井 菲（南水北調(diào)中線建管局渠首分局，河南省南陽(yáng)市473000）

水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)的微生物質(zhì)控措施研究

井 菲（南水北調(diào)中線建管局渠首分局，河南省南陽(yáng)市473000）

隨著人們環(huán)保與安全意識(shí)的增強(qiáng)，水質(zhì)監(jiān)測(cè)中微生物樣品的檢測(cè)與管理越來(lái)越受到廣泛關(guān)注。近些年來(lái)，供水安全問(wèn)題逐漸增多，對(duì)人們的生命健康造成了嚴(yán)重威脅。我們要對(duì)水質(zhì)安全有足夠重視，加強(qiáng)水質(zhì)微生物樣品實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)，規(guī)范實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)程序，提高水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)質(zhì)量，確保供水安全。本文主要從水質(zhì)微生物樣品采集、水質(zhì)微生物樣品監(jiān)測(cè)、實(shí)驗(yàn)室控制以及樣品監(jiān)測(cè)后的處理等方面對(duì)水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)微生物質(zhì)控方法進(jìn)行了分析，希望對(duì)相關(guān)研究領(lǐng)域提供借鑒經(jīng)驗(yàn)。

水質(zhì)；環(huán)境監(jiān)測(cè)；微生物

水質(zhì)在監(jiān)測(cè)的過(guò)程中，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)微生物的檢測(cè)常常會(huì)出現(xiàn)一些問(wèn)題，比如：在分析微生物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)、已經(jīng)知道的加入量以及參比的樣品等等，有些實(shí)驗(yàn)室不具備這些條件，或者不知道，所以，個(gè)人的判斷是必要。切實(shí)有效的質(zhì)量保證程序一定可以控制好從采樣一直到報(bào)告數(shù)據(jù)的整個(gè)過(guò)程，盡量避免檢驗(yàn)結(jié)果受到影響。一般來(lái)說(shuō)，可以影響到檢測(cè)結(jié)果的因素主要有：采樣技術(shù)；實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材；工作人員的業(yè)務(wù)水平；材料的質(zhì)量；培養(yǎng)基；分析測(cè)試的步驟等等。

1 水質(zhì)微生物樣品采集

在采集微生物樣品之前，需要準(zhǔn)備采樣玻璃瓶。為了保證容器無(wú)菌性，需要對(duì)玻璃進(jìn)行180℃的高溫殺菌消毒處理，時(shí)間保持在2h左右。在樣品采集時(shí)，要選取具有代表性的樣品。通常情況下，在同一水源處，如果同時(shí)需要采集幾類檢測(cè)指標(biāo)的水樣時(shí)，首先應(yīng)該采集可供微生物學(xué)指標(biāo)檢測(cè)的水樣。

1.1 水質(zhì)微生物樣品監(jiān)測(cè)

一般來(lái)說(shuō)，水質(zhì)量檢測(cè)微生物的實(shí)驗(yàn)室一定要先準(zhǔn)備齊全采集微生物樣品無(wú)菌的采樣玻璃瓶，隨著時(shí)間與空間的變化，許多水體會(huì)發(fā)生很大的變化，因此，一定早制定出科學(xué)合理的水質(zhì)微生物采樣的規(guī)劃。為了保證所采集水樣具有代表性，采樣的時(shí)候必須固定取水的地點(diǎn)，同一個(gè)時(shí)間段；所采集的水樣一般為瓶容量的80%左右，在檢驗(yàn)的時(shí)候一定要混勻充分；采集樣品時(shí)一定要直接采集，已經(jīng)滅菌采樣瓶不能用樣水沖刷，避免手指與其他物品對(duì)采樣瓶口造成玷污；在采樣的時(shí)候嚴(yán)禁攪動(dòng)水樣底部的沉積物。在采集水管里的水樣之前，一定要對(duì)水龍頭消毒，其消毒的方法為：在龍頭的表面用火焰燒灼大約3～5s，然后再放水5～10min。農(nóng)村的生活用水樣的采集為蓄水池，要準(zhǔn)備一個(gè)干凈水桶，將水桶放入到儲(chǔ)水池里面幾分鐘，盡量不要采取表面水，然后把樣水灌到無(wú)菌瓶里面，要注意的是手一定不要接觸到無(wú)菌的瓶口與瓶塞。

當(dāng)取完微生物水樣后，相關(guān)人員需要把水樣送到質(zhì)檢實(shí)驗(yàn)室，采樣員需要把與水樣有關(guān)的信息匯報(bào)給實(shí)驗(yàn)室工作人員，接樣員需要編輯水樣編號(hào)。在對(duì)水質(zhì)微生物檢測(cè)之前，需要對(duì)無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行消毒處理，通常采用紫外線消毒方法。

1.2 水樣的保存達(dá)到減緩微生物繁殖的作用

采用低溫冷藏箱來(lái)保存水樣，水樣全部采集后立即送回實(shí)驗(yàn)室；在運(yùn)輸中，玻璃容器要防止破裂，須有固定措施，防止樣品容器傾倒和樣品溢出。檢測(cè)人員要對(duì)培養(yǎng)基配置和驗(yàn)證情況進(jìn)行記錄，同時(shí)也要記錄標(biāo)準(zhǔn)菌株培養(yǎng)、儲(chǔ)存和繁殖等情況，表1為培養(yǎng)基與標(biāo)準(zhǔn)菌株的指標(biāo)內(nèi)容。

表1 標(biāo)準(zhǔn)菌株觀察指標(biāo)

在水質(zhì)微生物樣品檢測(cè)過(guò)程中，檢測(cè)人員需要根據(jù)水質(zhì)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，每當(dāng)樣品檢測(cè)完之后，需要與培養(yǎng)基空白進(jìn)行對(duì)照，并要隨機(jī)抽取樣品，再做平行樣品檢測(cè)，以此來(lái)保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。為了保證水樣菌落總數(shù)的檢測(cè)質(zhì)量，首先要充分搖勻水樣，使細(xì)菌在水體中均勻分布；在稀釋水樣時(shí)，要沿著管壁謹(jǐn)慎加入，不要觸碰到管內(nèi)部的稀釋液，防止水樣被污染；把水樣注入器皿時(shí)，要從器皿的側(cè)面加入，不能把器皿蓋揭開，最后要把吸管直立放置，使其內(nèi)部水流空，并且要在器皿底部的干燥處插入吸管尖部，使其剩余液體全部排出。為了避免出現(xiàn)片狀菌落，當(dāng)把水樣加入到器皿中后，在加分鐘內(nèi)，可以向其中倒入一定量的瓊脂培養(yǎng)基，并要立即攪勻，使其完全混合。當(dāng)培養(yǎng)基凝固以后，要在幾分鐘之內(nèi)，翻轉(zhuǎn)器皿，防止菌落蔓延。

2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)的質(zhì)量控制

2.1 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制

實(shí)驗(yàn)室環(huán)境主要有無(wú)菌間、冰箱、生物安全箱等設(shè)施的衛(wèi)生整潔度和安放位置，這些因素能夠?qū)ΡO(jiān)測(cè)質(zhì)量造成影響。因而在實(shí)驗(yàn)室的管理中，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)設(shè)施進(jìn)行維護(hù)，使其處于良好狀態(tài)，并要定期對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行清理維護(hù)，校準(zhǔn)質(zhì)控。對(duì)于無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室，則要對(duì)平皿、儀器等實(shí)驗(yàn)設(shè)備進(jìn)行密封處理，在使用刻度吸管時(shí)，需要在管口處放置棉塞，防止洗耳球清潔度不夠，而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。另外，由于微生物實(shí)驗(yàn)操作性和主觀性較強(qiáng)，因而微生物實(shí)驗(yàn)操作，對(duì)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)人員提出了較高要求。檢測(cè)人員需要不斷學(xué)習(xí)，掌握專業(yè)檢測(cè)技能，熟練操作，提高檢驗(yàn)水平和處理實(shí)驗(yàn)結(jié)果異常等情況的能力。實(shí)驗(yàn)室要統(tǒng)一檢驗(yàn)方法，并要制定相關(guān)的規(guī)章制度，明確規(guī)定各級(jí)管理人員的職責(zé)與權(quán)限，加強(qiáng)對(duì)水質(zhì)監(jiān)測(cè)工作的監(jiān)管力度，確保實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果精確度。

2.2 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備控制

當(dāng)完成水質(zhì)微生物樣品檢測(cè)與培養(yǎng)，而且檢測(cè)結(jié)果確認(rèn)后，檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室就可以清洗培養(yǎng)器皿，可以對(duì)檢測(cè)后的微生物水質(zhì)樣品進(jìn)行處理，清洗采樣玻璃瓶，要對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用的器皿、吸管等實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行高溫消毒處理。并且要對(duì)使用過(guò)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行消毒，在消毒液中加入75%的酒精、5%的甲酚溶液及0.1%的新潔爾滅溶液，使用此混合溶液對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行熏蒸消毒殺菌處理，從而為下次實(shí)驗(yàn)做好準(zhǔn)備。

3 水質(zhì)微生物樣品監(jiān)測(cè)后控制

3.1 檢測(cè)菌落總數(shù)的質(zhì)量控制

在接種前應(yīng)將水樣充分搖勻，使得水中微生物均勻的分布在水中，水樣在稀釋的時(shí)候一定要沿著管壁加入，千萬(wàn)不要接觸到管里面的稀釋液，用來(lái)預(yù)防吸管尖外側(cè)的部分粘附的檢測(cè)液混入到里面，把水樣注入到器皿內(nèi)的時(shí)候，要從器皿的一側(cè)加入水樣，一定不能揭來(lái)器皿蓋，把吸管直立起來(lái)使水流空，在器皿底部干燥的地方再擦拭一下吸管并且把剩余的液體排出，千萬(wàn)不要吹出來(lái)。為了預(yù)防片狀的菌落，把水樣加入到器皿中后20min內(nèi)朝器皿里面倒入營(yíng)養(yǎng)瓊脂的培養(yǎng)基，要馬上混合均勻，等到器皿里面的瓊脂凝固之后幾分鐘內(nèi)進(jìn)行翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)，這樣可以避免菌落生長(zhǎng)。

3.2 檢測(cè)水樣大腸菌群質(zhì)量的控制

在接種之后，搖動(dòng)試管使水樣和乳糖發(fā)酵混勻，在乳糖發(fā)酵的試驗(yàn)中常常伴有少量的氣體，或者產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，有時(shí)候倒管里面雖然沒(méi)有氣體，但是，在液體表面與管壁可以看到慢慢上浮的小氣泡，在這個(gè)時(shí)候千萬(wàn)不要放棄，繼續(xù)往下做下一步證實(shí)的實(shí)驗(yàn)。若開始發(fā)酵為陽(yáng)性的話，還需要進(jìn)行革蘭染色以及繼續(xù)接種培養(yǎng)觀察。挑選出菌落數(shù)，并且與大腸菌群檢出率有著密切的關(guān)系，要挑取出典型的菌落，一般多挑選幾個(gè)預(yù)防假性陰性。

4 結(jié)束語(yǔ)

總而言之，供水安全，關(guān)乎國(guó)計(jì)民生，影響著國(guó)民經(jīng)濟(jì)建設(shè)，而水質(zhì)檢測(cè)是飲用水安全的重要保障。因而我們要對(duì)水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)有足夠重視，加強(qiáng)水質(zhì)微生物樣品的檢測(cè)與管理，嚴(yán)格控制微生物檢測(cè)質(zhì)量。

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2016-11-1