邵雪峰，李曉君，劉 鋒，蔣 挺

(蘇州大學附屬太倉醫(yī)院暨太倉市第一人民醫(yī)院泌尿外科，江蘇太倉 215400)

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·臨床研究·

NIH-Ⅲb型前列腺炎患者尿液前列腺小體外泄蛋白的測定及診斷評價

邵雪峰，李曉君，劉 鋒，蔣 挺

(蘇州大學附屬太倉醫(yī)院暨太倉市第一人民醫(yī)院泌尿外科，江蘇太倉 215400)

目的 通過檢測尿液前列腺小體外泄蛋白(PSEP)來評估其作為慢性前列腺炎診斷標記物的臨床價值。方法 收集NIH-Ⅲb型前列腺炎患者107例和健康對照96例的尿液標本，采用ELISA方法對收集的尿液樣本進行PSEP的檢測。比較前列腺炎組與對照組之間尿液PSEP水平的差異。采用受試者工作特征(ROC)曲線計算靈敏度、特異度并計算最大約登指數(shù)，得出最佳診斷界值。結果 兩組尿液PSEP數(shù)據(jù)均呈非正態(tài)分布，前列腺炎組中位PSEP為1.133(0.371～3.580)ng/ mL，顯著高于對照組0.193(0～0.734)ng/ mL(P<0.01)。對PSEP檢測結果進行ROC曲線擬合，曲線下面積為0.755，診斷界值為1.237 ng/mL，敏感性為51.4%，特異性為88.5%。結論 尿液PSEP作為NIH-Ⅲb型前列腺炎的輔助診斷指標，其診斷效能中等，但具有較高的可操作性和較好的臨床應用價值。

前列腺小體外泄蛋白(PSEP)；慢性前列腺炎；診斷；ELISA

慢性前列腺炎( chronic prostatitis，CP) 是泌尿外科成年男性最常見的疾病之一。1998 年美國國立衛(wèi)生研究院將CP分為3 型：①NIH-Ⅱ型：慢性細菌性前列腺炎；②NIH-Ⅲ型：CP/慢性骨盆疼痛綜合征，此型根據(jù)前列腺按摩液、精液中白細胞計數(shù)又分為炎癥性(NIH-Ⅲa)和非炎癥性(NIH-Ⅲb)兩個亞型；③NIH-Ⅳ型：無癥狀炎癥性前列腺炎[1]。CP的病因及發(fā)病機制復雜，其發(fā)病是各種因素引起的感染、免疫、內分泌、神經、精神因素等相互作用所導致的炎癥過程[2]。NIH-Ⅱ型前列腺炎有明確致病因素。但NIH-Ⅲ型前列腺炎，尤其是Ⅲb型，診斷主觀性較強，實驗室檢查方法有限[3]。本研究中，我們檢測NIH-Ⅲb型患者尿液前列腺小體外泄蛋白(prostatic exosomal protein，PSEP)，并評估其作為診斷標記物的臨床價值，報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 參照中國泌尿外科疾病診斷治療指南(2014版)中CP臨床診斷標準，采用兩杯法，收集自2014年5月至2015年12月的江蘇省太倉市第一人民醫(yī)院就診的NIH-Ⅲb型前列腺炎患者107例和健康對照96例的尿液標本，年齡18～60歲，兩組年齡分布無顯著差異。

排除標準：前列腺癌患者；急性前列腺炎患者；二周內置入導尿管者；48 h內有性生活者；有嚴重的肛腸部位疾病，不適合行前列腺按摩檢測者。

1.2 樣本檢測 CP患者留取按摩前中段尿暫存于-80 ℃冰箱，并常規(guī)行尿常規(guī)、EPS鏡檢及培養(yǎng)，根據(jù)EPS結果保留NIH-Ⅲb型患者中段尿標本待檢。對照組留取中段尿標本，此外行尿常規(guī)檢測。采用ELISA方法對收集的尿液樣本進行PSEP檢測。 ELISA試劑盒購自昂科生物醫(yī)學技術(蘇州)有限公司。

1.3 評估PSEP 數(shù)據(jù)采用中位數(shù)(四分位距)表示。比較前列腺炎組與對照組之間尿液PSEP水平的差異。ROC曲線計算靈敏度，特異度并計算最大約登指數(shù)，得出Cutoff值。

1.4 統(tǒng)計學處理 數(shù)據(jù)分析采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理。前列腺炎癥患者與正常人的樣本差異比較采用秩和檢驗。P<0．05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 兩組數(shù)據(jù)比較 前列腺癌組與對照組中位年齡分別為30(25～38)歲及32(27～40)歲，年齡分布無顯著性差異(P>0.05)。兩組尿液PSEP數(shù)據(jù)均呈非正態(tài)分布。前列腺炎組中位PSEP為1.133(0.371～3.580)ng/mL，顯著高于對照組[0.193(0～0.734)ng/mL,P<0.01]。見表1。

表1 前列腺炎組與對照組年齡及PSEP的比較

項目前列腺炎組對照組P值例數(shù)10796年齡[M(范疇),歲]30(25～38)32(27～40)>0.05PSEP[M(范疇),ng/mL]1.133(0.371～3.580)0.193(0～0.734)<0.01*

*Mannwhitney U檢驗。

2.2 ROC結果 對PSEP檢測結果進行受試者工作特征(receiver operating，ROC)曲線擬合，結果見圖1。ROC曲線下面積為0.755，選擇Youden指數(shù)最大的點對應的界值作為NIH-Ⅲb型前列腺炎的診斷標準，得出Cutoff值為1.237 ng/ mL，對應的診斷敏感性為51.4%，特異性為88.5%。

圖1 前列腺小體外泄蛋白的受試者工作特征曲線

3 討 論

前列腺炎臨床表現(xiàn)缺乏特異性，同時缺乏客觀準確的診斷手段，臨床的診療效果一直不理想[4]。在CP診斷標記物的研究方面，國內外已取得一定進展。神經生長因子(nerve growth factor，NGF)在神經功能中起著至關重要的作用，在神經損傷和神經性感染后，NGF都會迅速再生[5]。從UPOINT分型來看，神經功能紊亂是CP的一個危險因素。有相關報道表明，CP患者前列腺液中的NGF表達明顯增高[6]，且與患者的主觀癥狀呈正相關。自身免疫方面，前列腺組織在發(fā)生炎癥時會產生特異性抗原，這些抗原會通過生理屏障和前列腺管進入血液中[7]。CP患者細胞因子水平中，白介素2(interleukin-2，IL-2 )、白介素10(interleukin-10,IL-10)及腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factorα，TNF-α)明顯升高[8]。NADLER[9]及國內學者呂玉宏等[10]分別通過對患者前列腺液及血清中白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)水平進行檢測，發(fā)現(xiàn)在前列腺液及血清中，患者的IL-1β水平均增高。呂玉宏等[10]進一步發(fā)現(xiàn)治療后患者血清中IL-1β表達下降。

然而上述這些標記物都需要通過前列腺按摩采集患者前列腺液進行檢測，實際應用于臨床診斷仍存在較大局限性：前列腺液臨床取材不便，相當一部分患者無法取得前列腺液，同時前列腺按摩也存在一定痛苦。而尿液取材簡便，在尿液中尋找到合適的前列腺炎診斷標記物可很好地化解這一難題。

前列腺小體(prostasomes)是一種亞細胞的囊泡狀結構，具有廣泛的生理功能，其直徑40～500 nm，由人類前列腺上皮細胞通過胞吐作用分泌[11]，然后進入前列腺液及尿液[12]。前列腺小體的脂質成分以鞘磷脂為主，并含有一定量的核酸成分，如mRNA、miRNA、DNA小片段等。前列腺小體包含的蛋白質成分多達百余種：酶類(35%)，運輸、結構類蛋白(19%)，GTP結合蛋白(14%)，分子伴侶(6%)，信號轉導蛋白(17%)以及注釋蛋白(9%)等[13]。前列腺增生、炎癥、腫瘤等病理情況下，前列腺小體的分泌量以及蛋白組學特征可能產生變化，其中一些蛋白成分已成為前列腺癌的潛在診斷標記物[14]。研究顯示，在炎癥狀態(tài)下，前列腺小體外泄蛋白明顯升高，可達到診斷CP的目的[15]。

本研究中，NIH-Ⅲb型前列腺炎患者尿液中PSEP明顯高于對照組。ROC曲線分析結果顯示其曲線下面積為0.755，診斷效能中等。PSEP界值1.237 ng/mL所對應的檢測敏感性為51.4%、特異性為88.5%。本研究中所納入的病例數(shù)還有所欠缺，相信通過大樣本的數(shù)據(jù)分析，可以得出PSEP的確切診斷界值以及敏感性和特異性。由于NIH-Ⅲb型前列腺炎癥狀不典型，盆腔疼痛綜合征病因廣泛，目前臨床診斷CP往往需要大量輔助檢查進行鑒別診斷，且仍有較高的誤診率。因此在臨床應用中可適當提高PSEP診斷界值，來增加診斷特異性，這樣可能會對NIH-Ⅲb型前列腺炎的確診大有益處。

綜上所述，尿液前列腺小體外泄蛋白可以作為NIH-Ⅲb型前列腺炎的臨床輔助診斷指標，具有可操作性和較好的臨床價值。前列腺小體外泄蛋白檢測方法的應用，有可能彌補臨床上診斷NIH-Ⅲb型前列腺炎主觀性強、檢測方法有一定痛苦等不足，可能為NIH-IIIb型前列腺的診斷提供一種新穎的簡便易行、非侵入性、無痛的分子檢測方法，具有較好的臨床應用前景。

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(編輯 何宏靈)

Detection and diagnostic evaluation of urine prostatic exosomal protein in patients with NIH-Ⅲb prostatitis

SHAO Xue-feng, LI Xiao-jun, LIU Feng, JIANG Ting

(Department of Urology, Taicang Hospital Affiliated to Suzhou University & the First People’s Hospital of Taicang, Taicang 215400, China)

Objective Urine prostatic exosomal protein (PSEP) was detected to evaluate its clinical potential as a diagnostic marker of chronic prostatitis (CP). Methods A total of 107 cases of NIH-IIIb prostatitis and 96 healthy controls were enrolled. Urine samples were collected for ELISA testing. PSEP levels were compared between the two groups. A ROC curve was drawn to calculate the sensitivity, specificity and optimum Youden index, so as to figure out the cut-off value of PSEP. Results The median PSEP of the prostatitis group was 1.133(0.371—3.580) ng/mL, which was higher than that of the control group[0.193 (0—0.734)ng/mL,P<0.01]. The area under the ROC curve was 0.755. The diagnostic cutoff value was 1.237 ng/mL, the sensitivity was 51.4%, and the specificity was 88.5%.Conclusion Urine PSEP as a diagnostic marker of NIH- IIIb prostatitis, shows a medium ability in the diagnosis of CP, but it has good operability and clinical value.

prostatic exosomal protein(PSEP); chronic prostatitis; diagnosis; enzyme linked immunosorbent assay

2016-06-21

2016-08-31

蔣挺，副主任醫(yī)師.E-mail:tcyyurology@163.com

邵雪峰(1970-)，男(漢族)，主任醫(yī)師，碩士.研究方向：前列腺疾病、泌尿系腫瘤.E-mail：sxfsxf703@163.com

R697.33

A

10.3969/j.issn.1009-8291.2016.11.011