徐 妍,王昌錦,馬 超,潘 靜,王 佳,東 琴,高敬雨(.北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司,北京 00085;.燕京理工學(xué)院,河北三河 0650)
45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑高效液相色譜分析
徐 妍1,王昌錦2,馬 超1,潘 靜1,王 佳1,東 琴1,高敬雨1
(1.北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司,北京 100085;2.燕京理工學(xué)院,河北三河 065201)
建立高效液相色譜法分離測(cè)定45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑中有效成分。采用CHIRALPAK AY-H手性柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器,以正己烷+無水乙醇為流動(dòng)相,測(cè)定試樣中精異丙甲草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。方法的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.21,變異系數(shù)為0.46%,平均回收率為99.71%。該方法操作簡(jiǎn)便,分離效果好,精密度與準(zhǔn)確度高。
精異丙甲草胺;微囊懸浮劑;高效液相色譜;分析
精異丙甲草胺(S-metolachlor)是由諾華公司(現(xiàn)先正達(dá))開發(fā)的氯乙酰胺類芽前除草劑。其為(aRS,1S)-2-氯-6'-乙基-N-(2-甲氧基-1-甲基乙基)乙酰鄰甲苯胺和(aRS,1R)-2-氯-6'-乙基-N-(2-甲氧基-1-甲基乙基)乙酰鄰甲苯胺的混合物,質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為80%~100%、20%~0。精異丙甲草胺主要通過阻礙蛋白質(zhì)的合成而抑制細(xì)胞生長(zhǎng),可有效防除棉花、花生、玉米、馬鈴薯、甘蔗等作物田的一年生禾本科雜草和部分闊葉雜草[1]。精異丙甲草胺在某些市場(chǎng)正逐步取代異丙甲草胺,此外,控制釋放技術(shù)的發(fā)展,尤其是微膠囊制劑的出現(xiàn),更是促進(jìn)了精異丙甲草胺在國(guó)內(nèi)外的推廣使用。但有關(guān)精異丙甲草胺微囊懸浮劑的高效液相色譜分析方法,目前尚未見公開報(bào)道[2-3]。
本文建立了高效液相色譜法測(cè)定45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑中有效成分。該方法具有簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確,靈敏度高,重復(fù)性好的特點(diǎn),同時(shí)適用于精異丙甲草胺原藥及其他制劑的分析。
1.1 儀器與試劑
Agilent 1260高效液相色譜儀,具有紫外檢測(cè)器和自動(dòng)進(jìn)樣器;Agilent色譜工作站;島津UV-1800紫外可見分光光度計(jì);Agilent CHIRALPAK AY-H不銹鋼手性柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)。
正己烷、無水乙醇(色譜純);精異丙甲草胺標(biāo)樣(≥98.0%),中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院提供;45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑,北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司提供。
1.2 色譜條件
檢測(cè)波長(zhǎng):230 nm;流動(dòng)相:V(正己烷)∶V(無水乙醇)=97∶3;流速:0.6 mL/min;進(jìn)樣量:5 μL;柱溫:25℃。保留時(shí)間:精異丙甲草胺(aRS,1S)約18.3 min和19.5 min,(aRS,1R)約23.1 min和25.5 min(見圖1、圖2)。
圖1 精異丙甲草胺標(biāo)樣液相色譜圖
圖2 45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑試樣液相色譜圖
1.3 溶液配制
1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制
稱取精異丙甲草胺標(biāo)樣0.1 g(精確至0.000 2 g)于100 mL容量瓶中,用流動(dòng)相溶解并定容至刻度,搖勻后備用。
1.3.2 試樣溶液的配制
稱取試樣約0.2 g(精確至0.000 2 g)于100 mL容量瓶中,用流動(dòng)相溶解并定容至刻度,搖勻后備用。
1.4 測(cè)定
在上述色譜操作條件下,待儀器基線穩(wěn)定后,連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液,計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值。直至相鄰2針精異丙甲草胺的響應(yīng)值相對(duì)變化小于1.2%時(shí),按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。用外標(biāo)法計(jì)算含量。
1.5 計(jì)算
將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中的精異丙甲草胺峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中精異丙甲草胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)w(%)按下式計(jì)算。
式中:A1—標(biāo)樣溶液中精異丙甲草胺(aRS,1S)峰面積的平均值;A2—試樣溶液中精異丙甲草胺(aRS,1S)峰面積的平均值;m1—標(biāo)樣的質(zhì)量,g;m2—試樣的質(zhì)量,g;P—標(biāo)樣中,精異丙甲草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%。
2.1 色譜條件的選擇
2.1.1 流動(dòng)相的選擇
分別試用不同體積比的正己烷+無水乙醇作為流動(dòng)相對(duì)試樣進(jìn)行分離檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),用正己烷+無水乙醇(體積比97∶3)作為流動(dòng)相能夠得到分離完全的異構(gòu)體色譜峰,且峰型對(duì)稱,保留時(shí)間適中。最終確定以正己烷+無水乙醇作為流動(dòng)相,體積比為97∶3。
2.1.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇
對(duì)精異丙甲草胺標(biāo)樣溶液進(jìn)行紫外掃描,獲得紫外光譜圖(圖3)。從譜圖可以看出,在230 nm波長(zhǎng)條件下,精異丙甲草胺具有較強(qiáng)吸收峰。同時(shí)在此波長(zhǎng)下,雜質(zhì)響應(yīng)值小,流動(dòng)相無吸收。因此,綜合考慮多種因素,最終選定230 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。
圖3 精異丙甲草胺的紫外吸收?qǐng)D
2.2 分析方法的線性相關(guān)性
配制精異丙甲草胺一系列不同質(zhì)量濃度的標(biāo)樣溶液,在上述色譜操作條件下,測(cè)定相應(yīng)響應(yīng)值。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到精異丙甲草胺的線性相關(guān)曲線(圖4)。精異丙甲草胺線性方程為y=14.531 9 x-403.271 9,相關(guān)系數(shù)為0.999 3。表明方法的線性關(guān)系良好。
圖4 精異丙甲草胺線性關(guān)系圖
2.3 分析方法的精密度實(shí)驗(yàn)
在上述色譜操作條件下,對(duì)同一微囊懸浮劑樣品平行測(cè)定5次,結(jié)果見表1。精異丙甲草胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.21,變異系數(shù)為0.46%。
表1 45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑精密度實(shí)驗(yàn)
2.4 分析方法的準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)
稱取5個(gè)已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑樣品,分別加入一定量的精異丙甲草胺標(biāo)樣,按上述色譜條件分別測(cè)定其中的精異丙甲草胺總質(zhì)量并計(jì)算回收率,結(jié)果見表2。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,精異丙甲草胺添加回收率在99.08%~100.38%之間,平均回收率為99.71%。方法準(zhǔn)確度較高,可以準(zhǔn)確分析制劑中精異丙甲草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。
表2 45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑回收率實(shí)驗(yàn)
綜上所述,實(shí)驗(yàn)建立的45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑中有效成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)的高效液相色譜分析方法,線性關(guān)系良好,具有較高的準(zhǔn)確度和精密度,并且操作簡(jiǎn)便、快速,可以用于產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)。
[1]劉長(zhǎng)令.世界農(nóng)藥大全:除草劑卷 [M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社, 2002:266-268.
[2]張大同,徐秀珠,蔡小軍,等.異丙甲草胺立體異構(gòu)體在高效液相色譜手性固定相上的分離[J].分析化學(xué),2004,32(2):191-194.
[3]吳培,林波,劉敬民.高效異丙甲草胺的高效液相色譜手性分離分析[J].農(nóng)藥,2008,47(9):655-656.
Analysis of S-Metolachlor 45%CS by HPLC
XU Yan1,WANG Chang-jin2,MA Chao1,PAN Jing1,WANG Jia1,DONG Qin1,GAO Jing-yu1
(1.Beijing Mindleader Agroscience Co.,Ltd.,Beijing 100085,China;2.Yanching Institute of Technology,Hebei Sanhe 065201,China)
A HPLC method for determination of active ingredient in S-metolachlor 45%CS was established,with CHIRALPAK AY-H chiral chromatography column and UV-absorbance detector,the mixture of n-hexane and ethanol was used as mobile phase.The results showed that the standard deviation,variation coefficient and average recovery of S-metolachlor were 0.21,0.46%,99.71%,respectively.The method was simple,convenient,and had good separating effect,high precision and accuracy.
S-metolachlor;CS;HPLC;analysis
S 450.7
A
10.3969/j.issn.1671-5284.2016.03.009
2016-03-02
徐妍(1975—),女,遼寧省昌圖縣人,高級(jí)工程師,主要從事農(nóng)藥劑型加工及使用技術(shù)研究。E-mail:xuyan@mdldagro.com
柏亞羅)