徐芳琴，馬晨超，曹金一，楊志福，石小鵬，文愛東

（中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院藥劑科，陜西 西安　710032）

露源膠囊中枸杞子、女貞子的薄層色譜鑒別研究

徐芳琴，馬晨超，曹金一，楊志福，石小鵬，文愛東

（中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院藥劑科，陜西 西安710032）

目的 改進(jìn)露源膠囊的薄層色譜（TLC）鑒別方法。方法 采用TLC法對主要成分枸杞子和女貞子進(jìn)行定性鑒別。結(jié)果 薄層色譜斑點(diǎn)清晰，在與對照藥材或?qū)φ掌飞V相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光主斑點(diǎn)，陰性樣品無干擾。結(jié)論 該方法操作簡便，專屬性高，重復(fù)性好，可作為露源膠囊的質(zhì)量控制方法。

露源膠囊；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；薄層色譜法；枸杞子；女貞子

露源膠囊是第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院根據(jù)驗方研制的院內(nèi)制劑［蘭制字（2011）F68044號］，由當(dāng)歸、何首烏、枸杞子、女貞子等8味中藥組方，具有活血養(yǎng)血、滋補(bǔ)肝腎的功效。枸杞子味甘，性平，具有滋補(bǔ)肝腎、益精明目之功效，用于虛勞精虧、腰膝酸痛、眩暈耳鳴、內(nèi)熱消渴、血虛萎黃、目昏不明，為方中君藥；女貞子味甘、苦，性涼，具有補(bǔ)益肝腎、明目、清虛熱的功效，主治頭暈?zāi)垦?、須發(fā)早白、視物昏花、陰虛發(fā)熱，亦為方中君藥。該制劑所含藥味種類眾多，成分復(fù)雜，現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中僅有當(dāng)歸和制何首烏的薄層色譜（TLC）鑒別，不能完全滿足質(zhì)量控制的要求。本試驗中對該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了完善和提高，新增枸杞子和女貞子的薄層鑒別項，提高了現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對產(chǎn)品的可控性［1］。

1　儀器與試藥

1.1儀器

KQ-250DE型超聲波提取器（北京亞歐德鵬科技有限公司）；ZF-2型紫外光燈分析儀（上海市安亭電子儀器廠）；HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）；UPDR-11-20型優(yōu)普超純水機(jī)（四川優(yōu)普超純科技有限公司），硅膠G薄層板（厚度0.20～0.25 mm，青島海洋化工廠分廠）；硅膠G薄層板（自制）。

1.2試藥

枸杞子對照藥材（批號為121232-201102）、女貞子對照藥材（批號為121041-200703），均購自中國藥品生物制品檢定所；露源膠囊（第四軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥品制劑科提供，批號分別為140802，140803，140804）；乙酸乙酯、三氯甲烷、甲酸、甲醇、環(huán)己烷、甲苯及丙酮均為分析純，水為實(shí)驗室自制純化水。

2　方法與結(jié)果

2.1枸杞子的TLC鑒別［2-5］

2.1.1溶液制備

參照2010年版《中國藥典（一部）》枸杞子鑒別方法，取本品10粒，加水35 mL，加熱煮沸15 min，放冷，濾過，濾液用乙酸乙酯15 mL振搖提取，分取乙酸乙酯液，濃縮至1 mL，作為供試品溶液。取枸杞子對照藥材0.5 g，按供試品溶液制備方法制成對照藥材溶液。取陰性對照樣品1.5 g，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。

2.1.2展開系統(tǒng)選擇

照2010年版《中國藥典（一部）》薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10 μL，用硅膠G薄層板考察了2種展開系統(tǒng)的分離效果，展開劑選擇乙酸乙酯-三氯甲烷-甲酸（3∶2∶1）和甲苯-乙酸乙酯-甲酸（6∶4∶0.2）。結(jié)果顯示，苯-乙酸乙酯-甲酸（6∶4∶0.2）的分離效果較好，見圖1。

2.1.3方法學(xué)考察

專屬性試驗：依照處方取除枸杞子以外的藥材，按照樣品制備工藝制成陰性對照樣品，照2.1.1項下方法制備陰性對照品溶液。結(jié)果顯示，陰性對照品溶液無干擾，專屬性良好，見圖1。

圖1　露源膠囊中枸杞子專屬性TLC圖譜

耐用性試驗：考察不同來源的薄層板（硅膠G板，包括自鋪的和青島海洋化工廠提供的）。結(jié)果顯示，2種硅膠G板結(jié)果相同，但青島海洋化工廠的薄層板分離效果較自制板好，斑點(diǎn)更清晰，說明擬訂的鑒別方法耐用性較好，見圖2。

圖2　露源膠囊中枸杞子耐用性TLC圖譜

重復(fù)性試驗：按擬訂鑒別方法對3批樣品（批號分別為140802，141003，141204）進(jìn)行枸杞子的鑒別檢測。結(jié)果3批供試品色譜中，在與枸杞子對照藥材色譜相應(yīng)位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)，表明擬訂的枸杞子鑒別方法重復(fù)性良好，見圖3。

圖3　露源膠囊中枸杞子重復(fù)性TLC圖譜

2.2女貞子的TLC鑒別［6-10］

2.2.1溶液制備

參照2010年版《中國藥典（一部）》女貞子鑒別方法，取本品20粒加三氯甲烷20 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇1 mL溶解，作為供試品溶液。取女貞子對照藥材0.5 g，按供試品溶液制備方法制備對照藥材溶液。取陰性對照樣品3.0 g，按供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。

2.2.2展開系統(tǒng)選擇

照2010年版《中國藥典（一部）》薄層色譜法試驗，吸取上述溶液各10 μL，用硅膠G薄層板考察了2種展開系統(tǒng)的分離效果，展開劑為三氯甲烷-甲醇-甲酸（40∶1∶1）和環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯（5∶2∶1）。結(jié)果顯示，展開劑環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯的分離效果較好，見圖4。

2.2.3方法學(xué)考察

專屬性試驗：依照處方取除女貞子外的藥材，按照樣品制備工藝制成陰性對照樣品，照2.2.1項下供試品溶液制備方法制備陰性對照品溶液。結(jié)果顯示，陰性對照品溶液無干擾，方法專屬性較好，見圖4。

圖4　露源膠囊中女貞子TLC圖譜

耐用性試驗：考察不同來源的薄層板（硅膠G板，包括自鋪的和青島海洋化工廠提供的）。結(jié)果顯示，2種硅膠G板結(jié)果相同，但青島海洋化工廠的薄層板分離效果較自制板好，斑點(diǎn)更清晰，說明擬訂的鑒別方法耐用性較好，見圖5。

圖5　露源膠囊中女貞子耐用性TLC圖譜

重復(fù)性試驗：按擬訂的鑒別方法對3批樣品（批號分別為140802，141003，141204）進(jìn)行女貞子的鑒別檢測。結(jié)果3批供試品色譜中，在與女貞子對照藥材色譜相應(yīng)位置上，均顯相同顏色的主斑點(diǎn)，說明擬訂的枸杞子鑒別方法重復(fù)性良好，見圖6。

圖6　露源膠囊中女貞子重復(fù)性TLC圖譜

3　討論

薄層色譜是中藥鑒別、中藥成方制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)主要的研究和控制手段之一，其研究質(zhì)量對中藥成方制劑新藥項目的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有重要意義［11］。根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)，采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來鑒別藥物，是檢驗工作的首要任務(wù)，是雜質(zhì)檢查和含量測定的前提。因此，藥物鑒別在藥物質(zhì)量檢查中有著至關(guān)重要的地位。另外，TLC法是藥物鑒別最基本、簡便，使用最廣泛的方法，分別在化學(xué)藥品、抗生素、中藥材、中成藥及基層藥品的鑒別檢查中起重要作用［12］。

枸杞子、女貞子經(jīng)過處理提取制樣后，依照2015年版《中國藥典》薄層色譜法試驗，分別比較了2個展開系統(tǒng)的分離效果［13］。結(jié)果顯示，枸杞子以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（6∶4∶0.2）為展開系統(tǒng)，薄層效果斑點(diǎn)清晰，分離度好；女貞子以環(huán)己烷-丙酮-乙酸乙酯（5∶2∶1）為展開系統(tǒng)，薄層效果斑點(diǎn)清晰，分離度好［14］。

本試驗結(jié)果還表明，枸杞子、女貞子的TLC法的專屬性強(qiáng)、耐用性和重復(fù)性好，結(jié)果均較滿意［15］。因此，將該方法作為本制劑的TLC法納入露源膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，符合《軍隊醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高技術(shù)要求》。

［1］周建良，劉偉，譚春梅，等.五子衍宗丸的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.中國藥學(xué)雜志，2015，50（2）：125-130.

［2］常吉梅，常娟.芪柴護(hù)肝顆粒的制備與質(zhì)量控制［J］.中國實(shí)用醫(yī)藥，2012，7（3）：251-252.

［3］劉莉，齊洋.杞菊地黃膠囊薄層鑒別方法的研究［J］.黑龍江醫(yī)藥，2014，27（3）：517-519.

［4］陳芳，殷楊，宋愿智.調(diào)經(jīng)祛斑片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.現(xiàn)代中醫(yī)藥，2014，34（1）：87-89.

［6］黎麗，吳其當(dāng)，黃錦威，等.糖安膠囊的薄層鑒別研究［J］.北方藥學(xué)，2014，11（4）：9.

［7］欒蘭，肖永慶，李麗，等.女貞子飲片質(zhì)量評價研究［J］.中國藥事，2013，27（7）：715-717.

［8］范梅娟.強(qiáng)力健身膠囊定性定量方法的研究［J］.藥物分析雜志，2012，32（4）：697-700.

［9］牛倩倩，陳夢鈺，焦海勝.健腎Ⅱ號膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2016，34（7）：1 781-1 783.

［10］周揚(yáng)，劉力，徐德生.女貞子飲片中特女貞苷的薄層色譜鑒別［J］.中國藥業(yè)，2013，22（19）：27-29.

［11］李向軍，王超，王永，等.中藥薄層色譜影響因素分析及應(yīng)用［J］.中國藥業(yè)，2011，20（14）：13-15.

［12］尹麗，宗蘭蘭，蒲曉輝，等.薄層色譜法在藥物分析中的應(yīng)用［J］.河南大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2016，35（2）：77-80.

［13］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：46，249.

［14］周軍，張茉，王杰.益肺清化膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究［J］.天津藥學(xué)，2015，27（4）：10-13.

［15］陶善斌，汪電雷.穿黃消炎膠囊的質(zhì)量控制研究［J］.安徽醫(yī)藥，2013，17（6）：932-934.

Identification of Lycium barbarumL and Ligustrum lucidum Ait in Luyuan Capsules by TLC

Xu Fangqin，Ma Chenchao，Cao Jinyi，Yang Zhifu，Shi Xiaopeng，Wen Aidong
（Department of Pharmacy，Xijing Hospital Affiliated to the Fourth Military Medical University，Xi′an，Shaanxi，China710032）

ObjectiveTo improve the TLC method for the identification of Luyuan Capsules.MethodsThe two chief herbs in the preparation，Lycium barbarum L and Ligustrum lucidum Ait were identified by TLC qualitatively.ResultsThe spots of the TLC were clear，and the main spots of the same color were the same in those control drugs.The negative samples had no interference.Conclusion The method is simple，high specific with good repeatability，which can be used as the quality control method of the Luyuan Capsules.Key words：Luyuan Capsules；quality standard；TLC；Lycium barbarum L；Ligustrum lucidum Ait

R284.1；R286.0

A

1006-4931（2016）20-0057-03

徐芳琴（1975-），女，陜西岐山人，漢族，大學(xué)本科，主管藥師，研究方向為臨床藥學(xué)，（電話）029-84771625（電子信箱）xfq750274＠sina.com；石小鵬，副主任藥師，碩士研究生導(dǎo)師，研究方向為臨床藥理學(xué)與藥事管理學(xué)，本文通訊作者，（電話）029-84775471。

（2016-07-13）