程志斌，蘇子峰，王桂瑛，白華毅，廖國(guó)周，范江平，王雪峰，何勁松，普岳紅，王春，鄒建華，谷大海*

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650201；2.大理學(xué)院農(nóng)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，云南大理 671003；

3.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省畜產(chǎn)品加工工程技術(shù)研究中心，昆明 650201；4.昆明三正生物科技集團(tuán)有限公司，昆明 650201；

5.云南省西雙版納州勐臘縣農(nóng)業(yè)和科技局，云南勐臘 666300）

飼用脂肪酶對(duì)白羽肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

程志斌1，蘇子峰2，王桂瑛3，白華毅1，廖國(guó)周3，范江平3，王雪峰3，何勁松3，普岳紅3，王春4，鄒建華5，谷大海3*

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，昆明 650201；2.大理學(xué)院農(nóng)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，云南大理 671003；

3.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)云南省畜產(chǎn)品加工工程技術(shù)研究中心，昆明 650201；4.昆明三正生物科技集團(tuán)有限公司，昆明 650201；

5.云南省西雙版納州勐臘縣農(nóng)業(yè)和科技局，云南勐臘 666300）

選擇1日齡艾薇茵肉仔雞900只，分3個(gè)處理組：處理組1是對(duì)照組，不添加抗生素和化學(xué)合成抑菌藥物；處理組2添加細(xì)菌源脂肪酶；處理組3添加真菌源脂肪酶。結(jié)果表明，15～21日齡階段，處理組3肉雞平均日增重和表觀代謝能顯著高于處理組1和處理組2（P＜0.05）；料重比處理組3肉雞顯著低于處理組1和處理組2（P＜0.05）；粗脂肪表觀代謝率處理組3肉雞有大于處理組1和處理組2的趨勢(shì)，但差異不顯著（0.05＜P＜0.1）；處理組3死亡率低于處理組1和處理組2。試驗(yàn)表明，在無抗簡(jiǎn)單日糧配方條件下，真菌源脂肪酶能夠改善1～21日齡肉仔雞的生產(chǎn)性能，提高養(yǎng)分利用率，降低肉仔雞死亡率。

脂肪酶；白羽肉雞；生長(zhǎng)性能

飼料中添加油脂可以滿足快大型肉雞高能量需求，在實(shí)際養(yǎng)殖生產(chǎn)中十分普遍[1-5]。隨著我國(guó)現(xiàn)代化家禽養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，深度開發(fā)與改善油脂在肉雞養(yǎng)殖業(yè)中的營(yíng)養(yǎng)供能效果，進(jìn)一步提高肉雞生長(zhǎng)性能，降低養(yǎng)殖成本，是動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)家、飼料企業(yè)配方師及廣大養(yǎng)殖戶共同關(guān)心的問題[6-8]。

脂肪酶（Lipase）又稱甘油酯水解酶，能將甘油三酯水解成脂肪酸、甘油一酯及甘油二酯。20世紀(jì)初，國(guó)外科研人員首次發(fā)現(xiàn)與報(bào)道了微生物源脂肪酶，隨后被廣泛應(yīng)用于油脂化工、造紙、洗滌、制革、醫(yī)藥、食品等行業(yè)領(lǐng)域。近年來，隨著肉雞日糧中油脂添加比例的提高，國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)界與飼料企業(yè)也開始關(guān)注飼用脂肪酶[9-10]。目前微生物源脂肪酶在肉雞上的研究結(jié)果出現(xiàn)不一致的問題，有研究表明，飼用脂肪酶具有改善肉雞生產(chǎn)性能的正效應(yīng)，但也有無效果的報(bào)道[11-12]?？赡茉蚴悄壳帮曈弥久笡]有在飼料工業(yè)及養(yǎng)殖業(yè)中普及，大家對(duì)飼用脂肪酶的重視程度不夠造成的。

隨著飼料工業(yè)與畜禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)禁抗的發(fā)展趨勢(shì)，依據(jù)肉雞生理發(fā)育及對(duì)油脂的需求，試驗(yàn)研究了飼用脂肪酶對(duì)白羽肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響，以期能夠?yàn)轱曈弥久傅耐茝V和普及提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

選擇1日齡剛出生的艾維茵肉雞900只，依據(jù)初始體重分成3個(gè)處理組，每個(gè)處理組10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)（單籠）30只雞。試驗(yàn)肉雞飼養(yǎng)于同棟雞舍。

1.2 試驗(yàn)日糧

基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

參照中國(guó)農(nóng)業(yè)部《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 33-2004）》并結(jié)合云南省肉雞養(yǎng)殖現(xiàn)狀，配制1～21日齡試驗(yàn)肉雞基礎(chǔ)日糧。處理組1為對(duì)照組，處理組2在處理組1基礎(chǔ)上添加脂肪酶Ⅰ（細(xì)菌源脂肪酶），處理組3在處理組1基礎(chǔ)上添加脂肪酶Ⅱ（真菌源脂肪酶）。脂肪酶Ⅰ、脂肪酶Ⅱ樣品由昆明三正生物科技（集團(tuán)）有限公司提供，酶活力均為20 000 U·g-1，添加量均為100 g·t-1全價(jià)日糧。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

考慮到當(dāng)前禁抗的發(fā)展趨勢(shì)，突出脂肪酶在肉仔雞腸道發(fā)育及實(shí)際養(yǎng)殖生產(chǎn)中的潛在需求，本次試驗(yàn)所有處理組肉仔雞日糧中沒有添加任何飼用抗生素及化學(xué)合成抗菌藥物。因此，為了減少雛雞腹瀉等腸道疾病對(duì)本試驗(yàn)結(jié)果的干擾，將試驗(yàn)日糧粗蛋白水平設(shè)置在20%的較低水平。試驗(yàn)日糧低溫（65℃）制粒。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)附屬試驗(yàn)雞場(chǎng)進(jìn)行。仔雞按照常規(guī)免疫程序和生產(chǎn)管理進(jìn)行，試驗(yàn)周期21 d。使用三層重疊式雞籠飼養(yǎng)，籠外掛食槽和乳頭式飲水器。雞舍條件（房屋結(jié)構(gòu)、溫度、濕度、氣流、飼養(yǎng)密度）一致。

1.4 測(cè)定指標(biāo)

1.4.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定

測(cè)定體重、飼料消耗、統(tǒng)計(jì)死亡雞只數(shù)量，計(jì)算平均日增重、平均日采食量、料重比等指標(biāo)。

1.4.2 飼料養(yǎng)分表觀代謝率

采用Cr2O3指示劑法，測(cè)定肉雞1～7日齡、8～14日齡和15～21日齡三階段的飼料養(yǎng)分表觀代謝率，具體方法參考樊月圓等文章研究報(bào)道的方法[13]。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)結(jié)果用SPSS軟件One Way ANOVA方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并進(jìn)行Duncan's多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 飼用脂肪酶對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

飼用脂肪酶對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響見表2。

由表2可知，21日齡處理組3肉仔雞體重顯著大于處理組1和處理組2（P＜0.05）。15～21日齡和1～21日齡處理組3平均日增重顯著大于處理組1和處理組2（P＜0.05）；處理組3飼料增重比肉仔雞顯著優(yōu)于處理組1和處理組2（P＜0.05）。處理組3死亡率低于處理組1和處理組2。平均日采食量差異不顯著（P＞0.05）。

表2 飼用脂肪酶對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼用脂肪酶酶對(duì)肉仔雞飼料養(yǎng)分表觀代謝率影響

飼用脂肪酶對(duì)肉雞仔飼料養(yǎng)分利用的影響見表3。由表3可知，15～21日齡階段，處理組3肉雞表觀代謝能顯著大于處理組1和處理組2（P＜0.05）；粗脂肪表觀代謝率指標(biāo)，雖然處理組3肉仔雞有大于處理組1和處理組2的趨勢(shì)，但差異不顯著（0.05＜P＜0.1）。粗蛋白質(zhì)表觀代謝率指標(biāo)，3個(gè)處理組之間差異不顯著（P＞0.05）。

表3 飼用脂肪酶對(duì)肉仔雞飼料養(yǎng)分利用的影響

3 討論

飼料企業(yè)配方師選用脂肪酶主要基于以下觀點(diǎn)，補(bǔ)充動(dòng)物腸道、尤其是幼齡動(dòng)物腸道內(nèi)源脂肪酶的不足，改善飼糧油脂及能量的利用率，預(yù)防脂肪消化不良帶來的腸道疾病，提高動(dòng)物生產(chǎn)性能。然而，這一觀點(diǎn)值得重新審視，尤其在當(dāng)前畜禽、水產(chǎn)飼料禁抗呼聲日漸高漲的今天，無論是國(guó)外以往的科學(xué)試驗(yàn)研究，還是當(dāng)前國(guó)內(nèi)單一飼用脂肪酶的推廣及添加效果均表明，當(dāng)前市售的飼用脂肪酶難以像植酸酶和非淀粉多糖酶一樣發(fā)揮穩(wěn)定的正效應(yīng)[11-12]。

綜合國(guó)內(nèi)外飼用脂肪酶的相關(guān)試驗(yàn)研究及大量生產(chǎn)實(shí)踐，總結(jié)了影響飼用脂肪酶實(shí)際應(yīng)用效果的3大類因素：脂肪酶產(chǎn)品的來源、工藝與抗逆性，包括脂肪酶發(fā)酵菌株來源、發(fā)酵工藝穩(wěn)定性、產(chǎn)品的耐熱性、過胃能力及抗消化能力等[6]；飼料原料的選擇，包括添加的油脂類型；基礎(chǔ)飼料原料選擇、飼料添加劑及抗生素的使用等[12]。

為了盡可能減少以上諸多因素的干擾，本次試驗(yàn)重點(diǎn)考慮了以下因素：針對(duì)脂肪酶發(fā)酵菌種的差異，對(duì)比研究細(xì)菌源脂肪酶Ⅰ與真菌源脂肪酶Ⅱ在肉仔雞日糧中的使用效果；符合當(dāng)前與未來我國(guó)飼料工業(yè)與養(yǎng)殖業(yè)禁抗的發(fā)展趨勢(shì)，采用無抗生素試驗(yàn)日糧，并將試驗(yàn)日糧配方粗蛋白質(zhì)水平設(shè)置在20%較低水平，盡量降低雛雞營(yíng)養(yǎng)消化不良對(duì)本試驗(yàn)的干擾；采用“玉米-豆粕-油脂”型簡(jiǎn)單日糧配方技術(shù)，盡量減少原料類型與品質(zhì)對(duì)試驗(yàn)的干擾。在此條件下，試驗(yàn)配方中大豆油添加約3%，實(shí)測(cè)試驗(yàn)飼料粗脂肪水平達(dá)到5.6%較高水平[7]。

本試驗(yàn)詳細(xì)研究了兩類飼用脂肪酶對(duì)肉仔雞生產(chǎn)性能的影響，表2結(jié)果表明，脂肪酶Ⅱ組（真菌源脂肪酶）肉仔雞生產(chǎn)性能顯著優(yōu)于對(duì)照組與脂肪酶Ⅰ組（細(xì)菌源脂肪酶），對(duì)照組與脂肪酶Ⅰ組肉雞生產(chǎn)性能基本相似。以上結(jié)果表明，本試驗(yàn)條件下，真菌源脂肪酶補(bǔ)充肉仔雞內(nèi)源脂肪酶不足，改善其生產(chǎn)性能。然而，細(xì)菌源脂肪酶沒有明顯的正效應(yīng)，但也沒有負(fù)效應(yīng)發(fā)生。這一結(jié)果與劉德海等和葉慧等的報(bào)道一致[6,8]。研究表明，已發(fā)現(xiàn)65個(gè)屬、約2%的微生物能產(chǎn)脂肪酶，且不同微生物生產(chǎn)的脂肪酶結(jié)構(gòu)、性質(zhì)等差異較大，主要反映在酶的活性作用位點(diǎn)、最適反應(yīng)溫度、最適pH、抗逆性等[6]。按最適pH劃分，脂肪酶可分為酸性、中性和堿性脂肪酶。細(xì)菌源脂肪酶最適pH主要集中在中性、堿性范圍，真菌源脂肪酶最適pH為4～10，范圍較廣，且最適酶反應(yīng)溫度較低。參考雛雞胃腸道pH及溫度等理化特性，與細(xì)菌源脂肪酶相比，真菌源脂肪酶更能滿足雛雞胃腸道消化需要，這也與表2結(jié)果一致[14-15]。

腸道食糜中脂肪酶主要來自胰臟與腸上皮細(xì)胞分泌，于旭華等和張鐵鷹等研究了1～21日齡肉仔雞腸道中食糜脂肪酶活性，結(jié)果表明，仔雞出生時(shí)腸道就具備較高的脂肪酶活性，并在1～14日齡持續(xù)升高，然而15～21日齡脂肪酶出現(xiàn)了下降的趨勢(shì)，雖然這一趨勢(shì)并未達(dá)到顯著的水平[16-17]。以上結(jié)果表明，與仔豬相比，雛雞腸道中脂肪酶的發(fā)育規(guī)律與仔豬差異較大[11]。本次試驗(yàn)研究表明，添加真菌源脂肪酶的試驗(yàn)組3肉仔雞飼料轉(zhuǎn)化效率最高，且這一優(yōu)勢(shì)主要發(fā)生在15～21日齡階段。針對(duì)這一結(jié)果，進(jìn)一步分析飼料表觀代謝率，結(jié)果表明，15～21日齡階段，真菌源脂肪酶組肉仔雞表觀代謝能顯著大于對(duì)照組和細(xì)菌源脂肪酶組（P＜0.05）；粗脂肪表觀代謝率指標(biāo)，真菌源脂肪酶組肉仔雞數(shù)值最高，具有大于對(duì)照組和細(xì)菌源脂肪酶組的趨勢(shì)。且1～14日齡階段，能量、粗脂肪、粗蛋白的表觀代謝率，3個(gè)處理組之間均無顯著差異（P＞0.05）。以上結(jié)果表明，在肉仔雞腸道中脂肪酶持續(xù)升高的1～14日齡階段，補(bǔ)充外源脂肪酶不能獲得改善生產(chǎn)性能的效果；而在肉仔雞腸道中脂肪酶發(fā)生下降趨勢(shì)的15～21日齡階段，日糧補(bǔ)充真菌源脂肪酶具有改善其生產(chǎn)性能的正效應(yīng)。這一結(jié)論表明，在生產(chǎn)實(shí)踐中建議飼料企業(yè)與養(yǎng)殖企業(yè)在肉仔雞飼料尤其是2周齡之后的肉仔雞飼料中添加真菌源脂肪酶能夠獲得改善其生產(chǎn)性能的最佳效果。

本試驗(yàn)肉仔雞日糧添加大豆油約3%，飼料粗脂肪總含量達(dá)到了5.6%，對(duì)比現(xiàn)有的科學(xué)試驗(yàn)報(bào)道和實(shí)際企業(yè)生產(chǎn)配方，設(shè)計(jì)的肉仔雞日糧總脂肪水平偏高[7]。在沒有添加任何抗生素和化學(xué)合成抑菌藥物的條件下，與對(duì)照組和細(xì)菌源脂肪酶組相比，真菌源脂肪酶組肉仔雞的死亡率最低?？赡苁且?yàn)橥庠从行е久傅奶砑犹岣呷占Z脂肪利用率，增強(qiáng)雛雞能量吸收及營(yíng)養(yǎng)免疫，減少營(yíng)養(yǎng)消化不良對(duì)腸道的潛在危害效應(yīng)。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，針對(duì)肉仔雞腸道生理的發(fā)育特點(diǎn)，在禁抗呼聲日益高漲的今天，真菌源脂肪酶是肉仔雞無抗日糧配方的有效添加劑。

4 小結(jié)

本試驗(yàn)表明，在無抗簡(jiǎn)單日糧配方條件下，真菌源脂肪酶能夠改善1～21日齡肉仔雞的生產(chǎn)性能，降低肉仔雞死亡率。建議廣大家禽飼料生產(chǎn)廠與養(yǎng)殖企業(yè)科學(xué)的選擇外源飼用脂肪酶產(chǎn)品。

[1]張金,馬躍.肉雞飼養(yǎng)管理要點(diǎn)[J].飼料博覽,2016（8）:48-49.

[2]王冠穎.酶在飼料中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].飼料博覽,2016（8）: 34-37.

[3]張曉云,周同茂,段寶軒,等.枯草芽孢桿菌高耐菌株泡騰制劑對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、盲腸腸道菌群的影響[J].飼料博覽,2016（8）:40-44.

[4]王樂,王衛(wèi)杰,李惠,等.不同飼料添加劑對(duì)雞生產(chǎn)性能和免疫功能的研究進(jìn)展[J].飼料博覽,2016（8）:37-39,47.

[5]張文靜,雷連成,魏靜元.植物精油對(duì)肉仔雞血液生化指標(biāo)及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響[J].飼料博覽,2016（4）:1-4,21.

[6]劉德海,解復(fù)紅,賈彬,等.脂肪酶及其在飼料中的應(yīng)用[J].中國(guó)飼料,2012（16）:31-33.

[7]李路勝,徐志祥,馮定遠(yuǎn),等.脂肪酶前處理油脂的效果及其對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響[J].飼料工業(yè),2016（14）:36-41.

[8]葉慧,雷建平,馮定遠(yuǎn),等.不同微生物脂肪酶對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)和胸肌脂肪含量的影響[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2013,34（3）:399-404.

[9]翁曉輝,鄒偉雄,王敏,等.脂肪酶在白羽肉雞上的應(yīng)用效果研究[J].中國(guó)飼料,2013（19）:27-29.

[10]龔俊勇,李芳林,單安山,等.日糧中添加脂肪酶對(duì)白羽肉雞生長(zhǎng)性能、血液生化指標(biāo)、腹脂率的影響[J].飼料工業(yè),2015（14）:41-45.

[11]鄭榮輝,左建軍,龔俊勇.脂肪酶對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分利用率及血清生化指標(biāo)的影響[J].飼料工業(yè),2016,37（6）:21-25.

[12]程瑛,王冠,徐麗,等.脂肪酶在飼料工業(yè)中的應(yīng)用[J].飼料博覽,2012（7）:33-35.

[13]樊月圓,廖國(guó)周,張紅兵,等.枯草芽孢桿菌對(duì)地面平養(yǎng)和籠養(yǎng)肉雞飼料營(yíng)養(yǎng)利用率及血液生化指標(biāo)的影響[J].飼料博覽, 2012（10）:1-6.

[14]俞偉輝.早期限飼對(duì)肉雞脂肪代謝的影響[J].飼料博覽,2015（7）:1-6.

[15]許金根,車傳燕,聞愛友,等.酸化劑對(duì)肉雞免疫器官指數(shù)、腸道pH值和血清生化指標(biāo)的影響[J].飼料工業(yè),2016,37（8）: 12-15.

[16]于旭華,汪儆,孫哲,等.黃羽肉仔雞脂肪酶的發(fā)育規(guī)律及小麥SNSP對(duì)其活性的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2001,13（3）:60-64.

[17]張鐵鷹,汪儆,李永清.0～49日齡肉仔雞消化參數(shù)的變化規(guī)律研究[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2005,32（1）:6-10.

Effects of Lipase on the Growth Performance of White-Feathered Broilers

CHENG Zhibin1,SU Zifeng2,WANG Guiying3,BAI Huayi1,LIAO Guozhou3,FAN Jiangping3, WANG Xuefeng3,HE Jinsong3,PU Yuehong3,WANG Chun4,ZOU Jianhua5,GU Dahai3*

（1.Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed Science,Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,China;
2.Department of Agriculture and Biological Science of Dali University,Dali 671003,Yunan China;
3.Livestock Product Processing Engineering and Technology Research Center of Yunnan Province, Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,China;
4.Kunming Saturn Biotechnology Group Co.,Ltd.,Kunming 650217,China;
5.Animal Husbandry and Veterinary Station of Mengla County in Xishuangbanna of Yunnan Province,Mengla 666300,Yunan China）

This trial assigned 900 new born AA broilers to three groups and aimed to study the effects of lipase on the growth performance of white feather broilers.Group 1 was the control group and no antibiotics or chemical synthesis of antimicrobial agents were added in this experimental diet.Group 2 and Group 3 were the addition of the bacteria or fungi-source lipase.The results showed the average daily gain and the apparent metabolic energy of Group 3 were higher than those of Group 1 and Group 2 in 15 to 21 days of broilers(P＜0.05).The ratio of feed intake to body weightgain of Group 3 broilers were better than Group 1 and Group 2(P＜0.05).The apparent metabolic rate of crade fat of Group 3 were higher than Group 1 and Group 2(0.05＜P＜0.1).The mortality of Group 3 were low compared with the other two groups.These findings proved that fungi source lipase supplemented in no antibiotics diets could improve the growth performance and nutrient utilization,decrease the mortality for 1 to 21 daysof broilers.

lipase;white feather broiler;growth performance

S816.7；S831

A

1001-0084（2016）11-0001-05

2016-10-11

昆明市科技計(jì)劃項(xiàng)目（昆科計(jì)字2014-04-A-N-02-3078號(hào)）

程志斌（1977-），男，江西南昌人，博士，副教授，主要從事動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與畜產(chǎn)品質(zhì)量控制研究。

*通訊作者：E-mail:848366490@qq.com。