于丹軍，樊 靜，胡 月，姜 麗，曹麗艷，門 帥

(1.河北省秦皇島市第一醫(yī)院檢驗科，河北 秦皇島 066000； 2.河北省秦皇島市第四醫(yī)院檢驗科，河北 秦皇島 066000)

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·論 著·

婦科腫瘤患者外周血中調(diào)節(jié)性T細胞和血清中TGF-β、IL-10的變化及相關性研究

于丹軍1，樊 靜2，胡 月1，姜 麗1，曹麗艷1，門 帥1

(1.河北省秦皇島市第一醫(yī)院檢驗科，河北 秦皇島 066000； 2.河北省秦皇島市第四醫(yī)院檢驗科，河北 秦皇島 066000)

目的探討婦科腫瘤患者外周血調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory T cells, Treg)、T細胞亞群表達和血清中轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、白細胞介素10(interleukin-10, IL-10)細胞因子的變化及相關性。方法選取97例婦科腫瘤患者(宮頸癌患者32例、子宮內(nèi)膜癌患者35例、卵巢癌患者30例)和健康體檢者30例為研究對象，應用流式細胞術檢測所有研究對象外周血中CD4+CD25+Foxp3+、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞的比率及T細胞亞群分布；應用ELISA方法檢測血清中細胞因子TGF-β1、TGF-β2、IL-10的含量。結果婦科腫瘤組外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞的比率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；T細胞亞群分布與對照組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；血清中TGF-β1、IL-10含量明顯高于對照組，TGF-β2含量低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。婦科腫瘤組手術1個月后、化療4個周期后外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴細胞的比率，CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞的比率，血清中TGF-β1、TGF-β2、IL-10含量及手術1個月后CD4+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞、CD4+/CD8+，化療4個周期后CD4+、CD19+T細胞明顯低于手術前，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴細胞的比率與血清TGF-β1含量之間存在正相關(rs=0.220，P=0.034)；CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞的比率與血清中TGF-β1、TGF-β2、 IL-10含量之間均存在正相關(rs=0.284、0.385、0.336,P<0.01)。結論婦科腫瘤患者其免疫耐受機制可能與CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞的比率及細胞因子TGF-β1、TGF-β2、IL-10含量相關。

生殖器腫瘤,女(雌)性；T淋巴細胞,調(diào)節(jié)性；流式細胞術

調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory T cell，Treg)是特殊的具有負調(diào)控作用的T淋巴細胞亞群，它能維持自身免疫穩(wěn)定狀態(tài)，預防自身免疫性疾病[1]。研究表明，Treg細胞可以通過抑制免疫系統(tǒng)對腫瘤抗原的識別和應答造成腫瘤細胞的逃逸，Treg對腫瘤的發(fā)生和發(fā)展可能起到重要作用[2]。它們在體外可以細胞-細胞接觸的形式抑制CD4+和CD8+T細胞功能[3]。婦科惡性腫瘤是嚴重威脅女性生命和健康的疾病，如何提高患者生存質(zhì)量，延長生存時間是目前對婦科腫瘤的研究熱點。本研究應用流式細胞儀法和ELISA法檢測卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌患者及健康對照組外周血中Treg、T淋巴細胞亞群表達以及血清中轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、TGF-β2、白細胞介素10(interleukin-10,IL-10)的變化和相關性，探討其在婦科腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用，并進一步了解其在臨床方面的價值，旨在為婦科腫瘤的早期診斷和免疫治療提供理論基礎?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年11月—2015年11月于河北省秦皇島市第一醫(yī)院病理活組織檢查確診的婦科腫瘤患者(婦科腫瘤組)97例(宮頸癌患者32例、子宮內(nèi)膜癌患者35例、卵巢癌患者30例)，年齡28～65歲，平均(49.2±9.8)歲。且近3個月內(nèi)未使用任何抗腫瘤治療和免疫治療，排除自身免疫性疾病、嚴重系統(tǒng)性疾病、感染性疾病和妊娠。另選取同一時期進行體檢的健康女性(對照組)30例，年齡29～62歲，平均(49.5±8.5)歲。2組年齡差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

本研究獲醫(yī)院倫理委員會批準，所有被檢者均簽署知情同意書。

1.2 試劑與儀器 流式細胞儀(Beckman Coulter EP-ICS XL)購自美國貝克曼公司。鼠抗人FITC-CD4、PE-CD8、PC5-CD3、FITC-CD3、PE-CD(16+56)、PC5-CD19、FITC-CD4、PE-CD25、PC5-CD127、同型對照鼠抗人IgG均購自美國貝克曼公司。Foxp3試劑盒購自美國Ebioscience公司。IL-10、TGF-β1、TGF-β2試劑盒均購自Rapibio公司。

1.3 標本采集 婦科腫瘤組患者的診斷均經(jīng)病理學診斷證實，于手術前1 d、術后1個月、化療4個周期后采集靜脈血；對照組于體檢時采靜脈血。

1.4 方法

1.4.1 外周血T細胞亞群檢測 婦科腫瘤組及對照組采靜脈血2 mL，EDTA抗凝。分別依次加入鼠抗人FITC-CD4、PE-CD8、PC5-CD3、FITC-CD3、PE-CD(16+56)、PC5-CD19抗體和同型對照避光孵育15 min，加入溶血素后避光孵育10 min，離心棄上清加入PBS上機檢測。

1.4.2 外周血 CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴細胞比率的檢測 婦科腫瘤組及對照組采靜脈血2mL，EDTA抗凝。分別依次加入FITC-CD4、PE-CD25 、PC5-Foxp3抗體和同型對照避光孵育20 min進行表面染色，固定破膜后加入Foxp3 熒光抗體，避光孵育40min。沖洗后上機檢測。

1.4.3 外周血CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞比率的檢測 婦科腫瘤組及對照組采靜脈血2 mL，EDTA抗凝。分別依次加入鼠抗人FITC-CD4、PE-CD25、PC5-127抗體和同型對照避光孵育15 min，加入溶血素后避光孵育10 min，離心棄上清后加入PBS上機檢測。

1.4.4 血清中TGF-β1、TGF-β2、IL-10的檢測 采用ELISA方法進行血清中TGF-β1、TGF-β2、IL-10定量檢測，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書操作。

2 結 果

2.1 2組外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞比率及T淋巴細胞亞群分布比較 婦科腫瘤組外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞比率均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；婦科腫瘤組外周血T淋巴細胞亞群與對照組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞比率及T淋巴細胞亞群比較

組別 例數(shù)CD4+CD25+Foxp3+TregCD4+CD25+CD127lowTregCD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+NKCD19+婦科腫瘤組972.23±0.751.71±0.5965.07±6.5337.79±6.7524.25±4.041.62±0.4716.85±7.8113.15±4.52對照組 300.74±0.140.78±0.1266.08±7.2638.73±6.5425.40±6.331.63±0.5313.95±6.2611.74±3.79t 10.7608.4570.4080.3030.6000.0981.1440.944P 0.0000.0000.6860.6970.5530.9230.2620.353

2.2 婦科腫瘤組手術前后、化療后外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞比率及T淋巴細胞亞群比較 婦科腫瘤組手術1個月后、化療4個周期后CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴細胞比率、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+淋巴細胞比率明顯低于手術前，化療4個周期后低于手術1個月后，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；婦科腫瘤組手術1個月后CD4+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞、CD4+/CD8+明顯低于手術前，化療4個周期后CD4+、CD19+T淋巴細胞低于手術前，化療4個周期后CD8+、CD19+T淋巴細胞低于手術1個月后，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 婦科腫瘤組手術前后、化療后外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞比率及T淋巴細胞亞群比較

檢測時間 CD4+CD25+Foxp3+TregCD4+CD25+CD127lowTregCD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+NKCD19+手術前2.23±0.751.71±0.5965.07±6.5337.79±6.7524.25±4.041.62±0.4716.85±7.8113.15±4.52手術后1個月1.54±0.50*1.22±0.26*64.64±7.7035.06±5.75*28.98±10.21*1.31±0.53*12.53±4.1914.22±4.53化療4個周期后0.99±0.41*#1.02±0.22*#66.87±7.9234.69±6.94*26.61±8.04*#1.52±0.74#16.80±6.10#11.29±5.85*# F114.55879.0252.4746.5798.7886.94215.4598.509 P0.0000.0000.0860.0020.0000.0010.0000.000

*P<0.05與手術前比較 #P<0.05與手術后1個月比較(q檢驗)

2.3 2組血清中TGF-β1、TGF-β2、 IL-10含量比較 婦科腫瘤組外周血血清TGF-β1、IL-10含量明顯高于對照組，TGF-β2含量明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 血清TGF-β1、TGF-β2、 IL-10含量比較

2.4 婦科腫瘤組手術前后、化療后血清TGF-β1、TGF-β2、 IL-10含量的比較 婦科腫瘤組手術1個月后、化療4個周期后血清TGF-β1、TGF-β2、 IL-10含量明顯低于手術前，化療4個周期后低于手術1個月后，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表4。

表4 婦科腫瘤組手術前后、化療后血清TGF-β1、TGF-β2、IL-10含量比較

*P<0.05與手術前比較 #P<0.05與手術后1個月比較(秩和檢驗)

2.5 婦科腫瘤組CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞比率與血清TGF-β1、TGF-β2 、IL-10含量相關性分析 婦科腫瘤組CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴細胞比率與TGF-β1含量之間存在正相關(rs=0.220,P=0.034)，與血清TGF-β2、IL-10之間無相關性(rs=0.001,P=0.990;rs=0.158,P=0.122)；CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞比率與血清TGF-β1、TGF-β2 、IL-10含量之間均存在正相關(rs=0.284、0.385、0.336,P<0.01)。見圖1。

圖1 婦科腫瘤組CD4+CD25+Foxp3+Treg、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞比率與血清TGF-β1、TGF-β2、IL-10含量相關性

Figure 1 The correlation between CD4+CD25+Foxp3+，CD4+CD25+CD127lowregulatory T cells accounted to the proportion of CD4+T cells and the content of TGF-β1，TGF-β2 and IL-10 in serum with gynecology cancer group

3 討 論

Treg細胞群包括CD4+Treg、CD8+Treg、自然殺傷 T 細胞( natural killer T cell， NKT)和雙陰性Treg(double negative Treg，DN Treg)細胞等4大類。Treg在防止自身免疫的過程中起著至關重要的作用，其異常表達可導致腫瘤產(chǎn)生免疫耐受和免疫逃逸[4]。CD4+CD25+Treg是目前研究的熱點，它是一類具有獨特免疫調(diào)節(jié)功能的T淋巴細胞亞群，持續(xù)高表達于人類胸腺、淋巴組織及外周血，其分子標志主要包括：CD3、CD4、CD25、CD127、Foxp3、GITR(glucocorticoid-induced TNF receptor)、CTLA-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4)[5]等，其中CD127、Foxp3是特異性最高的2個分子標志[6-8],叉頭狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子-3(Forkhead /winged-helix transcription factorboxP3)(Foxp3)是forkhead/winged-helix家族中的一員，是在Treg細胞上特異表達的轉(zhuǎn)錄因子，F(xiàn)oxp3直接通過與核轉(zhuǎn)錄因子的交互作用激活T細胞，這種交互作用需要與體內(nèi)IL-2因子結合，來調(diào)控T細胞相關的標記并抑制細胞因子的產(chǎn)生[9]；CD127是IL-7 受體α鏈，在 T 細胞前體、B 細胞前體、成熟T細胞、成熟單核細胞、其他一些淋系和髓系細胞上表達[10]。有研究發(fā)現(xiàn)，在CD4+CD25+Treg純化的細胞中Foxp3的表達與CD127低表達相關，通過CD4+CD127low純化出CD4+CD25+T細胞與Foxp3純化的CD4+CD25+T細胞數(shù)量相似，故本研究采用了這2種分子標志對Treg進行篩選。

周利敏等[11]的研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者外周血及腫瘤組織中CD4+CD25+CD127lowTreg陽性表達數(shù)量按照對照組、CIN分組、宮頸癌組順序遞增，且隨著病變加重，表達率明顯增加。提示CD4+CD25+CD127lowTreg細胞阻止了機體對自身同源性腫瘤的細胞免疫，為宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展提供了逃避免疫監(jiān)視的優(yōu)勢環(huán)境。有研究結果顯示，卵巢癌患者CD4+CD25+CD127lowT細胞/CD4+T細胞比例明顯高于正常對照組，這表明在卵巢癌進展過程中，CD4+CD25+T細胞可能起著重要作用。姜艷麗等[12]研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤患者轉(zhuǎn)錄因子Foxp3表達與正常組相比均顯著增高，可以作為一種良好的標記物輔助評估 CD4+CD25+Treg的比例和腫瘤的免疫功能。在乳腺癌、卵巢癌、肺癌等實體腫瘤和血液惡性腫瘤患者外周血、腫瘤局部微環(huán)境中，Treg比例增高，且數(shù)量與腫瘤進展程度和預后呈負相關，而去除Treg或封閉其抑制功能可使腫瘤免疫恢復[13]。本研究結果顯示，婦科腫瘤組與對照組相比，T淋巴細胞亞群比例差異無統(tǒng)計學意義，與侯友翔等[14]研究結果相似；婦科腫瘤外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T細胞的比率、CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T細胞的比率明顯增高于對照組，且手術1個月后、化療4個周期后比值明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義，與上述研究結果相符。

Treg細胞通過多種不同的方式發(fā)揮免疫抑制功能，維持機體免疫耐受：①釋放GF-β、IL-10和IL-35等免疫抑制性細胞因子；②通過穿孔素途徑及顆粒酶來殺傷其他細胞；③通過細胞毒 T 淋巴細胞相關抗原4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4，CTLA-4) 間接影響樹突狀細胞的功能，從而影響其他T細胞的激活。大量研究數(shù)據(jù)表明，腫瘤微環(huán)境中，TGF-β、IL-6、IL-10、血管生成素、前列腺素E2均是其免疫抑制因子中的重要因子，其中TGF-β可由各種不同的腫瘤細胞產(chǎn)生，IL-10被認為是主要的免疫抑制因素，是抑制TH1免疫反應和T細胞細胞毒性反應的關鍵[15]。本研究結果顯示，婦科腫瘤組血清中TGF-β1、IL-10的含量明顯高于對照組， TGF-β2含量顯示低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義。TGF-β2含量降低可能受宮頸癌患者感染人類乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)影響。據(jù)文獻報道，HPV感染時可產(chǎn)生E6、E7 2種蛋白質(zhì)[16]，其可抑制TGF-β2的產(chǎn)生，而卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌與TGF-β2的關系尚有待進一步研究。TGF-β可以使活化的CD4+CD25+T細胞轉(zhuǎn)化為表達Foxp3的Treg，IL-2、IL-10、TGF-β、血管內(nèi)皮生長因子和環(huán)氧合酶2可直接或間接參與Treg的誘導與轉(zhuǎn)化，使腫瘤微環(huán)境中Treg數(shù)量增多[17]。本研究結果顯示，手術后、化療后Treg與TGF-β、IL-10含量均下降，可能由于手術及化療導致腫瘤及其微環(huán)境被破壞，進而抑制Treg與TGF-β、IL-10的產(chǎn)生。本研究中，婦科腫瘤組CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T淋巴細胞比率與TGF-β1含量之間存在正相關；CD4+CD25+CD127lowTreg占CD4+T淋巴細胞比率與血清TGF-β1、TGF-β2、IL-10含量之間均存在正相關。與張麗平等[18]研究結果相一致。表明Treg可能通過引起TGF-β、IL-10上調(diào)而發(fā)揮免疫抑制的作用。

總之，Treg對婦科腫瘤的進展有著十分重要的作用，其通過引起TGF-β、IL-10等因子的變化來進行免疫調(diào)控，導致婦科腫瘤產(chǎn)生免疫耐受，手術及化療可降低其含量[19-24]。這一研究結論對婦科腫瘤的治療具有重要的臨床應用價值。

[1] Feng Y,van der Veeken J,Shugay M,et al. A mechanism for expansion of regulatory T-cell repertoire and its role in self-tolerance[J]. Nature,2015,528(7580):132-136.

[2] Joshi NS,Akama-Garren EH,Lu Y,et al. Regulatory T Cells in Tumor-Associated Tertiary Lymphoid Structures Suppress Anti-tumor T Cell Responses[J]. Immunity,2015,43(3):579-590.

[3] 解皓，李海濤，趙彩彥.CD4+CD25+FOXp3+調(diào)節(jié)性T細胞參與腫瘤免疫逃逸的研究進展[J].臨床薈萃，2009，24(24):2177-2180.

[4] Hossain DM,Panda AK,Chakrabarty S,et al. MEK inhibition prevents tumour-shed transforming growth factor-β-induced T-regulatory cell augmentation in tumour milieu[J]. Immunology,2015,144(4):561-573.

[5] 谷偉偉，葉韻斌.調(diào)節(jié)性T細胞與腫瘤相互作用機制的研究進展[J].醫(yī)學綜述，2012，18(5):680-684.

[6] Oleinika K,Nibbs RJ,Graham GJ,et al. Suppression,subversion and escape:the role of regulatory T cells in cancer progression[J]. Clin Exp Immunol,2013,171(1):36-45.

[7] 吳德南，莊建良，許榮譽，等.腫瘤免疫中Treg細胞與趨化因子及受體的研究進展[J]. 中國腫瘤外科雜志，2014，6(2):112-115.

[8] 唐曉磊，章曉聯(lián).Treg細胞與臨床疾病相關性研究進展[J].醫(yī)學新知雜志，2012，22(6):441-447.

[9] Whiteside TL. Induced regulatory T cells in inhibitory microenvironments created by cancer[J]. Expert Opin Biol Ther,2014,14(10):1411-1425.

[10] 丁愛萍，張淑蘭.調(diào)節(jié)性 T 細胞在婦科腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及其研究進展[J].中國實用婦科與產(chǎn)科雜志，2012，28(9):718-720.

[11] 周利敏，李紅英，張敦蘭，等.調(diào)節(jié)性T細胞在宮頸癌外周血及腫瘤組織中的檢測及其相關性研究[J].海南醫(yī)學院學報，2014，20(7):899-901.

[12] 姜艷麗，劉磊，王雪野，等.外周血CD4+CD25+CDl27lowTreg調(diào)節(jié)性T細胞在惡性腫瘤患者免疫功能評估中的作用[J].中國實驗診斷學，2015，19(7):1117-1120.

[13] 盧永剛，劉凌云，何沙.CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞與腫瘤免疫的研究進展[J].中國現(xiàn)代普通外科進展，2013，16(2):134-137.

[14] 侯友翔，張園，鐘薇，等.宮頸癌人乳頭瘤病毒感染與CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞的相關性研究[J].新疆醫(yī)科大學學報，2013，36(12):1749-1752.

[15] Dennis KL,Blatner NR,Gounari F,et al. Current status of interleukin-10 and regulatory T-cells in cancer[J]. Curr Opin Oncol,2013,25(6):637-645.

[16] Murvai M,Borbély AA,Kónya J,et al. Effect of human papillomavirus type 16 E6 and E7 oncogenes on the activity of the transforming growth factor-β2(TGF-β2) promoter[J]. Arch Virol,2004,149(12):2379-2392.

[17] 強光亮，郭永慶.調(diào)節(jié)性T細胞參與腫瘤免疫的研究進展[J].國際免疫學雜志，2014，37(4):280-285.

[18] 張麗平，周智鋒，李潔羽，等.調(diào)節(jié)性T細胞對NK細胞體外殺傷婦科惡性腫瘤細胞的影響[J].免疫學雜志，2010，26(1):58-62.

[19] Ohkura N,Hamaguchi M,Morikawa H,et al. T cell receptor stimulation-induced epigenetic changes and Foxp3 expression are independent and complementary events required for Treg cell development[J]. Immunity,2012,37(5):785-799.

[20] Liu HY,Ma LP,Wei J,et al. Analysis of CD4(+)CD25(+)CD127(low/-) Treg cells in mice[J]. Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi,2012,20(6):1469-1473.

[21] Niri NM,Hadjati J,Sadat M,et al. Inducing Humoral Immune Responses Against Regulatory T Cells by Foxp3-Fc(IgG)Fusion Protein[J]. Monoclon Antib Immunodiagn Immunother,2015,34(6):381-385.

[22] Nie J,Li YY,Zheng SG,et al. FOXP3(+) Treg Cells and Gender Bias in Autoimmune Diseases[J]. Front Immunol,2015,6:493.

[23] Barbi J,Pardoll D,Pan F.Treg functional stability and its responsiveness to the microenvironment[J]. Immunol Rev,2014,259(1):115-139.

[24] Walker LS. Treg and CTLA-4:two intertwining pathways to immune tolerance[J]. J Autoimmun,2013,45:49-57.

(本文編輯：趙麗潔)

Study on the variation and correlation of regulatory T cells in peripheral blood and serum TGF-β and IL-10 in patients with gynecological tumor

YU Dan-jun1, FAN Jing2, HU Yue1, JIANG Li1, CAO Li-yan1, MEN Shuai1

(1.Department of Clinical Laboratory, the First Hospital of Qinhuangdao City, Hebei Province， Qinhuangdao 066000, China; 2.Department of Clinical Laboratory, the Fourth Hospital of Qinhuangdao City, Hebei Province， Qinhuangdao 066000, China)

Objective To explore the expression of regulatory T cells(Treg) and T cell subgroup in peripheral blood and the variation and correlation of transforming growth factor-β(TGF-β) and interleukin-10(IL-10) cytokines in serum in patients with gynecological cancer. Methods Ninety-seven cases(32 cases with cervical cancer, 35 cases with endometrial cancer, 30 cases with ovarian cancer) of patients with gynecological cancer and 30 cases of healthy controls were obtained as research objects. Flow cytometry was used to detect CD4+CD25+Foxp3+and CD4+CD25+CD127lowregulatory T cells and the distribution of T cell subgroup in peripheral blood of all the subjects. ELISA was used to detect the content of TGF-β1、TGF-β2 and IL-10 cytokines in serum. Results Compared with healthy control group, CD4+CD25+Foxp3+and CD4+CD25+CD127lowregulatory T cells accounted for the proportion of CD4+T cells expression in patients with gynecological cancer group in peripheral blood were significantly higher(P<0.05). There was no statistical significant difference in T cell subgroup proportion(P>0.05). The contents of TGF-β1and IL-10 in serum were significantly higher(P<0.05), the content of TGF-β2 was significantly lower(P<0.05). The proportion of CD4+CD25+Foxp3+and CD4+CD25+CD127lowregulatory T cells accounted for CD4+T cells in peripheral blood and TGF-β1、TGF-β2 and IL-10 in serum expression in patients with gynecological cancer group were significantly lower in one month after the operation, and after four cycles of chemotherapy(P<0.05) , CD4+、CD8+T cells and CD4+/CD8+in one month after the operation、CD4+、CD19+T cells after four cycles of chemotherapy were significantly lower than that before the operation(P<0.05). There was positive correlation between CD4+CD25+Foxp3+Treg and TGF-β1(rs=0.220,P=0.034). There were positive correlation between CD4+CD25+CD127lowregulatory T cells and the content of TGF-β1、TGF-β2 and IL-10(rs=0.284, 0.385, 0.336,P<0.01). Conclusion The immune tolerance mechanism in patients with gynecology cancer might be related to the ratio of CD4+CD25+Foxp3+Treg and CD4+CD25+CD127lowTreg accounted to the proportion of CD4+T cells, and to the content of TGF-β1、TGF-β2 and IL-10 cytokines.

genital neoplasms, female； T-lymphocytes, regulatory； flow cytometry

2016-08-12；

2016-09-29

秦皇島市科學技術研究與發(fā)展計劃(20141A219)

于丹軍(1973-)，男，遼寧建昌人，河北省秦皇島市

R737.3

A

1007-3205(2016)11-1307-06

10.3969/j.issn.1007-3205.2016.11.017

第一醫(yī)院副主任技師，醫(yī)學碩士，從事腫瘤免疫學研究。