劉愛華 王 罡 陸 航

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外一大腸肛門外科，遼寧 錦州 121000)

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胃腺癌中CD44v6和核因子-κB的表達(dá)及相關(guān)性

劉愛華 王 罡 陸 航

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外一大腸肛門外科，遼寧 錦州 121000)

目的 應(yīng)用免疫組化方法檢測胃腺癌中CD44v6和細(xì)胞核因子(NF)-κB的表達(dá)特征，探討二者與臨床病理特征的關(guān)系及相關(guān)性。方法 經(jīng)病理醫(yī)師確診的69例胃腺癌患者作為觀察組，胃高級別上皮內(nèi)瘤變患者16例作為對照組1，胃低級別上皮內(nèi)瘤變患者16例作為對照組2，未見明顯異常的胃黏膜組織16例作為對照組3，均留取術(shù)后或鉗檢后的組織，經(jīng)石蠟包埋后應(yīng)用免疫組化方法檢測CD44v6和NF-κB的表達(dá)。結(jié)果 觀察組中CD44v6和NF-κB的陽性率均明顯高于對照組1、2和3。觀察組中CD44v6和NF-κB的陽性率與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管累犯相關(guān)，NF-κB的表達(dá)與浸潤深度相關(guān)。二者均與腫瘤的分化程度無相關(guān)性。線性相關(guān)分析顯示觀察組中CD44v6和NF-κB之間無明顯相關(guān)性。結(jié)論 胃腺癌中CD44v6和NF-κB表達(dá)升高，其可能有利于腫瘤的播散，二者高表達(dá)可能預(yù)示著不良的生物學(xué)行為。

胃腺癌；CD44v6；核因子(NF)-κB；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

胃癌最常見的類型是腺癌。病變進(jìn)展時治療效果常不理想，主要原因是胃癌細(xì)胞的不斷增殖，對周圍正常組織的侵襲生長，同時出現(xiàn)遠(yuǎn)處播散和轉(zhuǎn)移〔1〕。CD44基因的表達(dá)產(chǎn)物是一種表面的跨膜糖蛋白，屬于黏附分子，家族中的v6(CD44v6)是其經(jīng)典成員，研究顯示CD44v6可以改變腫瘤細(xì)胞表面黏附分子的構(gòu)成和功能〔2〕。細(xì)胞核因子(NF)-κB是一種轉(zhuǎn)錄因子，它是由復(fù)雜的多肽亞單位組成的，通過不同的二聚體選擇性地結(jié)合不同序列，從而對不同基因的表達(dá)進(jìn)行準(zhǔn)確調(diào)節(jié)〔3，4〕。本研究采用免疫組化方法檢測胃腺癌中CD44v6和NF-κB的表達(dá)并分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 我院2011年1月至2014年10月住院的胃腺癌手術(shù)患者69例作為觀察組，其中男36例，女33例，年齡35～85歲，平均57.8歲。術(shù)前無放、化療及免疫治療史，病理學(xué)組織證實為腺癌，其中高分化20例，中分化10例，低分化39例。胃高級別上皮內(nèi)瘤變患者16例作為對照組1，其中男8例，女8例，年齡33～68歲，平均51.5歲。胃低級別上皮內(nèi)瘤變患者16例作為對照組2，其中男9例，女7例，年齡32～78歲，平均50.5歲。未見明顯異常的胃黏膜組織16例作為對照組3，其中男8例，女8例，年齡36～78歲，平均54.5歲。四組一般臨床資料無明顯差異，具有可比性。

1.2 四組中CD44v6和NF-κB表達(dá)的檢測 四組術(shù)后標(biāo)本或內(nèi)鏡鉗檢標(biāo)本均應(yīng)用甲醛溶液固定，常規(guī)脫水后石蠟包埋，常規(guī)切片(4 μm)后行CD44v6和NF-κB蛋白的檢測。應(yīng)用免疫組化SP法檢測兩種蛋白的表達(dá)，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，蘇木素復(fù)染，均嚴(yán)格按說明書操作。

1.3 CD44v6和NF-κB結(jié)果判讀 CD44v6定位于細(xì)胞膜和(或)細(xì)胞質(zhì)，NF-κB定位于細(xì)胞質(zhì)，以淺黃色——棕黃色為陽性反應(yīng)細(xì)胞，在100倍顯微鏡下隨機選擇上皮細(xì)胞分布區(qū)進(jìn)行觀察，在400倍顯微鏡下計數(shù)(選擇5個視野)，計算陽性率，取平均值。以陽性率<5%為陰性，以≥5%定為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行χ2檢驗、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 四組中CD44v6和NF-κB表達(dá)的比較 四組中CD44v6和NF-κB的陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

2.2 觀察組中CD44v6和NF-κB在不同臨床特征中表達(dá)的差別 觀察組中CD44v6和NF-κB的陽性率與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管累犯相關(guān)，NF-κB的陽性率與腫瘤的浸潤深度相關(guān)。二者均與腫瘤的分化程度無相關(guān)性。見表2。

2.3 觀察組中CD44v6和NF-κB表達(dá)的線性相關(guān)性 觀察組中CD44v6和NF-κB無明顯相關(guān)性(P>0.05)。

表1 四組中CD44v6和NF-κB陽性表達(dá)的比較〔n(%)〕

表2 觀察組中CD44v6和NF-κB在不同臨床特征中陽性表達(dá)的差別

3 討 論

胃腺癌的浸潤和轉(zhuǎn)移是影響預(yù)后的重要因素。腫瘤表達(dá)的黏附分子，在腫瘤擴散和轉(zhuǎn)移中起重要的作用。在腫瘤侵襲過程中，細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基質(zhì)之間的特異性黏附起重要的調(diào)節(jié)作用〔5〕。在黏附過程中有兩種相關(guān)的蛋白，一種表達(dá)下調(diào)，如E-cadherin蛋白等〔6〕，此時腫瘤細(xì)胞間的連接程度下降，腫瘤細(xì)胞易于離開原發(fā)灶；另一種黏附分子表達(dá)升高，如CD44v6蛋白和N-cadherin等〔7，8〕，這種蛋白可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞和淋巴細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)成分的黏附，參與免疫調(diào)節(jié)和淋巴細(xì)胞的激活過程，尤其是T淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞的激活等，此外，這種黏附分子對異質(zhì)性黏附起重要作用〔9，10〕。也有研究認(rèn)為CD44v6可以作為淋巴細(xì)胞歸巢的受體，參與淋巴細(xì)胞的再循環(huán)〔11〕。還研究認(rèn)為CD44v6高表達(dá)可以使腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞骨架結(jié)合，參與細(xì)胞偽足的形成〔12〕。在此過程中，腫瘤細(xì)胞的運動功能可以明顯增強，遷移能力增強，腫瘤呈進(jìn)展?fàn)顟B(tài)。CD44v6可能具有多種作用，如參與細(xì)胞內(nèi)外的信號傳導(dǎo)、細(xì)胞增殖等〔13〕。而NF-κB是由復(fù)雜的多肽亞單位組成的，包括5個亞單位：p65(RelA)、Rel(C-Rel)、p50、RelB和p52。NF-κB可通過多種途徑發(fā)揮抗凋亡的功能：NF-κB能夠與抑制凋亡的細(xì)胞因子結(jié)合，上調(diào)編碼抗凋亡因子的基因來抑制凋亡〔14，15〕。NF-κB可以直接與抗凋亡基因有效地結(jié)合，通過增強其作用來發(fā)揮其抑制凋亡的作用及調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)移的作用。近年學(xué)者更關(guān)注NF-κB對腫瘤轉(zhuǎn)移的調(diào)控作用〔16，17〕。

本實驗提示CD44v6和NF-κB兩種蛋白可能在腫瘤形成后的繼發(fā)進(jìn)展中起重要作用。NF-κB在腫瘤形成中可以促進(jìn)細(xì)胞增殖、減少細(xì)胞凋亡，進(jìn)而引起腫瘤細(xì)胞明顯的失控性增生。CD44v6可以和其他蛋白相互作用，進(jìn)而影響微絲骨架的重排，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞侵襲表型的形成，提高腫瘤細(xì)胞的侵襲作用〔18〕。本文提示NF-κB高表達(dá)使腫瘤呈高的侵襲狀態(tài)，此時腫瘤細(xì)胞呈樹根樣或蟹足樣生長，對周圍組織的破壞能力增強〔19〕。本實驗提示二者與腫瘤的內(nèi)在的分化過程無關(guān)，二者不具協(xié)同作用，因此二者可能通過各自的通路發(fā)揮促進(jìn)腫瘤進(jìn)展的作用，其具體機制有待更多實驗研究。

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〔2015-03-19修回〕

(編輯 苑云杰)

遼寧省教育廳科學(xué)技術(shù)項目(No.L2014333)

陸 航(1975-)，男，博士，副主任醫(yī)師，主要從事臨床普外科研究。

劉愛華(1980-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事臨床普外科研究。

R735

A

1005-9202(2016)22-5612-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.053