王 聰 ， 謝 磊 ， 康凌之

(杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 臨江學(xué)院 ， 浙江 杭州 310018)

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固相微萃取—氣相色譜/質(zhì)譜法測定菊花的揮發(fā)性成分

王 聰 ， 謝 磊 ， 康凌之

(杭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 臨江學(xué)院 ， 浙江 杭州 310018)

采用頂空固相微萃取—氣相色譜/質(zhì)譜法測定了杭菊中的揮發(fā)性成分。結(jié)果表明，0.50 g 樣品裝入頂空樣品瓶中，用聚四氟乙烯隔墊密封，80 ℃恒溫水浴預(yù)熱30 min，將萃取頭頂空吸附30 min，在GC進樣口250 ℃解吸5 min，經(jīng)GC和MS分析，產(chǎn)生近70個色譜峰，對主要的22個物質(zhì)進行鑒定。本法快速、簡便、準確，確為藥材質(zhì)量控制的良好方法。

頂空固相微萃取 ； 氣相色譜/質(zhì)譜法 ； 指紋圖譜 ； 菊花

0 前言

菊花(Chrysanthemi Flos)為菊科植物菊的干燥頭狀花序。藥材按產(chǎn)地不同，分為“亳菊”、“滁菊”、“貢菊”、“杭菊”。菊花性甘、苦，微寒，主要含有萜類、黃酮類、有機酸類、生物堿類等活性物質(zhì)?，F(xiàn)代藥理研究表明，菊花具有廣泛的生物活性，如抗炎、抗氧化性、抗腫瘤、保護心血管等作用[1]。固相微萃取(SPME)是20世紀90年代出現(xiàn)的一種無溶劑樣品前處理技術(shù)，它集采集、萃取、濃縮、進樣于一體，能方便地與氣相色譜等一起聯(lián)用，快速有效地分析樣品中的痕量有機物，近年來被成功應(yīng)用于厚樸、藿香、白頭婆等藥材的指紋圖譜分析[2-4]。分析比較不同產(chǎn)地鐵皮石斛的裂解氣相指紋圖譜，采用浙江桐鄉(xiāng)的杭菊，用HS-SPME-GC方法，產(chǎn)生近70個色譜峰，結(jié)合相關(guān)文獻和質(zhì)譜分析，共鑒定出22個揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)[5]。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

美國 Agilent 7890A/5975C 氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀；美國Agilent 7890A 氣相色譜儀，配氫火焰檢測器(FID)；美國Supelco 手動固相微萃取裝置，配65 μm PDMS/DVB萃取頭。杭菊樣品購于中藥房，取干燥菊花樣品10 g研磨成粉過120 μm(120目)篩，備用。

1.2 實驗過程

將粉碎后的0.50 g 樣品裝入 20 mL 螺口頂空樣品瓶中，用聚四氟乙烯隔墊密封，水浴80 ℃恒溫預(yù)熱30 min，將固相微萃取器的萃取頭通過聚四氟乙烯隔墊插入到容器中，頂空吸附30 min。在GC進樣口250 ℃解吸5 min，經(jīng)GC和MS進行分析。

SPME-GC分析裝置為美國RESTEK Rtx-1701石英毛細管柱(30 m × 0.25 mm × 0.25 μm)。柱箱升溫程序：初始溫度35 ℃(保持2 min)，以5 ℃/min速率升至200 ℃(保持15 min)；進樣口溫度：250 ℃。不分流模式；載氣：氦氣；流速：1 mL/ min。FID溫度：300 ℃。SPME熱解析溫度250 ℃，保持5 min。MS條件電子轟擊(EI)離子源，電離能量70 eV，溫度：230 ℃。掃描范圍50～550 m/z；傳輸線溫度280 ℃。

2 方法與結(jié)果

2.1 固相微萃取——氣相色譜圖

按照上述方法節(jié)制備樣品并進行頂空吸附，SPME-GC條件下測定杭菊樣品。圖1即為樣品在80 ℃下HS-SPME-GC得到的色譜圖。由圖1可見，菊花頂空固相微萃取產(chǎn)生近70個色譜峰，選擇有效成分色譜峰、相對強度較強為考察對象，即保留時間為35 min內(nèi)的1～22號峰。

圖1 S5菊花HS-SPME-GC圖譜及共有峰

2.2 杭菊揮發(fā)性成分鑒定

結(jié)合相關(guān)文獻[6-8]、質(zhì)譜分析可知，大部分為倍半萜烯烴及其氧化衍生物。圖1中3為樟腦，4為龍腦，9為菊酮，1，5～8和10～12為倍半萜烯烴，分別為α-蒎烯，β-欖香烯，丁香烯，石竹烯，α-姜黃烯，β-石竹烯，β-和β-紅沒藥烯；18～22為倍半萜的氧化衍生物，分別為桉葉醇、雪松醇、桉葉烯醇、杜松醇、紅沒藥醇。樟腦、龍腦具有提神醒腦作用，α-蒎烯具有抗氧化作用、β-欖香烯具有抗癌作用。

3 結(jié)論

本研究采用固相微萃取—氣相色譜測定杭菊的揮發(fā)性成分，此法為一種無溶劑樣品前處理技術(shù)，快速有效地分析天然動植物中的痕量有機物。樣品不需要進行復(fù)雜的前處理，減小了因前處理帶來的測試誤差，同時也避免了因大量使用溶劑而造成的環(huán)境污染。本法適用于具有揮發(fā)性氣味的天然產(chǎn)物分析。

[1] 瞿 璐,王 濤,董勇喆,等.菊花化學(xué)成分與藥理作用的研究進展[J].藥物評價研究,2015,38(1):98-104.

[2] 林 茵,王 麟,張 靜,等.厚樸炮制前后揮發(fā)油化學(xué)成分的GC-MS分析[J].中草藥,2010,41(8):1261-1264.

[3] 李昌勤,姬志強,康文藝.藿香揮發(fā)油的HS-SPME-GC-MS分析[J]. 中草藥,2010,41(9):1443-1444.

[4] 楊再波,鐘才寧,孫成斌,等. 白頭婆揮發(fā)油的固相微萃取分析[J].中國藥學(xué)雜志,2008,43(15):1188-1190.

[5] 王麗麗,王 聰,潘再法,等. 鐵皮石斛的裂解氣相色譜指紋圖譜及其系統(tǒng)聚類分析[J]. 色譜,2008,26(5):613-617.

[6] Yuan Jun,Hao Li jun,Wu Gang,et al.Effects of drying methods on the phytochemicals contents and antioxidant properties of chrysanthemum flower heads harvested at two developmental stages[J].Journal of Functional Foods,2015,19:786-795.

[7] Wang Tao,Guo Qiao sheng,Mao Peng fei.Flavonoid accumulation during florescence in three Chrysanthemum morifolium Ramat cv Hangju genotypes[J].Biochemical Systematics and Ecology,2014,55:79-83.

[8] 高申蓉,呂翼,盧金清.固相萃取——氣質(zhì)聯(lián)用分析菊花揮發(fā)性化學(xué)成分[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2014,34(5):380-383.

2016-07-21

莊心生(1974-)，男，高級工程師，從事企業(yè)生產(chǎn)一線技術(shù)管理工作，電話：18537512345；聯(lián)系人：王留栓(1972-)，男，高級工程師，從事企業(yè)技改管理工作，電話：13939953552。

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1003-3467(2016)11-0050-02