陸新浩，劉 鴻，黃建勇，吳 勇 任祖伊

(余姚市禽畜病防治研究所,浙江余姚 315400)

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寧波地區(qū)鵝源鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)

陸新浩，劉 鴻，黃建勇，吳 勇 任祖伊

(余姚市禽畜病防治研究所,浙江余姚 315400)

從患有肝周炎、心包炎、腦膜炎病變的病死浙東白鵝病料中分離到10株細(xì)菌，經(jīng)培養(yǎng)特性、形態(tài)特征觀察及生化試驗(yàn)，鑒定為鵝源鴨疫里默氏桿菌。經(jīng)對(duì)該10株細(xì)菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果表明90%鵝源鴨疫里默氏桿菌對(duì)左氟沙星、頭孢曲松、頭孢噻肟敏感，80%以上細(xì)菌對(duì)慶大霉素、阿米卡星、壯觀霉素、復(fù)合磺胺耐藥。

鴨疫里默氏桿菌；分離鑒定；藥敏試驗(yàn)；鵝

鵝疫里默氏桿菌病又稱鵝漿膜炎，是由鴨疫里默氏桿菌引起雛鵝的一種急性傳染病[1]，病鵝主要表現(xiàn)為精神沉郁，羽毛松亂，食欲不振或廢絕，縮頸、歪頭、頻頻振顫搖頭；主要病變?yōu)樾陌住⒏沃苎缀湍X膜炎。死亡率為10%～80%，高者可達(dá)90%以上。耐過(guò)鵝則生長(zhǎng)遲緩，多呈僵鵝，是造成養(yǎng)鵝業(yè)經(jīng)濟(jì)損失的主要疫病之一[2]。

長(zhǎng)期來(lái)，一直認(rèn)為鴨疫里默氏桿菌主要引起雛鴨發(fā)病，對(duì)鵝的致病力較弱。近年來(lái)，隨著養(yǎng)鵝業(yè)的快速發(fā)展，養(yǎng)殖規(guī)模、密度不斷擴(kuò)大和增加，鵝源鴨疫里默氏桿菌病的發(fā)病率有逐漸增高趨勢(shì)，給養(yǎng)鵝業(yè)帶來(lái)了重大經(jīng)濟(jì)損失。筆者從患鵝的心包炎、肝周炎和腦膜炎病料中分離鑒定到10株鵝源鴨疫里默氏桿菌，并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，以期為鵝疫里默氏桿菌病的防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 病料采集 采集病料的病鵝為寧波市及周邊地區(qū)飼養(yǎng)的浙東白鵝，患鵝主要臨床癥狀表現(xiàn)為精神沉郁，食欲不振或廢食，行動(dòng)遲緩或不愿走動(dòng)，離群獨(dú)處，張口呼吸。多數(shù)病鵝出現(xiàn)歪頸，縮頸、頭頸振顫、嘴觸地面或頻頻搖頭等神經(jīng)癥狀。部分患鵝有流淚，眼眶周圍絨毛潤(rùn)濕，排黃白色或綠色稀糞。剖檢主要病變?yōu)樾陌住⒏沃苎缀湍X膜炎，心臟、肝臟表面被覆一層淡黃色或灰白色薄膜(詳見圖1、圖2)，腦膜充血、出血(詳見圖3)。采集患鵝肝及腦等病料備用。

圖1 肝臟被覆淡黃色薄膜

圖2 心臟、肝臟被覆淡黃色薄膜

圖3 腦膜充血、出血

1.2 細(xì)菌分離 采集病死鵝肝、腦病料，分別無(wú)菌劃線接種于麥康凱和血平板上，血平板置于含5%～10%CO2的蠟燭罐中與麥康凱平板同時(shí)置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h。挑取單個(gè)菌落進(jìn)行革蘭氏染色，油鏡下觀察細(xì)菌形態(tài)，同時(shí)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行乳糖、半乳糖、果糖、蔗糖、棉子糖、葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、山梨醇、枸椽酸鹽、尿素酶、硫化氫、吲哚試驗(yàn)、過(guò)氧化氫、M-R、V-P等進(jìn)行生化鑒定試驗(yàn)。

1.3 藥敏試驗(yàn) 采用紙片法對(duì)分離菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。藥敏紙片：阿莫西林、慶大霉素、阿米卡星、壯觀霉素、強(qiáng)力霉素、左氟沙星、諾氟沙星、多粘菌素、復(fù)合磺胺、頭孢噻肟、頭孢曲松、阿奇霉素。根據(jù)藥敏試驗(yàn)抑菌環(huán)直徑判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷藥物對(duì)細(xì)菌高敏、中敏或耐藥。

2 結(jié)果與分析

2.1 細(xì)菌分離鑒定 從病鵝肝、腦組織中分離獲得10株細(xì)菌，該菌在麥康凱平板上不生長(zhǎng)，在血平板上長(zhǎng)出1 mm左右的細(xì)小菌落，菌落凸起，邊緣整齊、透明，表面光滑、有光澤，呈奶油狀，大小、形態(tài)一致(詳見圖4)。挑取單個(gè)菌落進(jìn)行革蘭氏染色，為革蘭氏陰性細(xì)小桿菌。

圖4 乳白色圓形菌落

對(duì)10株細(xì)菌進(jìn)行生化鑒定，結(jié)果一致，均不發(fā)酵試驗(yàn)中所用的乳糖、半乳糖、果糖、蔗糖、棉子糖、麥芽糖、葡萄糖等；尿素酶、過(guò)氧化氫試驗(yàn)呈陽(yáng)性，枸椽酸鹽、硫化氫、吲哚試驗(yàn)、M-R、V-P試驗(yàn)均為陰性，與鴨疫里默氏桿菌的生化特性一致。

根據(jù)病鵝的病理變化、分離菌及菌落形態(tài)、大小和生化特性，可基本確定試驗(yàn)獲得的10株細(xì)菌均為鴨疫里默氏桿菌。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 10株細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果詳見表1。結(jié)果表明鵝源鴨疫里默氏桿菌對(duì)復(fù)合磺胺、慶大霉素、阿米卡星、壯觀霉素、阿莫西林、強(qiáng)力霉素耐藥；左氟沙星、諾氟沙星、多粘菌素、頭孢噻肟、頭孢曲松、阿奇霉素高敏。其中90%細(xì)菌對(duì)左氟沙星、頭孢曲松、頭孢噻肟敏感,80%以上細(xì)菌對(duì)慶大霉素、阿米卡星、壯觀霉素、復(fù)合磺胺耐藥。

表1 10株分離細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果

3 小結(jié)與討論

鴨疫里默氏桿菌病是鴨、鵝、火雞等家禽及野禽的一種接觸性傳染病，主要引起1-5周齡雛鴨發(fā)病[3]，其他家禽發(fā)病較少。近年來(lái)由于浙東白鵝的養(yǎng)殖量急劇增加、規(guī)模不斷擴(kuò)大、許多養(yǎng)殖戶采用鴨鵝混養(yǎng)，致使浙東地區(qū)鵝源鴨疫里默氏桿菌病的發(fā)病率急劇增加。試驗(yàn)采用蠟燭罐培養(yǎng)法對(duì)疑似病料進(jìn)行細(xì)菌分離，確證試驗(yàn)獲得的10株細(xì)菌均為鴨疫里默氏桿菌。

蔡秀磊等(2007)[4]曾對(duì)浙江省分離的22株鴨疫里默氏桿菌進(jìn)行耐藥性研究，結(jié)果顯示細(xì)菌對(duì)丁胺卡那、慶大霉素的耐藥性分別為95.5%、81.8%，與本試驗(yàn)中鵝源鴨疫里默氏桿菌對(duì)慶大霉素、阿米卡星的耐藥性分別為90%、80%的結(jié)果基本一致。近年來(lái)，由于抗生素的廣泛使用，鴨疫里默氏桿菌的耐藥性不斷增強(qiáng)，發(fā)病率不斷增加，防治越來(lái)越困難。為有效防控鴨疫里默氏桿菌病，對(duì)發(fā)病鵝場(chǎng)最好進(jìn)行細(xì)菌分離、藥敏試驗(yàn)，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果選擇敏感藥物，制定科學(xué)的給藥方案進(jìn)行有效防控。

[1]Saif YM主編. 禽病學(xué)[M]. 第11版. 蘇敬良，高福，索勛主譯. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2005,768-770.

[2]王永坤，莊國(guó)宏，周繼宏，等.雛鵝感染鴨疫里默氏桿菌的分離及鑒定[J].中國(guó)禽業(yè)導(dǎo)刊，2001，18(21)：31.

[3]宋紅芹.錢忠明.鴨疫里默氏桿菌病及其防治技術(shù)的研究進(jìn)展[J].家禽科學(xué)，2005(3)：42.

[4]蔡秀磊，韋強(qiáng)，崔言順，等.浙江省22株鴨疫里默氏桿菌的血清型鑒定及耐藥性研究[J].浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2007,19(1)：46-49.

2016-12-08

S858.33

A

1005-7307(2016)06-0003-002