張哲 黃建勛 戚繼

（復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 植物科學(xué)研究所 遺傳與發(fā)育協(xié)同創(chuàng)新中心，上海 200433）

基于低拷貝核基因的組分特征研究十字花科植物的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系

張哲 黃建勛 戚繼

（復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 植物科學(xué)研究所 遺傳與發(fā)育協(xié)同創(chuàng)新中心，上海 200433）

近年來(lái)人們?cè)谑只莆锓N系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系方面開(kāi)展了大量工作，研究發(fā)現(xiàn)十字花科可分為3個(gè)主要類群，但是這些類群內(nèi)部以及類群間的進(jìn)化關(guān)系還不明確。旨在快速準(zhǔn)確地解決十字花科物種系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系，通過(guò)選取39個(gè)十字花科物種及兩個(gè)外類群物種作為研究材料，使用系統(tǒng)發(fā)生基因組學(xué)方法獲得了覆蓋所選物種的低拷貝同源基因集合。進(jìn)一步通過(guò)CVTree方法分析低拷貝核基因的組分特征，得到了高度支持與穩(wěn)定的十字花科系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。結(jié)果顯示，十字花科被分為6個(gè)主要的類群，其中3個(gè)主要類群的劃分與前人的分類結(jié)果高度一致，并且增加了兩個(gè)新類群，此外，前人研究中存在爭(zhēng)議的第二類群在本研究結(jié)果中成為有穩(wěn)定支持的單系群。表明基于大量低拷貝同源基因集合并結(jié)合組分矢量分析，可以較為準(zhǔn)確地反映十字花科物種的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系。因此，CVTree方法不僅適用于研究原核生物、真菌等微生物的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系，也可以用來(lái)探究十字花科植物等高等生物的親緣關(guān)系。

十字花科；系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系；組分矢量；低拷貝核基因

在真核生物的系統(tǒng)發(fā)生研究中，由于線粒體、葉綠體等細(xì)胞器基因較易獲得而被廣泛使用，例如，Zhu等［1，2］利用線粒體基因matR研究薔薇科的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。由于線粒體基因組在不同植物類群中差異較大（300-600 kb），并且部分寄生類群植物的線粒體基因組中存在核基因的插入［3，4］，這些特點(diǎn)在一定程度上限制了線粒體基因在植物系統(tǒng)發(fā)生研究中的應(yīng)用。不同物種的葉綠體基因具有組成和排列相似、大都是直系同源基因且基因序列比較保守等特點(diǎn)［5］，同時(shí)已有大量的植物葉綠體基因組信息被測(cè)序發(fā)表，這些因素使得葉綠體基因成為研究植物系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系的常用材料之一［6-8］。然而，由于葉綠體基因?qū)儆趩蜗颠z傳，攜帶的進(jìn)化信息有限，難以揭示大類群內(nèi)部深層次的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系。隨著高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，快速、準(zhǔn)確及大規(guī)模獲取植物的核基因序列成為可能，因此目前越來(lái)越多的研究人員開(kāi)始采用屬于雙親遺傳、攜帶更多遺傳信息的核基因來(lái)研究植物的親緣關(guān)系［9，10］。近年來(lái)大量有關(guān)工作通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序手段獲取被子植物或陸地植物的編碼序列，在多種尺度開(kāi)展植物的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系研究［11-13］。

與細(xì)胞器基因相比，核基因具有復(fù)雜的進(jìn)化模式，包括基因重復(fù)和基因丟失。研究表明，被子植物在進(jìn)化過(guò)程中經(jīng)歷過(guò)多次全基因組重復(fù)事件（Whole genome duplication，WGD）［14］；十字花科祖先經(jīng)歷過(guò)α和β兩次全基因組重復(fù)事件［15-17］；還存在一定數(shù)量的種、屬特異的全基因組重復(fù)事件。例如，白菜近期經(jīng)歷過(guò)獨(dú)立的基因組三倍化［18］，大豆也被證實(shí)近期發(fā)生過(guò)一次全基因組重復(fù)事件。祖先基因組多倍化事件導(dǎo)致的全基因組重復(fù)，可能在后代類群中存在丟失不同基因拷貝的現(xiàn)象［19］，使得部分基因退回到單拷貝狀態(tài)，這可能導(dǎo)致不同物種間保留的基因?yàn)榕韵低搓P(guān)系。由于旁系同源基因無(wú)法提供正確的物種分化信息，因此在一定程度上限制了核基因在植物親緣關(guān)系研究中的應(yīng)用。面對(duì)這一挑戰(zhàn)，研究人員不斷開(kāi)發(fā)新的生物信息學(xué)方法，從大量物種的測(cè)序數(shù)據(jù)中獲取可能具有直系同源關(guān)系的單拷貝或低拷貝基因來(lái)構(gòu)建真實(shí)反映物種關(guān)系的進(jìn)化樹(shù)，并且已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展［20，21］。

十字花科（Brassicaceae）是一個(gè)公認(rèn)的自然大科，全科分為338個(gè)屬，共有3 700多個(gè)種［22］，主要分布于地中海及西北美等北溫帶地區(qū)，同時(shí)也廣泛分布于我國(guó)西南、西北及東北的高山區(qū)及丘陵區(qū)［23］。十字花科中不僅存在白菜、油菜等具有重要應(yīng)用價(jià)值的作物，還包含多種適應(yīng)干旱、鹽堿、低溫等不同極端環(huán)境的植物，被廣泛用于分子生物學(xué)研究的模式植物擬南芥也屬于這一類群，因此該科具有重要的經(jīng)濟(jì)和研究?jī)r(jià)值。目前已經(jīng)公布了十字花科中19個(gè)物種的基因組測(cè)序信息［2，24-33］。十字花科祖先以及物種分化以后等不同演化階段發(fā)生過(guò)多次基因組多倍化并可能導(dǎo)致一定程度的物種輻射［34-37］，使得十字花科具有豐富的物種多樣性，為植物系統(tǒng)發(fā)生有關(guān)研究提供了優(yōu)良的素材。

近年來(lái)發(fā)表的關(guān)于十字花科植物族屬的界定及科內(nèi)系統(tǒng)演化關(guān)系方面的工作主要依靠葉綠體基因和少量核基因提供的進(jìn)化信息。Beilstein等［38］利用來(lái)自113個(gè)十字花科物種的葉綠體基因ndhF序列信息，將十字花科劃分為主要的3個(gè)類群（I、II、III）；同時(shí)Franzke等［39］定義了擴(kuò)展的類群II（Extended II，EII），該類群包含了原類群II以及部分類群II的并系類群中的物種。由于類群EII的物種親緣關(guān)系還存在爭(zhēng)議，因此在十字花科進(jìn)化樹(shù)上EII的內(nèi)部關(guān)系經(jīng)常以梳狀結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)。最近Huang等［10］利用113個(gè)核基因?qū)⑹只品譃?個(gè)主要類群，在得到與前人研究一致的3個(gè)主要類群的基礎(chǔ)上，同時(shí)較好地解決了類群EII的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。

在十字花科以及其它被子植物系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系的研究中，少數(shù)基因集合所包含的物種演化信息不能反映一致的物種親緣關(guān)系。為了消除少數(shù)核基因的具體選擇在十字花科系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系分析中的影響，本研究通過(guò)使用系統(tǒng)基因組學(xué)方法，從34個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組及7個(gè)物種的基因組中篩選出大量低拷貝核基因，并使用組分矢量方法分析氨基酸序列片段中所包含的共同祖征、演征信息，以期獲得穩(wěn)定的十字花科物種系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系，為深入研究十字花科以及其它類群物種的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系提供新的視角。

1 材料與方法

1.1 材料

本研究采用了34個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)和7個(gè)物

種的基因組數(shù)據(jù)，其中轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)包括來(lái)自于本實(shí)驗(yàn)室測(cè)序的33個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組信息以及公共數(shù)據(jù)庫(kù)下載的1個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組信息（包括33個(gè)十字花科物種和1個(gè)醉蝶花科的Cleome serrulata作為外類群物種）；基因組數(shù)據(jù)部分包括公共數(shù)據(jù)庫(kù)下載的7個(gè)物種的基因組信息（包括6個(gè)十字花科物種和1個(gè)番木瓜科的番木瓜作為外類群物種），41個(gè)物種的具體信息及數(shù)據(jù)來(lái)源信息，見(jiàn)表1。

1.2 方法

在西方文化的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)的縫隙中中艱苦生活的藤尾不能平衡西洋文化的優(yōu)點(diǎn)、短處和封建性。這是藤尾死亡的主觀原因，藤尾自己在這個(gè)情況下，以死亡逃避現(xiàn)實(shí)。藤尾的母親迷女意識(shí)到自己的壞事也于事無(wú)補(bǔ)了。藤尾想擁有純粹的愛(ài)情，也不能舍棄以利益和個(gè)人為中心的本位意識(shí)。也不知道面對(duì)愛(ài)情被背叛的方法。實(shí)際上，這是一個(gè)非常大的西方化女性的狀況。

1.2.1 數(shù)據(jù)處理 利用Trinity軟件對(duì)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行拼接［40］（參數(shù)為默認(rèn)參數(shù)），使用TGICL軟件（參數(shù)：-p 0.98，-l 40，-v）來(lái)獲得更長(zhǎng)的cDNA序列［41］。使用CD-HIT軟件對(duì)基因組或轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中相似度高的序列進(jìn)行過(guò)濾處理［42］。最后進(jìn)行序列比對(duì)及同源基因簇構(gòu)建。為了準(zhǔn)確識(shí)別41個(gè)物種的同源基因簇，我們對(duì)任意兩物種間的蛋白質(zhì)序列進(jìn)行了all-against-all blastP比對(duì)分析，隨后利用Inparanoid計(jì)算蛋白質(zhì)序列全局比對(duì)相似性并舍去比對(duì)相似性低于40%的比對(duì)結(jié)果［43］。接下來(lái)利用OrthoMCL整合分析41個(gè)物種所包含的1 149 041個(gè)基因之間的蛋白質(zhì)序列比對(duì)結(jié)果［44］，最終得到35 948個(gè)同源基因簇，每個(gè)同源基因簇平均約包含29個(gè)基因，平均物種覆蓋度為41.88%。

1.2.2 低拷貝基因的篩選標(biāo)準(zhǔn) 以同源基因簇中單拷貝基因的物種數(shù)占總物種數(shù)的85%、80%及75%（對(duì)應(yīng)35、33及31個(gè)具有單拷貝基因的物種數(shù)）作為閾值得到3個(gè)低拷貝同源基因簇集，作為后續(xù)分析的3個(gè)數(shù)據(jù)集。同時(shí)刪除低拷貝同源基因簇中其它物種的多拷貝基因，保證每個(gè)低拷貝同源基因簇中所有物種均為單拷貝同源基因。

1.2.3 十字花科親緣關(guān)系預(yù)測(cè) 在每個(gè)數(shù)據(jù)集中分別提取每個(gè)物種的所有氨基酸序列組成該物種的“縮略基因組”。使用CVTree構(gòu)建各個(gè)物種的組分矢量，同時(shí)計(jì)算兩物種組分矢量間的夾角余弦值并將其轉(zhuǎn)換為物種距離，最后使用鄰接法（Neighbor Joining Method，NJ）構(gòu)建十字花科物種系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)。

2 結(jié)果

2.1 物種基因組/轉(zhuǎn)錄組概況

本研究選擇來(lái)自于十字花科的39個(gè)物種（涵蓋了18個(gè)族及兩個(gè)未定族）和兩個(gè)外類群物種。首先對(duì)其中34個(gè)物種的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄本拼接處理，得到了每個(gè)物種約25 000-35 000個(gè)轉(zhuǎn)錄本（表1），每個(gè)轉(zhuǎn)錄本的平均氨基酸長(zhǎng)度約為313（圖1）。由于高度相似的序列會(huì)對(duì)后續(xù)篩選低拷貝同源基因造成影響，因此對(duì)基因組數(shù)據(jù)以及拼接后的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中高度相似的序列進(jìn)行了過(guò)濾處理。結(jié)果保留了平均每個(gè)物種約28 025個(gè)基因或轉(zhuǎn)錄本序列用于后續(xù)的相關(guān)分析。

表1 41個(gè)物種的物種信息、基因組或轉(zhuǎn)錄組信息及數(shù)據(jù)來(lái)源

圖1 41個(gè)物種的基因或轉(zhuǎn)錄本平均氨基酸長(zhǎng)度分布

2.2 同源基因聚類

本研究對(duì)41個(gè)物種的氨基酸序列進(jìn)行了allagainst-all blastP序列比對(duì)分析，得到了兩兩物種間的同源基因?qū)Ψ植记闆r。隨后，整合了所有物種的比對(duì)結(jié)果信息，進(jìn)一步分析得到了41個(gè)物種間共計(jì)35 948個(gè)同源基因簇，其中平均每個(gè)同源基因簇中約含有來(lái)自17個(gè)物種的29個(gè)基因。通過(guò)觀察以上這些同源基因簇中基因數(shù)目的分布情況，得到了兩個(gè)較為集中分布的同源基因簇集，分別對(duì)應(yīng)直方圖上的兩個(gè)峰值（圖3-A）。其中第一個(gè)峰值周圍的同源基因簇中約含有0-15個(gè)基因，這部分同源基因簇集代表十字花科內(nèi)部分支部分物種的祖先基因；第二個(gè)峰值周圍的同源基因簇中約含有40-50個(gè)基因，這部分同源基因簇集則代表十字花科物種分化前的祖先基因，因此這部分同源基因簇保留了更全面的十字花科物種的遺傳信息。

表2 41個(gè)物種同源基因及孤兒基因的分布情況

2.3 單拷貝同源基因篩選

前期研究結(jié)果表明十字花科祖先在經(jīng)歷了兩次全基因組重復(fù)后，其產(chǎn)生的復(fù)制基因迅速丟失。其中有約4 000對(duì)重復(fù)基因在十字花科物種分化前仍

然保留了兩個(gè)以上拷貝。由于重復(fù)基因在不同類群中可能保留了不同的拷貝，使得建樹(shù)過(guò)程中可能采用了旁系同源基因而無(wú)法反映正確的物種關(guān)系（圖2）。為了盡量避免全基因組或基因重復(fù)事件對(duì)構(gòu)建十字花科系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系的影響，從同源基因簇中挑選滿足一定物種覆蓋度且各物種同源基因?yàn)閱慰截惖幕蚣Ｒ晕锓N覆蓋度為85%、80%及75%（對(duì)應(yīng)35、33及31個(gè)物種數(shù)）作為閾值得到3個(gè)數(shù)據(jù)集合，分別包含2 058、3 047和4 001個(gè)單拷貝基因簇。在3種數(shù)據(jù)集中，大部分同源基因簇約包含40-50個(gè)基因（圖3-B），并且總物種覆蓋度約為98%（表3），表明3種數(shù)據(jù)集幾乎覆蓋所有物種，為后續(xù)的系統(tǒng)發(fā)生研究提供了較為充足的遺傳信息。

2.4 構(gòu)建十字花科系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系

圖2 基因選擇對(duì)物種樹(shù)正確性的影響

圖3 總同源基因簇（A）及3個(gè)同源基因簇子集（B）的基因數(shù)分布情況

表3 三種同源基因簇集的基本信息

利用CVTree方法及3種同源基因簇集合分別構(gòu)建了十字花科系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)。隨后整合分析了3種系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系結(jié)果并最終得到了高度支持與穩(wěn)定的十字花科系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)。如圖4所示，十字花科分為六大類群（類群A-F），與前人研究得到的十字花科六大類群的分類結(jié)果高度一致。其中類群A與類群B和C的結(jié)合類群互為姐妹類群，類群D為類群A、B、C結(jié)合類群的姐妹群，同時(shí)類群E為類群A、B、

C、D結(jié)合類群的姐妹群，Aethionemeae族為基部類群F。在大尺度上，我們的結(jié)果與前人構(gòu)建的十字花科三大類群（類群I、II、III）的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系基本一致，即類群A和類群B分別對(duì)應(yīng)類群I和類群II，同時(shí)類群III中的大部分物種被劃分至類群E中。在兩個(gè)小類群C、D中，分別包含了類群EII及類群III中的部分物種。此外，我們還較好地解決了類群EII的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，將類群EII中的大部分物種劃分至類群B中（與類群II互為姐妹類群），其它物種則被劃分至類群C和類群D中?？傮w來(lái)說(shuō)，基于CVTree方法得出的十字花科系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系與前人利用葉綠體基因以及核基因構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系在大類群的親緣關(guān)系上基本一致。在我們構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)上（圖4），節(jié)點(diǎn)處的實(shí)心圓點(diǎn)代表該拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)得到3種同源基因簇集合的共同支持，空心圓點(diǎn)代表該拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)得到兩種同源基因簇集合的共同支持。本研究系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)中幾乎所有的節(jié)點(diǎn)都得到了高度支持，這也證明了該系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系不隨基因集合的變化而改變，因此具有較高的穩(wěn)定性。

3 討論

基于大量低拷貝核基因集合和CVTree方法構(gòu)建的十字花科系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)在族、屬等尺度上與前人的研究結(jié)果高度一致，在一些個(gè)別分支的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系上存在一定程度的差異。例如，本研究結(jié)果與Kagale等［12］的研究結(jié)果相一致，認(rèn)為L(zhǎng)epidieae族的分化晚于Cardamineae族。而Huang等［10］的研究結(jié)果則認(rèn)為L(zhǎng)epidieae族的分化時(shí)間較早，屬于類群I的基部分支。有研究表明Lepidieae族經(jīng)歷過(guò)異源多倍化事件［45］，因此采用不同的同源基因集合可能會(huì)對(duì)正確反映Lepidieae族的分化位置造成影響。其次，在類群I中Physaria newberryi的位置也與前人的研究結(jié)果存在差異，Huang等的研究結(jié)果中Physaria newberryi分支在c分支分化之后、b分支分化之前出現(xiàn)（圖4），而在我們的研究結(jié)果中Physaria newberryi位于類群I的基部。我們發(fā)現(xiàn)Huang等［10］構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)中，Physaria newberryi在類群I物種中的枝長(zhǎng)最長(zhǎng)，表明該物種具有較快的進(jìn)化速率，這可能會(huì)對(duì)不同的構(gòu)樹(shù)方法造成不同的影響。另外Huang等的研究認(rèn)為T(mén)urritis glabra位于a類群基部（圖4），而在本結(jié)果中Turritis glabra與Boechera canadensis的親緣關(guān)系更接近，并且為a類群的姐妹群，這可能與Huang等的結(jié)果中包含Alyssopsis mollis、Murbeckiella pinnatifida等Turritis glabra的近鄰物種有關(guān)。

由于Schrenkiella parvula和Eutrema salsugineum均為耐鹽植物，早期研究認(rèn)為這兩個(gè)物種同屬于鹽芥屬（Thellungiella）。Kagale［12］和Huang等［10］的研究結(jié)果均認(rèn)為Schrenkiella parvuls的分化早于Eutrema salsugineum和其它EII-B類群物種，暗示這兩個(gè)物種的抗鹽性狀為物種分化后單獨(dú)獲得。而本研究結(jié)果與早期的分類保持一致，即Schrenkiella parvula和Eutrema salsugineum的親緣關(guān)系更接近，傾向于支持兩個(gè)物種鹽適應(yīng)能力的獲得發(fā)生在物種分化之前。此外，本研究結(jié)果穩(wěn)定支持Lunaria annua與類群II和EII的結(jié)合類群互為姐妹類群，即該物種在d分支分化之后出現(xiàn)（圖4），而Huang等的研究結(jié)果顯示Lunaria annua在d分支分化之前、e分支分化之后出現(xiàn)。由于d和e兩個(gè)分支的進(jìn)化關(guān)系較近，這也在一定程度上加大了正確反映Lunaria annua系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系的難度，因此可能需要加入其它近鄰物種才能確定Lunaria annua的進(jìn)化位置。

基因重復(fù)和丟失等因素可能在一定程度上對(duì)依賴于直系同源基因比較的進(jìn)化研究造成影響。在本研究結(jié)果中Brassiceae族物種約含有3萬(wàn)-4萬(wàn)個(gè)編碼基因（表1），顯著高于十字花科其它族物種的平均基因數(shù)目。這與Brassiceae族祖先經(jīng)歷過(guò)近期基因組多倍化事件相符，表明Brassiceae族物種在全基因組重復(fù)后保留了大量的旁系同源基因。與前人的研究結(jié)果相比，本研究結(jié)果中Brassica nigra和Brassica rapa的位置發(fā)生了調(diào)換，這可能與Brassiceae族物種中普遍存在的旁系同源基因的保留、丟失模式有關(guān)，因此需要進(jìn)一步深入研究才能為Brassiceae族構(gòu)建出正確的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系。

綜上所述，基于CVTree方法我們得到了穩(wěn)定支持的十字花科物種系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。我們將十字花科劃分為六大類群，其中類群A、B和E基本與前人研究結(jié)果中的類群I、II和III一一對(duì)應(yīng)，同時(shí)還增加了兩個(gè)新類群（類群C、D）。此外，我們將EII類群中大部分物種劃分至類群B中，并且與類群II

互為姐妹類群，其它之前被認(rèn)為屬于類群EII的物種則分布在類群C和類群D中。本研究結(jié)果在分類情況、各個(gè)類群內(nèi)及類群間的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系上與前人的研究結(jié)果基本一致，同時(shí)較好地解決了類群EII分類的爭(zhēng)議。以上結(jié)果表明，在全基因組尺度上進(jìn)行同源基因聚類以及低拷貝同源基因篩選，將在一定程度上減少使用少數(shù)基因構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)研究中面臨的基因選擇問(wèn)題，使得快速準(zhǔn)確地獲得物種進(jìn)化關(guān)系成為可能?？焖侔l(fā)展的高通量測(cè)序技術(shù)使得CVTree方法不僅適用于原核生物、真菌等微生物的

系統(tǒng)發(fā)生分析［46］，也可以被應(yīng)用在十字花科或更多類群物種的進(jìn)化研究中。

圖4 十字花科系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)

4 結(jié)論

本研究采用39個(gè)十字花科物種及兩個(gè)外類群物種，利用系統(tǒng)基因組學(xué)方法篩選低拷貝核基因并基于組分矢量方法得到了高度支持與穩(wěn)定的十字花科系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系。本結(jié)果在分類情況、各個(gè)類群內(nèi)及類群間的系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系上與前人研究結(jié)果基本一致，同時(shí)較好地解決了類群EII分類的爭(zhēng)議，為使用低拷貝核基因深入分析十字花科系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系提供了框架。

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（責(zé)任編輯 李楠）

Revealing Deep Phylogeny of Brassicaceae Using Composition Analysis of Low-copy Nuclear Genes

ZHANG Zhe HUANG Chien-hsun QI Ji
（Collaborative Innovation Center of Genetics and Development，Institute of Plant Biology，School of Life Sciences，F(xiàn)udan University，Shanghai 200433）

Brassicaceae，as many vegetable crops and important model plants，is one of the most successful and economically valuable angiosperm families. Recent phylogenetic studies revealed that plants of Brassicaceae were classified into 3 major lineages（I，II，and III），however，detailed evolutionary relationships among them and intra-lineage still remain unknown. In order to quickly and accurately understand the phylogeny of Brassicaceae species，39 Brassicaceae species and two species of other family were chosen as research materials，and a set of low copy orthologous genes covering all the selected species was acquired via phylogenetic genomics. Further，the composition characteristics of low copy nuclear genes were analyzed by CVTree，the phylogeny of Brassicaceae in highly supported and stable relationship was obtained. The results revealed that Brassicaceae could be classified into 6 major lineages，and 3 of which agreed well with the classification by the priors，and 2 new major lineages were defined. Moreover，lineage II that was in dispute in previous studies was confirmed as the single lineage with stable supports. This indicated that a large number of low copy orthologous genes set combined with the analysis of composition vector may more accurately reflect phylogeny of Brassicaceae species. Therefore，CVTree not only is suitable for studying the phylogeny of microorganisms such as prokaryotic organisms and fungi，but also for exploring the genetic relationship of higher organisms such as Brassicaceae plants

Brassicaceae；phylogeny；composition vector；low-copy nuclear gene

10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.12.015

2016-04-08

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（91131007）

張哲，男，研究方向：基因組遺傳變異和功能分化，E-mail：zhangzhe1020@126.com；黃建勛為本文并列第一作者

戚繼，男，博士，研究方向：基因組遺傳變異和功能分化；E-mail：qij@fudan.edu.cn