劉玲玲,薛 梟,夏 薇,陳顯秋*

(1.吉林大學(xué)第一醫(yī)院 檢驗科，吉林 長春130021;2.北華大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)院，吉林 吉林132013)

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*通訊作者

不成熟血小板部分在免疫性血小板減少性紫癜診斷和治療中的應(yīng)用價值

劉玲玲1,薛 梟2,夏 薇2,陳顯秋1*

(1.吉林大學(xué)第一醫(yī)院 檢驗科，吉林 長春130021;2.北華大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)院，吉林 吉林132013)

免疫性血小板減少性紫癜(Immune Thrombocytopenic Purpura ,ITP)是一組免疫介導(dǎo)的血小板過度破壞所致的出血性疾病。在外周血血小板破壞增多時，患者骨髓中巨核細胞反應(yīng)性增生，向外周血中釋放大量含有mRNA和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，具有合成少量蛋白質(zhì)的能力的不成熟血小板，曾被命名為網(wǎng)織血小板[1]，現(xiàn)在被稱為不成熟血小板部分(Immature Platelet Fraction，IPF)。不成熟血小板部分是由骨髓巨核細胞合成釋放入外周血循環(huán)的、富含RNA、呈網(wǎng)狀分布、體積更大的血小板，在血小板計數(shù)中占有一定的比例，對于分析血小板生成動力學(xué)及血小板減少機制有著重要意義。

1 資料與方法

1.1 正常對照組

選擇2014.01在吉林大學(xué)第一醫(yī)院體檢的50例健康人靜脈血為正常對照組。正常對照組滿足無吸煙飲酒等不良嗜好，無明顯心、肝、腎等重要臟器疾病，無血液系統(tǒng)疾病、糖尿病及其他內(nèi)分泌疾病。

1.2 實驗組

選擇2014.01-2014.06在吉林大學(xué)第一醫(yī)院腫瘤中心住院被診斷為ITP的初治患者35例，其中男性15例，女性20例；PLT<20×109/L的患者26例，PLT>20×109/L的患者9例；其診斷通過骨髓細胞學(xué)檢查確認，符合2008年修訂的《血液病診斷及療效標準》(第3版)中對ITP的診斷標準。在其治療過程中監(jiān)測不成熟血小板百分比及血小板計數(shù)的變化情況，連續(xù)10日每日檢測1次，每位實驗對象可得到2個參數(shù)共20個檢測結(jié)果，對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析，比較各個檢測參數(shù)的變化及規(guī)律。

1.3 實驗內(nèi)容與方法

1.3.1 儀器與試劑

日本SYSMEX公司生產(chǎn)全自動血細胞分析儀XE-5000；SYSMEX配套稀釋液、網(wǎng)織紅細胞稀釋液、網(wǎng)織紅細胞染液、鞘液；SYSMEX 5C定值低、中、高三水平質(zhì)控品。

1.3.2 實驗方法

標本收集：晨起空腹、平靜狀態(tài)下，抽取靜脈血2 ml于EDTA-K2 抗凝的試管中,所有標本充分混勻后，2 h內(nèi)測定完畢。

1.3.3 統(tǒng)計學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)使用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，分別進行兩組獨立樣本的t檢驗，以P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義；重復(fù)測定數(shù)據(jù)進行重復(fù)測定的方差分析，以P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組別不成熟血小板百分比(IPF%)比較 見表1、圖1。

表1 不同組別IPF%檢測結(jié)果

2.2 ITP患者治療過程中IPF%、PLT變化情況比較 在治療過程中，IPF%逐漸下降，在第5天下降至正常；PLT逐漸上升，在第6天上升至正常，見圖2。

注：圖中點為疑似離群值，3、9代表離群值在各列所在位置，已剔除。

圖1 不同組別IPF%檢測結(jié)果

圖2 兩組ITP患者治療過程中IPF%和PLT變化情況

3 討論

3.1 不成熟血小板檢測在ITP診斷中的應(yīng)用

ITP患者血小板減少僅是由于外周血血小板破壞增加，而骨髓增生活躍，巨核細胞不少，是成熟障礙引起的血小板減少。本研究顯示，不同嚴重程度ITP患者IPF%(輕度14.85%±10.69,重度28.90%±11.30)較正常對照組(1.60%±0.99)明顯增高(P<0.05)，與Yasunori Abe等[2]、Briggs等[3]、孫德華等[4]的研究一致，進一步說明了IPF%在ITP中的診斷價值和提示出血嚴重程度中的作用。血小板減少時體內(nèi)TPO含量增加，TPO與其受體c.Mpl結(jié)合，激活一系列信號通路，包括JAK/STAT、Ras/MAKP、P13K/Akt等，促進巨核細胞成熟，調(diào)節(jié)巨核細胞增殖、分化，產(chǎn)生新的血小板(不成熟血小板)釋放入血[5]，而使得外周血中IPF%升高，這些可能是導(dǎo)致ITP患者外周血IPF%增高的主要原因。這一研究結(jié)果提示我們，對于臨床表現(xiàn)明顯、有骨髓穿刺禁忌癥的患者，可以通過檢測網(wǎng)織血小板作為ITP診斷的依據(jù)之一[3]。

3.2 不成熟血小板檢測在判斷ITP患者嚴重程度中的應(yīng)用 ITP的臨床表現(xiàn)以出血為主，而出血的嚴重程度與血小板破壞程度明顯相關(guān)，血小板<20×109/L時可并發(fā)內(nèi)臟出血、顱內(nèi)出血等而引起死亡[6]，故臨床將血小板<20×109/L作為輸血的指征。但臨床觀察提示，ITP患者的出血程度與血小板計數(shù)并不完全一致，對于血小板<20×109/L的患者，是否進行輸血治療也存在爭議，若能找到比血小板計數(shù)更能反映出血的臨床指標，將對ITP臨床治療具有十分重要的意義。統(tǒng)計結(jié)果顯示，PLT

<20×109/L患者的RP%(28.90%±11.30)高于PLT>20×109/L患者的RP%(14.85%±10.69)，說明外周血血小板破壞越嚴重，釋放至外周血中的IPF%越高，通過檢測外周血IPF%，可有助于臨床判斷ITP的嚴重程度，為進一步的治療提供依據(jù)，避免對患者進行不必要的血小板輸注。

3.3 不成熟血小板檢測在ITP患者治療中的應(yīng)用 ITP患者首先采用激素沖擊治療，嚴重者使用大劑量免疫球蛋白，輸注血小板懸液或血漿置換。本研究顯示，IPF%與血小板計數(shù)有良好的負相關(guān)性。ITP患者治療前，IPF%明顯增高，血小板計數(shù)明顯降低；隨著ITP的有效治療，IPF%明顯下降，血小板計數(shù)明顯升高，見圖2。但IPF%與血小板計數(shù)在ITP治療期間的變化情況卻有所不同，通過對ITP患者治療過程的監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，IPF%在治療早期即治療后第五天出現(xiàn)明顯變化，而血小板計數(shù)在第六天出現(xiàn)明顯變化，IPF %比血小板計數(shù)能更早的反映出治療效果，見圖2。說明IPF%可更早提示臨床治療有效，有助于臨床根據(jù)治療效果進行后續(xù)治療。但由于本次研究的實驗對象較少，網(wǎng)織血小板是否可以作為ITP患者治療效果的監(jiān)測指標還有待進一步研究。

[1]Ingram,M.& Coopersmith,A.Reticulated platelets following acute blood loss[J].British Journal of Haematology，1969,17:225.

[2]Yasunori Abe ,Hideo Wada，et al.A simple technique to determine thrombopoiesis level using immature platelet fraction (RP%)[J].Thrombosis Research，2006,118:463.

[3]Briggs C,Kunka S,Hart D,et al.Machin SJ.Assessment of an immature platelet fraction (RP%) in peripheral thrombocytopenia[J].British Journal of Haematol，2004,126:93.

[4]孫德華，裘宇容.網(wǎng)織血小板檢測在血液系統(tǒng)疾病診斷中的初步應(yīng)用[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2008,6(8):581.

[5]Begley CG,Basser RL.Biologicand structural differences ofthrombo-poietic growthfactors[J]．J SeminHematol，2000，37(2 suppl 4)：19．

[6]鄧家棟.血液病學(xué)[M]．第3版．北京：人民衛(wèi)生出版社,2002,1317-1321.

1007-4287(2016)11-1900-02

2016-01-14)