biāo)本至少100 mL、靜置15 min、棄上清、取沉淀2 500 r/min離心5 min、棄上清、取沉淀；涂片：取中間層細胞；固定：95%乙醇固定 15 min；巴氏染色：蒸餾水水洗2 min×2次、蘇木素染色5 min、流水沖洗1 min，放置鹽酸酒精中5 s、流水沖洗分色，放置飽和碳酸鋰溶液中返藍，梯度酒精脫水，放置橘黃 G6 中 10 s、95%乙醇迅速沖洗 3 次、放置EA50 中2min、95%乙醇沖洗2min×2 次，無水乙醇2 min×2 次脫水、二甲苯透明、中性樹脂封片。

1.2.2 細胞塊石蠟包埋切片 預(yù)處理同上、取沉淀震蕩與離心管分離、兩層擦鏡紙包裹放入脫水盒中，10%福爾馬林浸泡 3～4 h固定，梯度酒精脫水、酒精和二甲苯透明、浸入純石蠟2次、每次 2～3 h、溫度54～56 ℃，包埋、切片、蘇木素伊紅染色。染色步驟：脫蠟、水化、染核(蘇木精液染色 5 min、流水2～4 s，鹽酸乙醇 2～4 s、稍水洗 15～30 s、流水 11～16 min、蒸餾水 2～4 s)、染漿(0.5%伊紅液染色 1～5 min、蒸餾水快速沖洗 1～2 s)、脫水、透明、封片。

1.3 光學(xué)顯微鏡下閱片 均采用雙盲法，由兩名細胞病理學(xué)醫(yī)師同時閱片，并做出一致性診斷。依據(jù)《漿膜腔積液細胞病理學(xué)診斷》標(biāo)準(zhǔn)，診斷報告采用3 級分類法，即找到惡性細胞(鱗狀細胞癌、腺癌、小細胞未分化癌、大細胞未分化癌、腺鱗癌、癌型未定)，可疑惡性細胞和未找到惡性細胞。綜合多種檢查方法如生化、影像、臨床表現(xiàn)為最終確診結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析處理，計數(shù)資料采用%表示，組間比較采用(校正)χ2檢驗；以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 惡性胸腹腔積液陽性率的比較 35例惡性胸腔積液中，細胞涂片診斷出陽性20例，陰性15例，陽性率為57.1%，而最終確診結(jié)果為陽性30例，陰性5例，陽性率為857.1%，石蠟包埋診斷出陽性28例，陰性7例，陽性率為80.0%，細胞涂片診斷的陽性率低于最終診斷結(jié)果，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=7.000，P=0.008)，也明顯低于石蠟包埋(χ2=4.242，P=0.039)，石蠟包埋與最終確診結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.402，P=0.526)；33例惡性腹腔積液中，細胞涂片診斷出陽性21例，陰性12例，陽性率為63.6%，而最終確診結(jié)果為陽性30例，陰性5例，陽性率為90.9%，石蠟包埋診斷出陽性28例，陰性5例，陽性率為84.8%，細胞涂片診斷的陽性率低于最終診斷結(jié)果，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.988，P=0.008)，也明顯低于石蠟包埋(χ2=3.882，P=0.049)，石蠟包埋與最終確診結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.142，P=0.706)。見圖1。

2.2 診斷敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值的比較 細胞涂片診斷惡性胸腔積液的敏感性為62.5%、特異性為53.8%、陽性預(yù)測值為82.6%、陰性預(yù)測值為52.9%，診斷惡性腹腔積液的敏感性為66.9%、特異性為57.2%、陽性預(yù)測值為87.4%、陰性預(yù)測值為62.3%。石蠟包埋診斷惡性胸腔積液的敏感性為86.3%、特異性為72.9%、陽性預(yù)測值為88.4%、陰性預(yù)測值為72.0%，診斷惡性腹腔積液的敏感性為89.9%、特異性為80.1%、陽性預(yù)測值為88.6%、陰性預(yù)測值為83.3%。[敏感性=真陽性人數(shù)/(真陽性人數(shù)+假陰性人數(shù))×100%，特異性=真陰性人數(shù)/(真陰性人數(shù)+假陽性人數(shù)))×100%，陽性預(yù)測值=真陽性人數(shù)/(真陽性人數(shù)+假陽性人數(shù))×100%，陰性預(yù)測值=真陰性人數(shù)/(真陰性人數(shù)+假陰性人數(shù))×100%]。

3 討 論

目前臨床中用于鑒別良惡性積液的檢查方法主要有影像學(xué)如CT、PET，惡性積液 CT 常見結(jié)節(jié)狀增后的胸腹膜，增厚常達 10 mm，多為不規(guī)則，若伴器官腫塊及淋巴結(jié)腫大，多提示為惡性[6]；常規(guī)生化檢查，如顏色、透明度、比重、凝固性、蛋白的定性與定量、糖、積液中的細胞數(shù)及細胞分類、pH 測定等[7]；腫瘤標(biāo)志物，如糖類蛋白為廣譜腫瘤標(biāo)志物，癌胚抗原多見于肺癌、結(jié)腸癌和乳腺癌等[8]；細胞 DNA 倍體分析可測定細胞內(nèi)的 DNA 含量，是一種可靠的檢測手段；細胞脫落病理學(xué)檢查等[9]。

胸、腹腔積液中細胞成分較為復(fù)雜，良性積液中常見細胞主要有間皮細胞、淋巴細胞、中性粒細胞及嗜酸性粒細胞等，惡性積液中可見腺癌細胞(89.2%)、鱗癌細胞(5.7%)或惡性淋巴瘤細胞(3.1%)，偶見未分化癌和惡性間皮瘤[10]。細胞脫落病理學(xué)檢查優(yōu)點是省時、費用低、方法簡單，但影響因素多、可控性差、診斷陽性率低，使之不能成為鑒別惡性積液的唯一手段[11]。石蠟包埋切片技術(shù)通過離心沉淀、聚集更多病變細胞，經(jīng)甲醛固定液形成細胞塊、然后經(jīng)石蠟包埋、切片和染色[12]。通過該研究得出：細胞涂片診斷惡性胸、腹腔積液的陽性率明顯低于最終結(jié)果，也明顯低于石蠟包埋，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義；石蠟包埋與最終結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。細胞涂片診斷惡性胸、腹腔積液的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值明顯低于石蠟包埋。

(本文圖1見封三)

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