呂玉霞 王萍 趙麗麗

【摘要】目的：研究蟲草素對果蠅壽命的影響，評價(jià)其抗衰老作用；方法：將300只剛羽化黑腹果蠅隨機(jī)分為五組，分別在添加了濃度為0、0.1、0.4、0.7、1.0 mg/kg蟲草素的基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)，每小時(shí)進(jìn)行觀察統(tǒng)計(jì)，計(jì)算每組果蠅的半數(shù)死亡天數(shù)、平均壽命和平均最高壽命；結(jié)果：實(shí)驗(yàn)三組（培養(yǎng)基中添加0.7mg/kg蟲草素）與對照組相比，蟲草素對雄性果蠅壽命延長作用非常顯著（P<0.01），對雌性果蠅壽命延長作用亦顯著（P<0.05）；結(jié)論：說明蟲草素具有一定的延緩衰老的作用，是冬蟲夏草抗衰老的主要成分之一。

【關(guān)鍵詞】蟲草素；果蠅；壽命

【中圖分類號(hào)】R-0 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801（2016）05-01290132-02

蟲草素是冬蟲夏草中的活性成分，大量文獻(xiàn)研究顯示它具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗菌和抗病毒、抗白血病等作用，但對其抗衰老作用方面的研究較少[1]。

因此，本課題對蟲草素對黑腹果蠅（文中均簡稱果蠅）壽命的影響進(jìn)行了研究，以期能夠在宏觀角度上證明蟲草素具有抗衰老作用，為進(jìn)一步明確冬蟲夏草抗衰老作用的機(jī)制并更好地開發(fā)利用冬蟲夏草提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 儀器設(shè)備及物料

鑷子、剪刀等實(shí)驗(yàn)耗材；175mL果蠅培養(yǎng)瓶；容量瓶；分析天平；玉米粉、紅糖、瓊脂、丙酸、酵母粉等果蠅基礎(chǔ)培養(yǎng)基成分。

1.1.2 研究對象

（1）果蠅 選取羽化時(shí)間在1h內(nèi)的果蠅300只，其中雌雄各150只。

（2）蟲草素 純度≥95%的蟲草素。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)基的制備

按照水1000mL、玉米粉105g、紅糖75g、瓊脂7.5g、丙酸6.25ml、酵母粉20g的比例，并加入相應(yīng)濃度的蟲草素，按照常規(guī)方法制備果蠅標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基。

1.2.2 果蠅的培養(yǎng)

將300只果蠅隨機(jī)分為五組，每組3瓶，每瓶雌雄各10只；五個(gè)組分別標(biāo)記為對照組、實(shí)驗(yàn)一組、實(shí)驗(yàn)二組、實(shí)驗(yàn)三組、實(shí)驗(yàn)四組，并分別給予添加了濃度為0、0.1、0.4、0.7、1.0 mg/kg蟲草素的果蠅培養(yǎng)基，每瓶厚2.5cm；每2天更換1次培養(yǎng)基，且每次更換的培養(yǎng)基保證為同一批次配制。每小時(shí)定時(shí)觀察統(tǒng)計(jì)果蠅死亡數(shù)目，直至全部死亡。

統(tǒng)計(jì)每組果蠅的半數(shù)死亡天數(shù)、平均壽命和平均最高壽命三個(gè)指標(biāo)，每組果蠅死亡天數(shù)的算術(shù)平均值為該組的平均壽命；每組果蠅中每瓶最高壽命的平均數(shù)為平均最高壽命。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)用x±s表示，采用SPSS19.0軟件進(jìn)行分析，組間對比用卡方檢驗(yàn)，P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

對照組雌雄果蠅的平均體重分別為831μg，632μg；半數(shù)死亡時(shí)間分別為496h，319h；平均壽命分別為514.72±8.97h，348.07±7.47h；平均最高壽命分別為556.84±7.65h，451.44±3.17h；而實(shí)驗(yàn)一組的上述指標(biāo)分別為820μg ，624μg ；400h，336 h； 494.88±9.54 h，351.84±8.85 h；568.96±3.57 h，464.32±3.54 h；實(shí)驗(yàn)二組分別為816 μg，658 μg；416h，384h；545.52±8.12h，358.88±7.39h；565.32±4.66h，458.56±1.65h；實(shí)驗(yàn)三組分別為837μg，639μg；512h，392h；617.84±10.01h *，366.56±6.82h **；563.76±1.68 h，463.84±5.61h；而實(shí)驗(yàn)四組分別為829μg，625μg ；520h，384h；596.88±9.43h，352.72±7.04h；564.40±3.83h，450.64±6.44h。

其中，**表示雄性果蠅實(shí)驗(yàn)三組與對照組相比壽命明顯延長，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著（P<0.01）；*表示雄性果蠅實(shí)驗(yàn)三組與對照組相比壽命延長，統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)差異顯著（P<0.05）。

由以上數(shù)據(jù)結(jié)果可知，實(shí)驗(yàn)三組（培養(yǎng)基中添加0.7mg/kg蟲草素）與對照組相比，蟲草素對雄性果蠅壽命延長作用非常顯著（P<0.01），對雌性果蠅壽命延長作用亦顯著（P<0.05）；因此，蟲草素具有延長果蠅壽命的作用，并且對雄果蠅的作用強(qiáng)于雌果蠅。

另外，從“平均壽命”這項(xiàng)指標(biāo)來看，培養(yǎng)基中添加蟲草素的四組均比空白對照組高，也可以從側(cè)面說明蟲草素能夠延長果蠅的生存期。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果表明，蟲草素能夠延長果蠅的壽命，且對雄果蠅的作用強(qiáng)于雌果蠅，一定程度上說明，蟲草素具有抗衰老作用。

4 討論

進(jìn)行動(dòng)物生存期實(shí)驗(yàn)是判斷某種物質(zhì)是否具有抗衰老作用的最簡單有效的方法，而果蠅是生物學(xué)等學(xué)科研究中的模式生物，生命周期短，且長期的研究已證實(shí)超過60%的人類疾病基因在果蠅的基因組中有直系同源物[2，3]。因此，以果蠅為樣本，能夠回答生命科學(xué)研究中最基本的生物學(xué)問題，本課題以果蠅為模式生物佐證蟲草素對人體抗衰老作用的影響，有一定的科學(xué)性，可作為對蟲草素進(jìn)一步研究的理論及實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

但本研究僅從“生存期”這一項(xiàng)宏觀指標(biāo)進(jìn)行了研究，為了取得更加充分的證據(jù)，本課題將進(jìn)一步從分子生物學(xué)的角度進(jìn)行研究，例如對比添加蟲草素培養(yǎng)的果蠅與空白組果蠅體內(nèi)的超氧化物歧化酶（SOD）活性、過氧化氫酶（CAT）活性以及丙二醛（MDA）含量。從而進(jìn)一步確證蟲草素的抗衰老作用，為研究冬蟲夏草提供理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]李盡哲，黃雅琴，等.蟲草素對果蠅生長發(fā)育和壽命的影響[J].食用菌學(xué)報(bào)，2016， 23 （1）： 10-11.

[2]劉帥，楊小蘭，張曉云.長山藥粗多糖對果蠅抗衰老作用的研究[J].食品工業(yè)科技，2013， 34（14）：339-341.