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        鮭甲病毒的傳入風險評估

        2016-12-16 02:42:23宋傲臣談艷苗馬樹寶北京出入境檢驗檢疫局北京03東北農(nóng)業(yè)大學黑龍江哈爾濱50030
        中國動物檢疫 2016年12期
        關(guān)鍵詞:冰鮮雜魚鮭魚

        任 彤,高 帥,宋傲臣,談艷苗,馬樹寶,蔣 燁,杜 航,劉 敏(. 北京出入境檢驗檢疫局,北京 03;. 東北農(nóng)業(yè)大學,黑龍江哈爾濱 50030)

        鮭甲病毒的傳入風險評估

        任彤1,高帥2,宋傲臣2,談艷苗1,馬樹寶1,蔣燁2,杜航2,劉敏2
        (1. 北京出入境檢驗檢疫局,北京101113;2. 東北農(nóng)業(yè)大學,黑龍江哈爾濱150030)

        目前我國尚未有發(fā)現(xiàn)鮭甲病毒(SAV)感染的相關(guān)報道。如果SAV隨進口貿(mào)易的魚類進入我國,會給我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成很大的損失。為了保障我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展,針對進境水生動物種類開展了SAV跨境傳播的風險評估,并提出了科學的風險管理措施。綜合風險分析認為,我國傳入SAV的主要威脅是來自疫區(qū)的活的大西洋鮭、褐鱒魚和虹鱒,其次是冰凍和冰鮮的大西洋鮭、褐鱒魚和虹鱒。建議對活的、冰凍和冰鮮的易感魚類以及用做鮮活餌料的魚類,禁止從疫區(qū)進口;魚肉、加工后的制品以及其它非易感魚類是低風險的,可以自由貿(mào)易;對運輸活魚的水、包裝等要進行強制常規(guī)消毒,無需檢測。

        鮭甲病毒;易感宿主;風險分析;風險管理

        鮭魚胰臟?。╬ancreas disease,PD)、鮭魚昏睡?。╯leeping disease,SD)都是由鮭魚甲病毒(Salmonid alphavirus,SAV)引起的系統(tǒng)性感染。自從1976年首次在蘇格蘭養(yǎng)殖的大西洋鮭魚中報道發(fā)現(xiàn)PD以來,該病已在北美地區(qū),以及挪威、愛爾蘭、法國和西班牙等歐洲國家被確診。隨著冷水魚類養(yǎng)殖的不斷發(fā)展和國際貿(mào)易的增加,SAV有繼續(xù)擴散的趨勢。2013年世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將鮭魚甲病毒病列入法定通報的水生動物疫病名錄。

        1 風險分析的范圍

        本項目主要分析評估SAV隨水生動物進入我國的可能性及其后果。其宿主在沒有新的資料前僅限定在水生動物,內(nèi)容限定在疾病方面的影響(不考慮進口品種對生態(tài)環(huán)境的影響問題)。

        2 病原及流行病學

        2.1病原因子

        SAV隸屬于披膜病毒科(Togaviridae),甲病毒屬(Alphavirus)。目前,根據(jù)E2和NSP3核苷酸序列的差異,將SAV分為6個基因型。不同基因型的易感宿主和地理分布見表1。

        表1 鮭魚甲病毒基因型組和地理分布

        2.2病原的穩(wěn)定性(在宿主體外的存活能力及滅活條件)

        實驗室試驗表明,SAV可以在水環(huán)境中長時間生存,并且病毒的存活率與溫度呈負相關(guān)。在有機物的存在下,SAV在海水中比在淡水中存活的時間長。SAV可以在死魚泄露的脂肪中檢測到,表明這可能是傳輸線路。脂肪滴可以在海水表面積累,導致長距離傳播。

        研究表明,SAV在血清中的半衰期與溫度呈負相關(guān),需要實驗室分離病毒的樣品應(yīng)在4 ℃保存。長期保存,建議在-80 ℃。SAV對氯仿敏感,在60 ℃ pH7.2或4 ℃ pH4.0/pH12條件下滅活。這表明堆肥、青貯和堿性水解都是滅活魚類廢物中SAV的有效方法。

        2.3易感宿主

        疾病暴發(fā)和感染實驗表明,大西洋鮭(Salmo salar)、褐鱒魚(S. trutta)和虹鱒(Oncorhynchus mykiss)是易感動物。易感魚類在各個生長階段對該病毒均易感。通過注射感染實驗表明,大西洋鮭魚幼魚在淡水中易感。

        2.4靶器官與感染組織

        SAV感染早期的病毒血癥階段是全身性疾病。感染后,SAV可在所有的器官中檢測到,包括腦、鰓、假鰓、心臟、胰腺、腎臟和骨骼肌,以及粘液和糞便,可能的感染途徑是通過鰓或腸,但對病毒的靶細胞尚未確定。

        2.5環(huán)境因素

        臨床暴發(fā)和死亡率受水溫和季節(jié)的影響,水溫在8~15 ℃ 時,SAV感染力較強。

        2.6傳播媒介

        SAV主要通過水平傳播,尤其是養(yǎng)殖場之間的傳播,也可以通過海水傳播。也有研究者懷疑SAV可以垂直傳播,但目前還沒有令人信服的證據(jù)。挪威食品安全科學委員會最近進行了親魚的監(jiān)測及垂直傳播的風險評估,認為SAV垂直傳播的風險是可以忽略的。SAV已經(jīng)在急性疾病暴發(fā)時的大西洋鮭魚身上收集到的鮭魚虱(Lepeophtheirus salmonis)中檢測到,但是否能夠傳染給易感的魚類還沒有研究。SAV的傳播不需要媒介。在野生海洋魚類調(diào)查中,在比目魚歐洲黃蓋鰈(Limanda limanda),大比目魚(Hippoglossoides platessoides)、鰈魚(Pleuronectes platessa)中檢測到了SAV的RNA。因此,作為病毒載體的野生海洋或淡水物種的重要性需要加以明確。

        2.7疾病的地理分布

        SAV感染主要發(fā)生在克羅地亞、法國、德國、愛爾蘭、意大利、挪威、波蘭、西班牙、瑞士和英國(英格蘭、蘇格蘭和北愛爾蘭)人工養(yǎng)殖的鮭魚中。

        2.8診斷

        采樣的最佳器官或組織為心臟、腎臟。取樣時,選取垂死的或者瘦弱的魚檢測。這類魚有更高的陽性檢出率。

        標準的SAV檢測方法是直接檢測,例如用細胞培養(yǎng)分離病毒,再通過基于抗體的(IFAT或ELISA)或基于核酸的方法(RT-PCR)來鑒定。

        國際標準見《OIE水生動物疾病診斷手冊》2.3.6章。暫無國內(nèi)標準。

        3 危害因素的確定——風險識別

        根據(jù)對病原和流行病學的分析,可能導致SAV進入我國的可能因素有:易感動物包括活的(親魚、魚苗、食用魚、魚卵)、冰鮮的、冷凍的,以及其半熟制品、已加工制品;非易感動物也包括活的(親魚、魚苗、食用魚、魚卵)、冰鮮的、冷凍的,以及其半熟制品、已加工制品,水、包裝物、運載工具、操作工具和人員等。因此,根據(jù)可能產(chǎn)生的不同程度的風險,從以下幾個方面逐個評估:活的易感魚類(親魚、魚苗、魚卵);冰凍和冰鮮的易感魚類;用做鮮活餌料的魚類(野雜魚);易感魚類的魚肉;加工后的魚產(chǎn)品;其它活的非易感魚類;運輸活魚的水、包裝、運輸工具和用具等。

        4 我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)情況和有關(guān)動物檢疫政策

        4.1我國現(xiàn)行的法律法規(guī)概述

        我國現(xiàn)有的法律法規(guī)無論是在進出口檢疫還是在國內(nèi)水生動物防疫工作上,均沒有把該病列為監(jiān)測和檢疫對象。由此可以看出我國目前對該病的控制力度較輕,管理不夠嚴格。

        4.2我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖情況

        我國現(xiàn)有的鮭鱒魚大小養(yǎng)殖場超過千家,主要分布在東北、西北、華北和西南等冷水資源豐富的山區(qū)。近年來,許多地方政府,如北京懷柔等,都將鮭魚養(yǎng)殖作為特色產(chǎn)業(yè)和重要漁業(yè)經(jīng)濟來支持其發(fā)展。目前在我國尚未發(fā)現(xiàn)SAV感染的相關(guān)報道,但隨著我國養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展,進境水生動物種苗的數(shù)量也在迅速增加,SAV一旦進入我國引起暴發(fā)流行,將造成不可估量的后果,會使養(yǎng)殖業(yè)遭受經(jīng)濟重創(chuàng)。因此,在國家層面上,加強檢疫,避免SAV進入我國是目前比較有效的預(yù)防措施。

        5 病原傳入、定殖、傳播和危害的可能性評估

        5.1易感動物(親魚、魚苗、食用魚、魚卵)

        5.1.1傳入評估。易感動物如大西洋鮭、褐鱒、虹鱒等攜帶的病毒,在低溫情況下更容易存活。研究表明SAV可以存活于海水中,而且比在淡水中存活的時間更長。因此進境魚卵、魚精液、魚苗、成魚、攜帶水體、載體容器具有極大傳入病毒的可能。SAV的傳播不需要媒介,一旦傳入,對我國鮭鱒魚養(yǎng)殖業(yè)將會造成很大經(jīng)濟損失。

        5.1.2發(fā)生評估。這里活的鮭鱒魚是指可被養(yǎng)殖的,包括暫養(yǎng)的。如果魚帶有SAV,可以通過水傳播,造成疾病暴發(fā),因此存在很高的發(fā)生疾病風險。我國地域遼闊,氣溫和水溫相差很大,大多數(shù)地區(qū)都有水溫在8~15 ℃的最適發(fā)病季節(jié),一旦傳入病毒,很容易導致流行。

        5.1.3后果評估。SAV傳染性很強。雖然我國目前沒有SAV的報道,但一旦某個地區(qū)被劃為SAV疫區(qū),不僅會嚴重影響當?shù)厮a(chǎn)養(yǎng)殖業(yè),水產(chǎn)品出口也會受到限制,無論在經(jīng)濟上,還是在生產(chǎn)上都會造成很大的損失。

        5.1.4風險預(yù)測。綜上所述,SAV隨大西洋鮭、虹鱒等易感動物進入我國的風險很大,并且一旦進入會迅速擴散,在廣大地區(qū)造成疾病流行。由于該病毒可存在于海水中,對鮭鱒養(yǎng)殖業(yè)會造成毀滅性的打擊,危害水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè),而且會對出口帶來不利的影響,因此綜合評估屬于高風險因素,必須加以嚴格控制。

        5.2冰凍和冰鮮的易感魚類

        5.2.1傳入評估。由于冰凍和冰鮮魚在死亡之前的狀況未知,因此這部分魚攜帶SAV的風險比活魚更大。特別是水產(chǎn)品的來源很難追溯,因此有很高的傳入風險。

        5.2.2發(fā)生評估。由于冰凍和冰鮮魚一般都用于食用或加工,和養(yǎng)殖水域接觸機會相對較少。對于僅僅用于人類食用的易感魚類,發(fā)生的風險相對較低。對于用來加工成產(chǎn)品的易感魚類,其風險主要來自加工后的廢水和廢棄物。如果廢棄物流入養(yǎng)殖水域,同樣會有傳播疫病的風險,需要對其進行管理。風險程度為中等。

        5.2.3后果評估。相對活的易感魚類而言,冰凍和冰鮮的易感魚造成養(yǎng)殖鮭鱒等易感魚類損失的機會相對要少,屬于中等風險。

        5.2.4風險預(yù)測。由于冰凍和冰鮮的易感魚接觸水域機會少,接觸到易感的養(yǎng)殖魚可能性更少,因此通常造成重大損失的可能性不是很大,屬于中等風險,需要適當進行管理。

        5.3用做鮮活餌料的魚類(野雜魚)

        5.3.1傳入評估。用做鮮活餌料的野雜魚,通常種類很復雜,幾乎難以保證沒有對SAV易感的魚種。如果來自疫區(qū),則存在帶入病原的很大風險,如果來自非疫區(qū),則風險較低,因此存在中等程度的傳入風險。

        5.3.2發(fā)生評估。如果這些野雜魚來自疫區(qū),在喂魚的過程中就會將病毒傳到魚而導致發(fā)生疾病。但在用野雜魚喂食的養(yǎng)殖魚中,對SAV易感的種類不是很多,因此有中度發(fā)生疫病的風險。

        5.3.3后果評估。同發(fā)生評估。由于用野雜魚喂食的養(yǎng)殖魚種大多數(shù)都對SAV不易感,主要后果是將SAV帶入該水域,有可能擴散到養(yǎng)殖鮭鱒的漁場,造成疾病流行。因此后果不會很嚴重,屬于中等。

        5.3.4風險預(yù)測。綜上所述,當魚被直接用來作為養(yǎng)殖魚的鮮活餌料時,由于其中的易感魚有可能攜帶病毒,如果沒有經(jīng)過殺滅病毒處理就直接喂魚,會導致病毒擴散,存在傳播病原的較大風險。但由于喂野雜魚的養(yǎng)殖魚類中對SAV易感的魚種不多,所以其風險不是很高,屬于中等程度風險,也需要一定的管理。

        5.4易感魚加工后的產(chǎn)品

        此類產(chǎn)品包括:121 ℃熱消毒并密封的魚產(chǎn)品(即熱處理至少3.6分鐘或任何等效時間/溫度);巴氏殺菌的魚產(chǎn)品,90 ℃熱處理至少10分鐘(或任何等效時間/溫度);機械烘干去內(nèi)臟的魚(即在100 ℃熱處理30分鐘或任何等效時間/溫度);魚油;大腸魚粉;魚皮皮革。由于這類產(chǎn)品都經(jīng)過一定條件的處理,其環(huán)境條件(主要是溫度)已經(jīng)達到了能滅活SAV的條件,即便在加工前可能帶有病毒,在加工后也不存在攜帶活SAV的任何可能性。因此無論是傳入病原,還是發(fā)生疾病和發(fā)生后果方面都屬于低風險,沒有發(fā)生疾病的可能性,完全在可以接受的水平。

        5.5其它非易感魚類(包括活的和其它形式的產(chǎn)品)

        5.5.1傳入風險。非易感魚類體內(nèi)不會帶有SAV,其傳播主要以機械形式進行。如果來自非疫區(qū),不可能帶有病原。如果來自疫區(qū),需要對隨魚運輸?shù)乃汪~體表進行消毒,這樣就可以把攜帶病原的風險降低到可以接受的水平。而冰凍、冰鮮魚攜帶病毒的可能性本來就很少,而且是用來食用,和養(yǎng)殖水域接觸的可能性很少,傳入風險很低。因此,非易感魚類的魚肉和加工后的產(chǎn)品同樣屬于低風險。

        5.5.2發(fā)生評估。屬于低風險。

        5.5.3后果評估。屬于低風險。

        5.5.4風險預(yù)測。除了從疫區(qū)來的水和魚有較低的風險外,其它如冰凍,冰鮮,魚肉和加工后的產(chǎn)品都是極低風險的,達到了可接受的水平。

        5.6運輸活魚的水、包裝、運輸工具和用具等

        5.6.1傳入評估。來自疫區(qū)的活魚,特別是易感魚,其隨魚運輸?shù)乃?、包裝、運輸工具和用具是可能攜帶病毒的,而且SAV對環(huán)境的耐受力較強,能存活很長時間,所以有可能作為傳染源進入我國。但來自非疫區(qū)的則風險較小,所以其傳入風險不確定。

        5.6.2發(fā)生評估。同上所述,來自疫區(qū)的有可能會引起進口魚所在水域的易感魚發(fā)病。

        5.6.3后果評估??偟恼f屬于較低風險。

        5.6.4風險預(yù)測。由于總的風險不是很高,只要對水和包裝等進行消毒,即可把風險降低到可以接受的水平。

        5.7風險評估小結(jié)

        通過對上述這幾種不同情況分別進行風險評估后發(fā)現(xiàn),活的虹鱒、冰凍和冰鮮的易感魚類和用做鮮活餌料的魚類具有較高的傳入和發(fā)生風險(表2)。

        表2 不同種類產(chǎn)品的風險評估結(jié)果

        6 風險管理方案

        6.1易感活動物(包括親魚、魚卵和魚苗)

        建議不要從疫區(qū)進口。在流行季節(jié)對出口鮭鱒的養(yǎng)殖場進行不短于2年的連續(xù)監(jiān)測,特別是要求出口國重點檢測自然死亡和瀕死的魚。即在實踐中,需要每天收集常規(guī)死亡的樣品。20個病樣為1組置于封口袋中,于-20 ℃凍存,直到收集到250個樣本,然后進行檢測。對出口國要求進行流行病學監(jiān)測,并在進口后對其進行嚴格檢疫。建議不要在流行季節(jié)進口,并且盡量進口魚卵,并對魚卵進行消毒處理,不要進口魚。

        6.2冰凍和冰鮮的易感魚類

        對進口的冰鮮和冰凍易感魚類,需要有和活魚相似的檢疫措施。建議不要從疫區(qū)進口,并在進口后取樣進行常規(guī)檢疫。

        6.3用做鮮活餌料的魚類(野雜魚)

        建議用經(jīng)過處理后的野雜魚做餌料,或者禁止用疫區(qū)的野雜魚做鮮活餌料。

        6.4易感魚加工后的產(chǎn)品

        低風險,可以自由貿(mào)易。

        6.5其它非易感魚類(活的和其它形式產(chǎn)品)

        對SAV不易感的魚,只有機械傳播病毒的可能性,所以需要了解出口漁場的位置。如果是從疫區(qū)來的活魚,則需要對魚帶水進行常規(guī)消毒處理,同時對水和包裝物等進行適當處理。即使冰凍、冰鮮或者加工后的產(chǎn)品來自疫區(qū),但由于都是低風險的,所以可以自由貿(mào)易。

        6.6運輸活魚的水、包裝、運輸工具和用具等

        由于水、包裝等是否帶有病毒和魚的來源(是否來自疫區(qū))、魚的種類(是否易感)有關(guān),有一定的不確定性,而且?guī)Р《緮?shù)量通常很少,難以檢測。因此不建議采用檢測是否帶毒再采取相應(yīng)措施的方法,而是對運輸用水和包裝等采用常規(guī)消毒的強制措施,這樣就可將輸入SAV的可能性降低到可以接受的水平。

        7 結(jié)論

        風險評估結(jié)果表明, SAV感染是一種對我國養(yǎng)殖虹鱒和大西洋鮭會帶來嚴重危害的一種病毒病,必須盡一切努力阻止該病傳入我國。

        綜合風險分析認為,傳入SAV的主要威脅是來自疫區(qū)的活的大西洋鮭、褐鱒魚和虹鱒,其次是冰凍和冰鮮的大西洋鮭、褐鱒魚和虹鱒。只有根據(jù)感染的特點采取不同的檢疫措施,才能有效控制攜帶有病毒的魚進入我國。對進口活的大西洋鮭、褐鱒魚和虹鱒,必須要求出口漁場進行2年以上的監(jiān)測,并實行對自然死亡的魚收集250尾以上進行檢查。只有這樣,才能得到可信的結(jié)論。對于其它易感魚類(活的和冰凍、冰鮮的)的進口,由于仍存在一定程度的風險,建議在不從疫區(qū)進口的前提下,需要在進口后抽樣檢疫。而魚肉、魚加工后的制品,以及其它非易感魚類是低風險的,可以自由貿(mào)易。對運輸活魚的水、包裝等需要進行強制常規(guī)消毒,而不是檢測??偟脑u估結(jié)果和管理措施見表3。

        表3 不同種類產(chǎn)品的風險評估結(jié)果和管理措施

        [1]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局. 進境動物和動物產(chǎn)品風險分析管理規(guī)定:2002年第40號令[A]. 北京:國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局,2002.

        [2]于力,史秀杰,鄭曉聰,等. 鮭魚甲病毒病研究進展[J].水產(chǎn)科學,2014,33(10):662-666.

        [3]Andersen L,Hodneland H,Nylund A. No influence of oxygen levels on pathogenesis and virus shedding in Salmonid alphavirus(SAV)-challenged Atlantic salmon(Salmon salar L)[J]. Virol. J,2010(7):198.

        [4]Bang J B,Kristoffersen A B,Myr C. Cohort study of effect of vaccination on pancreas disease in Norwegian salmon aquaculture[J]. Dis. Aquat. Org,2012,102:23-31.

        [5]Graham D A,Brown A,Savage P,et al. Detection of salmon pancreas disease in the faeces and mucus of Atlantic salmon Salmon salar by real-time RT-PCR and cell culture following experimental challenge[J]. J.Fish Dis,2012,35:949-951.

        [6]Graham D A,F(xiàn)rost P,Mclaughlin K,et al. A comparative study of marine salmonid alphavirus subtypes 1–6 using an experimental cohabitation challenge model[J]. J. Fish Dis,2011,34:273-286.

        [7]Graham D A,F(xiàn)ringuelli E,Wilson C,et al. Prospective longitudinal studies of salmonid alphavirus infections on two Atlantic salmon farms in Ireland; evidence for virual persistence[J]. J. Fish Dis,2010,33:123-135.

        [8]Jansen M D,Taksdal T,Wasnyth M A,et al. Salmonid alphavirus(SAV)and pancreas disease(PD) in Atlantic salmon(Salmo salar L.) in freshwater andseawater sites in Norway from 2006 to 2008[J]. J. Fish Dis,2010,33:391-402.

        [9]Kongtorp R T,Stene A,Andreassen P A,et al. Lack of evidence for vertical transmission of SAV 3 using gametes of Atlantic salmon,salmo salar L,exposed by natural and experimental routes[J]. J. Fish Dis,2010,33:879-888.

        [10]Petterson E,Stormoen M,Evensen O,et al. Natural infection of Atlantic salmon(Salmon salar)with salmonid alphavirus 3 generates numerous viral deletion mutants[J]. J. Gen. Virol,2013,94:1945-1954.

        [11]Snow M,Black I,Mcintosh R,et al. Detection of salmonid alphavirus RNA in wild marine fish:implications for the origin of salmon pancreas disease in aquaculture[J]. Dis. Aquat. Org,2010,91: 177-188.

        [12]Stormoen M,Kristoffersen A B,Jansen P A. Mortality related to pancreas disease in Norwegian farmed salmonid fish,Salmo salar L and Oncorhynchus mykiss(Walbaum)[J]. J. Fish Dis,2013,36:639-645.

        (責任編輯:朱迪國)

        Risk Assessment on Introduction of Salmonid Alphavirus

        Ren Tong1,Gao Shuai2,Song Aochen2,Tan Yanmiao1,Ma Shubao1,Jiang Ye2,Du Hang2,Liu Min2
        (1. Beijing Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau,Beijing101113;2. Northeast Agricultural University,Harbin,Heilongjiang150030)

        At present,Salmonid alphavus(SAV)has not yet entered to China. If it released into China from fish trade,the great losses would be caused to aquaculture. In order to guarantee the healthy development of aquaculture in China,the risk assessment of virus cross-border spread for the related kinds of aquaculture was made,scientific risk management measures were put forward in this paper. The assessment results showed that the main threat factors of SAV introduction were live Atlantic salmon(Salmo salar),brown trout (S. trutta)and rainbow trout(Oncorhynchus mykiss),the followed were frozen and iced fishes. Some related suggestions were put forward,including the import prohibition of the live,frozen and iced susceptible fish,as well as the fishes used in fresh bait production form epidemic areas. The risk of fish meat,processed fish products and other non-susceptible fishes was low,these kinds of products could be free traded. The water and packages used for live fish transport should be enforced to conduct routine disinfection,and the disinfection of SAV should not be needed.

        Salmonid alphavirus;susceptible host;risk analysis;risk management

        S852.65

        B

        1005-944X(2016)12-0012-05

        10.3969/j.issn.1005-944X.2016.12.004

        國家“十二五”科技支撐計劃(2013BAD12B02);國家質(zhì)檢總局科技計劃項目(2015IK005)

        劉 敏

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