鄺林娟,毛國華,陳 剛
(張家界市食品藥品檢驗所,湖南張家界 427000)
高效液相色譜法測定太太美容口服液中芍藥苷含量
鄺林娟,毛國華,陳 剛
(張家界市食品藥品檢驗所,湖南張家界 427000)
采用高效液相色譜法建立了太太美容口服液中芍藥苷含量的測定方法,即色譜柱為intersil型ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流動相為甲醇-0.4%冰醋酸(31∶69),流速為1.0 mL/min,檢測波長為230 nm。結果表明,芍藥苷的線性范圍為0.098 9~0.989 μg,R2=0.999 9,平均回收率為100.2%(n=9),相對標準偏差為1.1%。該方法簡便、快速、專屬性好,可用于太太美容口服液的品質(zhì)控制。
高效液相色譜;太太美容口服液;芍藥苷
太太美容口服液是由制首烏、白芍等10多味原料制成的保健品,經(jīng)功能試驗證明其具有美容(祛黃褐斑、改善皮膚水分)的保健功能。其中,白芍具有養(yǎng)血柔肝、緩中止痛等功效,芍藥苷是白芍的主要有效成分之一。有關芍藥苷的含量測定,文獻已報道很多,但對于太太美容口服液中芍藥苷的高效液相色譜法測定還未見報道。文獻中對于市售白芍飲片芍藥苷含量低于藥典標準[1]的現(xiàn)象多有報道,故增加芍藥苷含量測定作為太太美容口服液的一項品質(zhì)控制很有必要。試驗采用高效液相色譜法測定太太美容口服液中芍藥苷的含量,該方法可控性強、靈敏度高,結果準確可靠。
LC-20AT型高效液相色譜儀、AUW-220D型電子分析天平、UV-2450型紫外分光光度計,日本Sunseienee公司產(chǎn)品;LC solution色譜工作站、CTO-10AS型柱溫箱、SPD-20A型檢測器、SIL-20A型自動進樣器,上海昆山公司產(chǎn)品;0.45 μm微孔濾膜,津騰公司產(chǎn)品。
甲醇,分析醇,高效液相淋洗劑;冰醋酸,優(yōu)級純;純化水;太太美容口服液,深圳太太藥業(yè)有限公司(批號NO.13877)提供;芍藥苷,中國生物制品檢定所(批號110736-201136,含量為96.0%)提供。
2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗
依據(jù)《中國藥典2010年版一部》[2]中的“抗感顆?!焙繙y定項下的色譜條件,確定色譜條件如下:intersil ODS-3型色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相甲醇-0.4%冰醋酸(31∶69);波長230 nm;流速1.0 mL/min;柱溫30℃;進樣量10 μL,運行時間30 min。
2.2 對照品溶液的制備
精密稱取芍藥苷對照品12.88 mg(批號110736-201136,含量為96.0%)置于25 mL容量瓶中,加甲醇溶解至刻度,搖勻,即得0.494 5 mg/mL的芍藥苷溶液儲備液;再精密量取5 mL置于25 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,得98.91 μg/mL的對照品溶液。
2.3 樣品溶液的制備
按照參考文獻[3]資料,精密量取太太美容口服液5 mL置于50 mL棕色量瓶中,加甲醇約40 mL;超聲處理10 min,放冷至室溫,加甲醇至刻度,搖勻;靜置,取上清液用0.45 μm的濾頭濾過,取續(xù)濾液即可。
2.4 色譜測定
取芍藥苷對照品溶液與太太美容口服液樣品溶液各10 μL,按上述色譜條件進行測定。
芍藥苷對照品溶液色譜見圖1,太太美容口服液樣品溶液色譜見圖2。
圖1 芍藥苷對照品溶液色譜
圖2 太太美容口服液樣品溶液色譜
2.5 精密度試驗
精密量取同一芍藥苷對照品溶液(98.91 μg/mL),按照上述色譜條件重復進樣6次,結果峰面積的RSD值為0.22%(n=6),表明儀器的精密度良好。
2.6 對照品的線性考察
精密量取芍藥苷對照品(98.91 μg/mL)1,2,4,6,8,10 μL,依法進樣,記錄色譜圖,測定峰面積。以芍藥苷的進樣質(zhì)量(μg)為橫坐標、峰面積為縱坐標進行線性回歸,得回歸方程為Y=1 526 965.596X-12 725.030,R2=0.999 9(n=6),結果表明芍藥苷進樣在0.098 9~0.989 1 μg范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關系。
2.7 重現(xiàn)性試驗
取同一批號樣品同法制備6份供試品溶液,分別進行測定,結果含量的RSD為0.2%(n=6),表明方法重復性較好。
2.8 穩(wěn)定性試驗
取同一樣品溶液,按上述色譜條件分別在0,15,24 h測定峰面積,結果2份樣品溶液峰面積積分值的RSD分別為0.14%和0.08%,表明樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定。
2.9 準確度試驗(回收率)
取已知含量(0.547 5 mg/mL)的樣品各2 mL共9份,分別精密加入芍藥苷對照品溶液(0.494 5 mg/mL)1,2,3 mL,按供試品溶液制備方法同法制成加標供試品溶液(50 mL),并依法測定,計算回收率。
準確度試驗見表1。
表1 準確度試驗
2.10 樣品的測定
依照上述含量方法,測定3批次太太美容口服液的芍藥苷含量,結果3批次的芍藥苷含量分別為0.548,0.538,0.536 mg/mL。
(1)檢驗波長的選擇。取芍藥苷對照品稀釋液照紫外-可見分光光度法(中國藥典2010年版一部附錄ⅤA),于190~900 nm波長范圍內(nèi)進行全波長掃描,記錄吸收光譜,在230 nm波長處有最大吸收,故選擇230 nm為測定波長。
(2)流動相的選擇。曾用乙腈-0.1%磷酸,乙腈-0.1%冰醋酸,乙腈-0.3%冰醋酸,乙腈-0.4%冰醋酸,甲醇-0.4%冰醋酸等系統(tǒng),結果表明甲醇-0.4%冰醋酸(31∶69)系統(tǒng)最為理想,芍藥苷與其他成分能較好分離,且峰形好,無干擾。
試驗表明此方法可用于太太美容口服液中芍藥苷的含量測定,太太美容口服液中芍藥苷的含量不低于0.50 mg/mL。
[1]榮立新.對市售白芍飲片芍藥苷含量低于藥典標準的研究 [J].中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志,2007(11):865-866.
[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版一部 [M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:203.
[3]周志敏.HPLC測定益肝明目口服液中芍藥苷的含量[J].臨床合理用藥,2009(2):57-58.
Determination of Paeoniflorin Content in Taitai Meirong Oral Liquid by HPLC
KUANG Linjuan,MAO Guohua,CHEN Gang
(Institute for Food and Drug Control of Zhangjiajie,Zhangjiajie,Hu'nan 427000,China)
To establish a high performance liquid chromatography(HPLC) method for the determination of the paeoniflorin content in Taitai meirong oral liquid.The chromatographic column is the intersil ODS-3 column(250 mm×4.6 mm,5 μm)and the mobile phase is methanol-0.4%glacial acetic acid(31∶69).The detection wavelength is at 230 nm and the flow rate is 1.0 mL/min.The sample size of paeoniflorin within the range of 0.098 9~0.989 μg exhibited the good linear relation (R2=0.999 9) and the average recovery rate is 100.2%(n=9),RSD=1.1%.This method is simple,rapid and accurate,which is suitable for the quality control of Taitai meirong oral liquid.
high performance liquid chromatography(HPLC);Taitai meirong oral liquid;paeoniflorin
R286
A
10.16693/j.cnki.1671-9646(X).2016.11.011
1671-9646(2016)11a-0038-02
2016-09-22
鄺林娟(1981—),女,本科,主管中藥師,研究方向為食品藥品檢驗及相關檢驗標準。