駱大鵬，劉慶明，邱名毅，趙志英，周海珠

(海南省海洋與漁業(yè)科學(xué)院，海南?？?570100)

?

三斑海馬的馴化與苗種培育研究

駱大鵬，劉慶明，邱名毅，趙志英，周海珠

(海南省海洋與漁業(yè)科學(xué)院，海南?？?570100)

[目的]通過對(duì)三斑海馬的馴化與苗種培育試驗(yàn)，豐富三斑海馬的生物學(xué)基礎(chǔ)資料。[方法]從海南本地收集三斑海馬親本，開展人工馴化和苗種培育，并探索其繁殖生物學(xué)行為。[結(jié)果]親魚馴化成活率達(dá)到85%，獲得三斑海馬初孵幼苗2.9萬尾，培育1月齡魚苗1.1萬尾，海馬最適開口餌料為“小球藻+輪蟲+橈足類幼體”。三斑海馬親魚抱卵量和孵化量存在個(gè)體差異，親魚抱卵量最少350粒/尾，最多1 020粒/尾，平均660粒/尾。親魚孵化量最少220尾，最多720尾，平均580尾。[結(jié)論]該研究結(jié)果可為海馬的苗種繁育和人工養(yǎng)殖提供科學(xué)依據(jù)。

三斑海馬；人工馴化；苗種培育；開口餌料

三斑海馬(HippocampustrimaculatusLeach)，俗名“龍落子”，隸屬海龍目(Syngnathitormes)海龍科(Syngnathidac)海馬屬(Hippocampus)，是小型海洋魚類，因頭與軀干成直角，形似馬頭，且體側(cè)背方第1、4、7節(jié)各具一大黑斑而得名。三斑海馬主要分布于我國(guó)東海、南海以及東非沿海和印度洋地區(qū)，屬于國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物[1]。由于海馬具有較高的藥用價(jià)值和觀賞價(jià)值，人們對(duì)海馬的需求量逐漸增加，然而，由于對(duì)野生海馬的過度捕撈，造成自然資源日益減少。據(jù)估計(jì)，該物種在我國(guó)過去10年內(nèi)逐年減少，種群數(shù)至少減少50%。

目前，對(duì)海馬的繁殖生物學(xué)研究主要集中在大海馬、灰海馬、刺海馬等品種[2-5]。為了科學(xué)合理地保護(hù)和開發(fā)優(yōu)質(zhì)野生海馬資源，筆者開展了三斑海馬的馴化養(yǎng)殖和苗種培育試驗(yàn)，以期豐富三斑海馬的生物學(xué)基礎(chǔ)資料，并為海馬的苗種繁育和工養(yǎng)殖提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 親魚馴化 試驗(yàn)所用三斑海馬來源于海南島近海，暫養(yǎng)于海南省文昌市清瀾港，于2016年4—5月分批轉(zhuǎn)移至海南海研熱帶海水魚類良種場(chǎng)開展馴化養(yǎng)殖。共采集海馬100尾，體長(zhǎng)12～15 cm，體重8～15 g。

采用室內(nèi)玻璃缸循環(huán)水養(yǎng)殖三斑海馬。玻璃缸規(guī)格為1.2 m(長(zhǎng))×0.8 m(寬)×0.6 m(高)，缸底投放人工海草作為附著物，模擬自然海區(qū)的環(huán)境，投喂大豐年蟲(體長(zhǎng)約1.0 cm)、凡納濱對(duì)蝦苗(體長(zhǎng)0.8～1.0 cm)、冰凍毛蝦(體長(zhǎng)1.0 cm)等作為餌料，每天投喂2次(09：00和15：00)；投喂前清理排泄物、食物殘?jiān)八劳鰝€(gè)體，采用流水養(yǎng)殖，馴化水溫26～27 ℃，海水鹽度為33‰～35‰，連續(xù)充氣，溶解氧保持在5 mg/L以上，pH保持在7.8～8.2。

1.2 苗種繁育

1.2.1 育苗管理。每天觀察雄魚的發(fā)育情況，并挑選臨產(chǎn)雄魚，放入產(chǎn)苗池流水養(yǎng)殖，每個(gè)池放養(yǎng)25～30尾，產(chǎn)苗池規(guī)格為1.0 m(長(zhǎng))×1.0 m(寬)×0.8 m(高)，出水口安裝60目篩絹網(wǎng)。臨產(chǎn)的親魚攝食量少，投喂少量的南美白對(duì)蝦苗。三斑海馬一般在晚上孵出幼苗，因此每天20：00以后應(yīng)停止流水，防止孵化出的海馬幼苗流失。產(chǎn)苗后的親魚移回親魚池繼續(xù)培育，初孵幼苗需及時(shí)打撈，放入育苗池培育。

三斑海馬苗種培育在室內(nèi)進(jìn)行，苗種培育的水泥池規(guī)格為5.0 m×4.0 m×1.0 m，水深0.8 m，水溫為26～27 ℃，海水鹽度為33‰～35‰，pH保持在7.8～8.2，池中少量充氣，水泥池中添加適量小球藻。初孵幼苗密度約為1 000尾/m3，微流水，日換水量約占總水量的25%，每天投喂活餌2次，總投喂量以當(dāng)天略有剩余為準(zhǔn)，7 d后逐漸加大換水量，換水量100%，18～20 d池中放尼龍繩等供苗棲息。

苗種培育期間，每天虹吸池底殘餌和糞便2次，保持水質(zhì)良好，光照強(qiáng)度 2 000 lx，光照周期為12 L∶12 D，避免強(qiáng)光直射，以防止浮游藻類的大量繁殖，并保持水體充足的溶解氧。初孵幼苗比較脆弱，操作要小心，避免因機(jī)械損傷而發(fā)生死亡。

1.2.2 親魚抱卵量與孵化量觀察。 解剖部分死亡的受孕雄海馬，觀察胚胎發(fā)育情況，并計(jì)數(shù)抱卵量；隨機(jī)選擇臨產(chǎn)海馬放在300 L的孵化桶內(nèi)，每個(gè)孵化桶放1尾臨產(chǎn)海馬，觀察海馬幼苗的孵化情況。

1.2.3 幼苗開口餌料試驗(yàn)。選擇初孵海馬幼苗(全長(zhǎng)0.8～1.0 cm)800尾，放入4個(gè)相同規(guī)格的試驗(yàn)水泥池，分別編號(hào)為1#、2#、3#、4#，每個(gè)水泥池投放200尾，水泥池規(guī)格為1.0 m(長(zhǎng))×1.0 m(寬)×0.8 m(高)，試驗(yàn)期7 d。在1#、2#、3#、4#試驗(yàn)池分別投喂以下開口餌料：小球藻+輪蟲、小球藻+橈足類幼體、小球藻+豐年蟲幼體、小球藻+輪蟲+橈足類幼體，餌料投喂密度約為20個(gè)/mL，養(yǎng)殖期間微流水，每天觀察海馬的攝食情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 親魚馴化 剛?cè)氤氐暮ｑR能夠自然地將尾部纏繞在人工海草上，攝食量很小，不食用冰凍餌料，能夠捕食少量鮮活餌料(如活體蝦苗或大豐年蟲)，活動(dòng)量少，從第2天開始海馬開始增大攝食量，以攝食蝦苗為主。養(yǎng)殖初期，部分海馬由于尾部受傷，發(fā)生細(xì)菌感染，經(jīng)高錳酸鉀或聚維酮碘溶液消毒后，仍效果不佳，在后續(xù)養(yǎng)殖過程中死亡，經(jīng)過30 d的養(yǎng)殖，成活率達(dá)到85%。

受孕的雄海馬育兒囊膨大，在以后的發(fā)育中顏色逐漸加深，臨產(chǎn)時(shí)膨脹至最大，呈橢球形。臨產(chǎn)的海馬活動(dòng)量少，基本不攝食；待產(chǎn)完后，育兒囊縮小，親魚開始正常攝食。經(jīng)觀察，三斑海馬親魚在夜里產(chǎn)苗，主要集中在22：00至次日06：00。

2.2 海馬苗種培育 初孵幼苗體長(zhǎng)0.8～1.0 cm，尾部細(xì)長(zhǎng)，不能平行游動(dòng)，只能靠身體彎曲活動(dòng)。部分體色略黑，活動(dòng)力較強(qiáng)，能夠在水體中上層游動(dòng)；部分呈灰色或淡黃色，尾部短小，活動(dòng)力較弱，只能在水面游動(dòng)。在后續(xù)培育過程中，海馬幼苗體色逐漸變黑，尾部逐漸變粗，游泳能力明顯增強(qiáng)，部分體質(zhì)較弱的幼苗攝食量少，由于不能適應(yīng)環(huán)境而死亡，呈彎曲狀，浮于水面，隨著時(shí)間的推移，最后沉于池底。此次試驗(yàn)共孵化出海馬幼苗2.9萬尾，培育1月齡以上海馬1.1萬尾，成活率達(dá)到38%(表1)。

表1 三斑海馬育苗情況

2.3 海馬抱卵量與孵化量 由于種種原因，該試驗(yàn)中部分受孕海馬死亡，對(duì)8尾死亡的受孕雄海馬8尾進(jìn)行解剖，并計(jì)數(shù)抱卵量。因個(gè)體差異，雄海馬抱卵量差異較大，最少350粒/尾，最多1 020粒/尾，平均660粒/尾。

受孕中期的雄海馬育兒囊內(nèi)的胚胎呈圓形或橢圓形，粉紅色，器官分化不明顯；臨產(chǎn)期的雄海馬育兒囊內(nèi)的胚胎已經(jīng)發(fā)育成熟，器官完全分化，已經(jīng)脫膜出來，具有初孵海馬的形態(tài)特征，呈彎曲狀，灰色。

對(duì)10尾雄海馬的孵化量進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)不同個(gè)體的孵化量差異較大，最少220尾，最多720尾，平均約580尾，初孵幼苗大多數(shù)可從池底游到水體中上層，部分幼苗活力差，孵出就死亡，沉于水底。

2.4 海馬幼苗開口餌料試驗(yàn) 投喂不同的開口餌料對(duì)海馬幼苗的存活率影響很大。投喂“單胞藻+豐年蟲幼體”組，7日齡幼苗成活率最低，海馬幼苗基本不攝食豐年蟲幼體，最后死亡；投喂“小球藻+輪蟲+橈足類幼體”組，7日齡幼苗成活率最高，達(dá)到92%(表2)。

3 討論與結(jié)論

3.1 海馬餌料 在人工養(yǎng)殖條件下，幼海馬主要攝食鮮活餌料，且具有一定的選擇能力，開口攝食期主要攝食如單細(xì)胞藻類、輪蟲和橈足類無節(jié)幼體，然后逐漸開始攝食枝角類、橈足類等[6-8]，只要有適宜餌料和適合的水環(huán)境，海馬生長(zhǎng)速度就很快。該試驗(yàn)結(jié)果表明，幼海馬開口期投喂輪蟲無節(jié)幼體、橈足類無節(jié)幼體，再加入適當(dāng)單胞藻，有利于提高海馬苗的成活率和生長(zhǎng)速度；反之，若投喂單一餌料，不利于海馬生長(zhǎng)，部分海馬甚至不開口攝食而死亡。

表2 三斑海馬幼苗開口餌料試驗(yàn)

Table 2 The experiments of initial baits ofH.trimaculatusLeach fries

池號(hào)PondNo.投喂餌料種類Typesofinitialbaits投放數(shù)量Totalamount尾7日齡數(shù)量Amountof7-day-oldH.trimaculatusLeach∥尾成活率Survivalrate%1#小球藻+輪蟲20050252#小球藻+橈足類幼體200156783#小球藻+豐年蟲幼體200004#小球藻+輪蟲+橈足類幼體20018492合計(jì)Total80034643

這可能是因?yàn)椴煌瑐€(gè)體對(duì)不同餌料具有選擇性，且不同餌料能為幼海馬的生長(zhǎng)提供不同的營(yíng)養(yǎng)。研究表明，孵化24 h內(nèi)鹵蟲無節(jié)幼體約719.2 μm[9]、橈足類幼體約80～350 μm、輪蟲100～300 μm，而1～4 日齡的三斑海馬幼魚口徑為0.527 5～0.802 5 mm，可以吞食輪蟲、橈足類無節(jié)幼體[10]，鹵蟲無節(jié)幼體太大，不利于攝食。雖然輪蟲和橈足類幼體大小差異不大，都可以作為海馬開口餌料，但橈足類營(yíng)養(yǎng)十分全面，含有豐富的不飽和脂肪酸、蛋白質(zhì)、抗氧化劑、蝦青素、維生素C和維生素E[11]。鹵蟲和輪蟲的n-3HUFA含量相對(duì)較低[12-16]。橈足類的HUFA主要由小分子極性脂質(zhì)組成，更利于消化吸收[17-18]。為幼海馬提供充足的橈足類幼體是海馬養(yǎng)殖成敗的關(guān)鍵。

在養(yǎng)殖中后期，海馬可以攝食糠蝦、豐年蝦、對(duì)蝦苗等鮮活餌料，也可以投喂冰凍餌料(如冰凍糠蝦、冰凍毛蝦等)。寧卓等[9]研究發(fā)現(xiàn)，相對(duì)于冷凍糠蝦，鮮活糠蝦能夠更好地滿足海馬親魚的營(yíng)養(yǎng)需求，提高子代的生長(zhǎng)性能和成活率。該研究結(jié)果表明，長(zhǎng)期投喂冰凍毛蝦或單一豐年蝦，海馬攝食率明顯降低，體質(zhì)減弱，發(fā)病率高；投喂鮮活蝦苗，可以明顯提高海馬活力和存活率，并促進(jìn)生長(zhǎng)，這可能是由于冰凍餌料的營(yíng)養(yǎng)不能滿足海馬生長(zhǎng)的需要，且攜帶一些致病菌，導(dǎo)致水質(zhì)變化或直接感染海馬。

鮮活餌料的供給是海馬養(yǎng)殖過程中的關(guān)鍵。不同生長(zhǎng)時(shí)期需要不同的餌料，在自然海區(qū)海馬的攝食餌料種類眾多，然而能大規(guī)模人工培養(yǎng)的種類只有部分橈足類、枝角類、部分蝦苗等，且生產(chǎn)成本高。迄今為止尚未找到合適的人工餌料可以代替鮮活餌料，這一直抑制著海馬產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展。

3.2 海馬親魚抱卵量與孵化量 杜慶紅等[2]研究表明不同年齡的海馬繁殖力差異較大，其中2齡的親本繁殖量最大，平均產(chǎn)量在600尾以上。該研究表明三斑海馬親魚繁殖量為220～720尾，除了年齡因素外，這可能與受精率有關(guān)，受精率越高，苗種孵化量越大；反之，受精率越低，苗種孵化量越小。

親魚抱卵量是海馬繁殖力最直接的體現(xiàn)，然而，尚未見到國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)海馬抱卵量進(jìn)行研究。筆者對(duì)三斑海馬抱卵親魚進(jìn)行解剖與觀察，其抱卵量為350～1 020粒，不同個(gè)體差異很大，接近臨產(chǎn)期抱卵量有減少的趨勢(shì)。由此可見，三斑海馬親魚的抱卵量與孵化量存在一定差異，這可能與餌料和環(huán)境等因素有關(guān)，餌料不足，或者環(huán)境差，影響其胚胎發(fā)育，再加上海馬抱卵量越大，胚胎之間的競(jìng)爭(zhēng)也越大，部分胚胎由于未獲得充足的營(yíng)養(yǎng)而發(fā)育緩慢或停止發(fā)育，然后發(fā)生凋亡，這直接影響到海馬幼苗的孵化量。

3.3 海馬疾病 海馬的應(yīng)激性較差，在季節(jié)轉(zhuǎn)換時(shí)和雨天容易發(fā)生死亡，特別是在臺(tái)風(fēng)季節(jié)，水質(zhì)變化大，海馬死亡率高。筆者在2014年和2015年的試驗(yàn)中遭遇臺(tái)風(fēng)天氣，海水鹽度急劇下降，海馬死亡率高，這可能與物種免疫力有關(guān)。

三斑海馬養(yǎng)殖過程中，容易發(fā)生爛尾病和腸炎病，經(jīng)過隔離治療后效果不佳，大部分三斑海馬最后死亡。盛軍慶[10]從患病海馬體內(nèi)分離到菌株，并鑒定為副溶血弧菌。為了減少損失，在三斑海馬養(yǎng)殖過程中應(yīng)加強(qiáng)水質(zhì)調(diào)控和餌料強(qiáng)化，并做好預(yù)防工作。

[1] 中華人民共和國(guó)瀕危物種科學(xué)委員會(huì)．海馬屬，包括冠海馬、刺海馬、日本海馬、克氏海馬、管海馬和三斑海馬[EB/OL]．[2016-07-03].http：//www.cites.org.cn/database/?action=item&cid=115.

[2] 杜慶紅，陳栩，朱長(zhǎng)壽，等.大海馬人工繁殖和育苗技術(shù)研究[J].臺(tái)灣海峽，2004，23(2)：186-191.

[3] 王韓信，劉曉東，張東，等.灰海馬人工繁殖技術(shù)初探[J].水產(chǎn)科技情報(bào)，2011，38(2)：59-65.

[4] 戴廣譜.環(huán)境因素對(duì)大海馬的繁殖行為及其幼體生長(zhǎng)的影響[D].寧波：寧波大學(xué)，2012.

[5] 楊愛國(guó).刺海馬的人工繁殖[J].齊魯漁業(yè)，2009，26(6)：40-41.

[6] 魏祥東，葉長(zhǎng)明，陳東紅.餌料對(duì)幼海馬生長(zhǎng)的影響[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2003(3)：60-63.

[7] 白雪峰.海馬開口餌料的選擇與培養(yǎng)[D].煙臺(tái)：魯東大學(xué)，2014.

[8] 呂軍儀，吳金英，楊大偉，等.大海馬在人工養(yǎng)殖條件下的生長(zhǎng)速率[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2001，8(1)：59-63.

[9] 寧卓，張波.不同品系鹵蟲無節(jié)幼體的生物學(xué)特征[J].鹽業(yè)與化工，2006，36(1)：30-32.

[10] 盛軍慶.三斑海馬(HippocampustrimaculatusLeach，1814)幼海馬養(yǎng)殖生態(tài)研究[D].廣州：中山大學(xué)，2006.

[11] VAN DER MEEREN T.Analysis of biochemical components in copepods for evaluation of feed quality for juvenile production of marine fish[J].Prosjektrapportnr，2003，5：1-24.

[12] WATANABE T，KITAJIMA C S.Nutritional values of live feed organisms used in Japan for mass propagation of fish：A review[J].Aquaculture，1983，34：115-143.

[13] LEGER P，BENGTSON D A，SIMPSON K L，et al.The use and nutritional value of Anemia as a food source[J].Oceanography marine biology annual review，1986，24：521-623.

[14] OLSEN Y，REITAN K L，UADSTEIN O.Dependence of temperature on loss rates of rotifers lipids and ω3 fatty acids in starvedBrachionuspficatiliscultures[J]. Hydrobiologia， 1993，255(256)：13-20.

[15] RAINUZZO J R，REITAN K L，OLSEN Y.Effect of short and long term lipid enrichment on total lipids，lipid class and fatty acid composition in rotifers[J].Aquaculture International，1994，2(1)：19-23.

[16] EVJEMO J O，COUTTEAU P，OLSEN Y，et al.The stability of docosahexaenoic acid in two Artemia species following enrichment and subsequent starvation[J]. Aquaculture，1997，155：135-137.

[17] BELL J G，MCEVOY L A，ESTEVEZ A，et al.Optimizing lipid nutrition in first feeding flatfish larvae[J].Aquaculture，2003，227：211-220.

[18] MCKINNON A D，DUGGAN S，NICHOLS P D，et al.The potential of tropical paracalanid copepods as live feeds in aquaculture[J].Aquaculture，2003，223：89-106.

[19] 王韓信，劉曉東，張東，等.冷凍和鮮活糠蝦對(duì)灰海馬繁殖力的影響[J].水產(chǎn)科技情報(bào)，2012，39(1)：6-9.

[20] 楊弘詣，楊為東，趙文，等.海馬病原菌的分離鑒定及其對(duì)抗生素敏感性的研究[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，21(2)：131-133.

Study on Artificial Domestication and Seedling Cultivation ofHippocampustrimaculatus

LUO Da-peng, LIU Qing-ming，QIU Ming-yi et al

(Hainan Academy of Ocean and Fisheries Science, Haikou, Hainan 570100)

[Objective] To make the artificial domestication and seedling cultivation experiments ofHippocampustrimaculatusLeach and enrich the biological basic data ofH.trimaculatusLeach. [Method] The parent fishes were collected from Hainan to make artificial domestication and seedling cultivation experiments. And their reproductive biological behaviors were studied. [Result] The survival rate of parent fish after artificial domestication reached 85%. 29 thousand hatched fries ofH.trimaculatusLeach were harvested, and 11 thousand one-month-old fish fries were cultivated. The optimum initial bait forH.trimaculatusLeach was “chlorella + rotifers + copepods larvae”. There were individual differences in the amount of egg load and the amount of hatched eggs inH.trimaculatusLeach. The minimum, maximum and average values of egg load amount per parent fish were 350, 1 020 and 660 respectively. The minimum, maximum and average values of the amount of hatched eggs per parent fish were 220, 720 and 550 respectively. [Conclusion] The results can provide scientific basis for the offspring cultivation and artificial breeding ofH.trimaculatusLeach.

HippocampustrimaculatusLeach；Artificial domestication；Seedling cultivation； Initial bait

海南省科研院所專項(xiàng)(KYYS-2014-62)。

駱大鵬(1980- )，男，四川峨眉人，高級(jí)工程師，碩士，從事水生生物繁育研究。

2016-08-12

S 968.9

A

0517-6611(2016)31-0147-03