徐 妍，王昌錦，馬 超，潘 靜，王 佳，東 琴，高敬雨（.北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司，北京 00085；.燕京理工學(xué)院，河北三河 0650）

45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑高效液相色譜分析

徐 妍1，王昌錦2，馬 超1，潘 靜1，王 佳1，東 琴1，高敬雨1
（1.北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司，北京 100085；2.燕京理工學(xué)院，河北三河 065201）

建立高效液相色譜法分離測(cè)定45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑中有效成分。采用CHIRALPAK AY-H手性柱和紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器，以正己烷+無水乙醇為流動(dòng)相，測(cè)定試樣中精異丙甲草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。方法的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.21，變異系數(shù)為0.46%，平均回收率為99.71%。該方法操作簡(jiǎn)便，分離效果好，精密度與準(zhǔn)確度高。

精異丙甲草胺；微囊懸浮劑；高效液相色譜；分析

精異丙甲草胺（S-metolachlor）是由諾華公司（現(xiàn)先正達(dá)）開發(fā)的氯乙酰胺類芽前除草劑。其為（aRS,1S）-2-氯-6'-乙基-N-（2-甲氧基-1-甲基乙基）乙酰鄰甲苯胺和（aRS,1R）-2-氯-6'-乙基-N-（2-甲氧基-1-甲基乙基）乙酰鄰甲苯胺的混合物，質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為80%～100%、20%～0。精異丙甲草胺主要通過阻礙蛋白質(zhì)的合成而抑制細(xì)胞生長(zhǎng)，可有效防除棉花、花生、玉米、馬鈴薯、甘蔗等作物田的一年生禾本科雜草和部分闊葉雜草［1］。精異丙甲草胺在某些市場(chǎng)正逐步取代異丙甲草胺，此外，控制釋放技術(shù)的發(fā)展，尤其是微膠囊制劑的出現(xiàn)，更是促進(jìn)了精異丙甲草胺在國(guó)內(nèi)外的推廣使用。但有關(guān)精異丙甲草胺微囊懸浮劑的高效液相色譜分析方法，目前尚未見公開報(bào)道［2-3］。

本文建立了高效液相色譜法測(cè)定45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑中有效成分。該方法具有簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，靈敏度高，重復(fù)性好的特點(diǎn)，同時(shí)適用于精異丙甲草胺原藥及其他制劑的分析。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 1260高效液相色譜儀，具有紫外檢測(cè)器和自動(dòng)進(jìn)樣器；Agilent色譜工作站；島津UV-1800紫外可見分光光度計(jì)；Agilent CHIRALPAK AY-H不銹鋼手性柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）。

正己烷、無水乙醇（色譜純）；精異丙甲草胺標(biāo)樣（≥98.0%），中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院提供；45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑，北京明德立達(dá)農(nóng)業(yè)科技有限公司提供。

1.2 色譜條件

檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；流動(dòng)相：V（正己烷）∶V（無水乙醇）=97∶3；流速：0.6 mL/min；進(jìn)樣量：5 μL；柱溫：25℃。保留時(shí)間：精異丙甲草胺（aRS,1S）約18.3 min和19.5 min，（aRS,1R）約23.1 min和25.5 min（見圖1、圖2）。

圖1 精異丙甲草胺標(biāo)樣液相色譜圖

圖2 45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑試樣液相色譜圖

1.3 溶液配制

1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制

稱取精異丙甲草胺標(biāo)樣0.1 g（精確至0.000 2 g）于100 mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并定容至刻度，搖勻后備用。

1.3.2 試樣溶液的配制

稱取試樣約0.2 g（精確至0.000 2 g）于100 mL容量瓶中，用流動(dòng)相溶解并定容至刻度，搖勻后備用。

1.4 測(cè)定

在上述色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對(duì)響應(yīng)值。直至相鄰2針精異丙甲草胺的響應(yīng)值相對(duì)變化小于1.2%時(shí)，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。用外標(biāo)法計(jì)算含量。

1.5 計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中的精異丙甲草胺峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中精異丙甲草胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按下式計(jì)算。

式中：A1—標(biāo)樣溶液中精異丙甲草胺（aRS,1S）峰面積的平均值；A2—試樣溶液中精異丙甲草胺（aRS,1S）峰面積的平均值；m1—標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2—試樣的質(zhì)量，g；P—標(biāo)樣中，精異丙甲草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

2.1.1 流動(dòng)相的選擇

分別試用不同體積比的正己烷+無水乙醇作為流動(dòng)相對(duì)試樣進(jìn)行分離檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用正己烷+無水乙醇（體積比97∶3）作為流動(dòng)相能夠得到分離完全的異構(gòu)體色譜峰，且峰型對(duì)稱，保留時(shí)間適中。最終確定以正己烷+無水乙醇作為流動(dòng)相，體積比為97∶3。

2.1.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

對(duì)精異丙甲草胺標(biāo)樣溶液進(jìn)行紫外掃描，獲得紫外光譜圖（圖3）。從譜圖可以看出，在230 nm波長(zhǎng)條件下，精異丙甲草胺具有較強(qiáng)吸收峰。同時(shí)在此波長(zhǎng)下，雜質(zhì)響應(yīng)值小，流動(dòng)相無吸收。因此，綜合考慮多種因素，最終選定230 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

圖3 精異丙甲草胺的紫外吸收?qǐng)D

2.2 分析方法的線性相關(guān)性

配制精異丙甲草胺一系列不同質(zhì)量濃度的標(biāo)樣溶液，在上述色譜操作條件下，測(cè)定相應(yīng)響應(yīng)值。以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到精異丙甲草胺的線性相關(guān)曲線（圖4）。精異丙甲草胺線性方程為y=14.531 9 x-403.271 9，相關(guān)系數(shù)為0.999 3。表明方法的線性關(guān)系良好。

圖4 精異丙甲草胺線性關(guān)系圖

2.3 分析方法的精密度實(shí)驗(yàn)

在上述色譜操作條件下，對(duì)同一微囊懸浮劑樣品平行測(cè)定5次，結(jié)果見表1。精異丙甲草胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.21，變異系數(shù)為0.46%。

表1 45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑精密度實(shí)驗(yàn)

2.4 分析方法的準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

稱取5個(gè)已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑樣品，分別加入一定量的精異丙甲草胺標(biāo)樣，按上述色譜條件分別測(cè)定其中的精異丙甲草胺總質(zhì)量并計(jì)算回收率，結(jié)果見表2。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，精異丙甲草胺添加回收率在99.08%～100.38%之間，平均回收率為99.71%。方法準(zhǔn)確度較高，可以準(zhǔn)確分析制劑中精異丙甲草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

表2 45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑回收率實(shí)驗(yàn)

3 結(jié)論

綜上所述，實(shí)驗(yàn)建立的45%精異丙甲草胺微囊懸浮劑中有效成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)的高效液相色譜分析方法，線性關(guān)系良好，具有較高的準(zhǔn)確度和精密度，并且操作簡(jiǎn)便、快速，可以用于產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)。

［1］劉長(zhǎng)令.世界農(nóng)藥大全：除草劑卷 ［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社, 2002：266-268.

［2］張大同,徐秀珠,蔡小軍,等.異丙甲草胺立體異構(gòu)體在高效液相色譜手性固定相上的分離［J］.分析化學(xué),2004,32（2）：191-194.

［3］吳培,林波,劉敬民.高效異丙甲草胺的高效液相色譜手性分離分析［J］.農(nóng)藥,2008,47（9）：655-656.

Analysis of S-Metolachlor 45%CS by HPLC

XU Yan1,WANG Chang-jin2,MA Chao1,PAN Jing1,WANG Jia1,DONG Qin1,GAO Jing-yu1
（1.Beijing Mindleader Agroscience Co.,Ltd.,Beijing 100085,China；2.Yanching Institute of Technology,Hebei Sanhe 065201,China）

A HPLC method for determination of active ingredient in S-metolachlor 45%CS was established,with CHIRALPAK AY-H chiral chromatography column and UV-absorbance detector,the mixture of n-hexane and ethanol was used as mobile phase.The results showed that the standard deviation,variation coefficient and average recovery of S-metolachlor were 0.21,0.46%,99.71%,respectively.The method was simple,convenient,and had good separating effect,high precision and accuracy.

S-metolachlor；CS；HPLC；analysis

S 450.7

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2016.03.009

2016-03-02

徐妍（1975—），女，遼寧省昌圖縣人，高級(jí)工程師，主要從事農(nóng)藥劑型加工及使用技術(shù)研究。E-mail：xuyan@mdldagro.com

柏亞羅）