于 菲，朱凌盈，趙帥兵，傅永鋼，陳少澤

（1.寧波天邦股份有限公司，浙江 寧波 315475；2.浙江大學(xué)，浙江 杭州 310027）

飼料用油脂過氧化值檢測方法探討

于 菲1，朱凌盈1，趙帥兵2，傅永鋼1，陳少澤1

（1.寧波天邦股份有限公司，浙江 寧波 315475；2.浙江大學(xué)，浙江 杭州 310027）

用GB/T5538—2005法對飼料用油脂進(jìn)行測試分析，發(fā)現(xiàn)該法實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)難把握，實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致性較差，故提出改進(jìn)方法。經(jīng)對比分析，確定將GB/T5538—2005法中溶劑水的量由30mL改為90mL時(shí)，實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)明顯，實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致性好。采用GB/T5538—1995法、GB/T5538—2005法及GB/T5538—2005改進(jìn)法3種方法對實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)果進(jìn)行對比論證，結(jié)果顯示GB/T5538—2005改進(jìn)法是作為生產(chǎn)企業(yè)實(shí)驗(yàn)室采用的最佳飼料用油脂過氧化值檢測方法。

過氧化值；飼料用油脂；精密度

油脂在儲藏過程中受到光、熱、空氣中的氧以及油脂中水分和酶的作用產(chǎn)生酸敗，其中間產(chǎn)物是過氧化物，過氧化值是表征酸敗的重要指標(biāo)［1］。油脂的過氧化值是重要的衛(wèi)生檢測指標(biāo)［2］，，對一些第三方檢測機(jī)構(gòu)及高校實(shí)驗(yàn)室的調(diào)研發(fā)現(xiàn)，過氧化值檢測均采用GB/T5538—2005所述方法。GB/ T5538—2005和 GB/T5538—1995法是使用經(jīng)典的碘量法［3］，但 GB/T5538—2005法用異辛烷代替GB/T5538—1995法中有明顯的致癌能力的三氯甲烷［4］。在GB/T5538—2005的實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，該方法在滴定時(shí)，一方面碘單質(zhì)析出較明顯，不能及時(shí)被溶解，故反應(yīng)具有一定的延時(shí)現(xiàn)象，易造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏高；另一方面樣液受油脂及雜質(zhì)的影響而有渾濁、乳化現(xiàn)象，故實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)難把握，實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致性較差。所以，GB/T5538—2005方法難以滿足飼料用油脂的日常檢測需要。

在不改變GB/T5538—2005方法實(shí)驗(yàn)原理的前提下，考慮到碘單質(zhì)在水中的溶解度較小，本文提出改進(jìn)方法，即在樣液滴定前，增加溶劑水的量，以確保析出的碘單質(zhì)能更好地被溶解。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，確定溶劑水的最合理添加量。本試驗(yàn)采用3種方法進(jìn)行飼料用油脂過氧化值測定的精密度對比實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)改進(jìn)方法的可靠性。

1 材料與方法

1.1 樣品

選取2種飼料用魚油、2種飼料用豆油樣品，用于GB/T5538—2005的改進(jìn)實(shí)驗(yàn)，以及GB/T 5538—2005、GB/T5538—1995和 GB/T5538—2005改進(jìn)法的對比實(shí)驗(yàn)。

1.2 主要試劑和儀器

1.2.1 試劑

所用試劑包括：0.1mol·L-1硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，基準(zhǔn)重鉻酸鉀，三氯甲烷，冰乙酸，異辛烷-冰乙酸混合液 （體積比為2∶1），飽和碘化鉀溶，5g·L-1淀粉指示劑。

1.2.2 儀器

202-3型電熱恒溫干燥箱，上海路達(dá)試驗(yàn)儀器有限公司；AL204-1電子天平，梅特勒-托利多儀器上海有限公司。高溫爐，干燥器，碘量瓶，移液管，量筒，滴定管。

1.3 方法

1.3.1 GB/T5538—2005法

準(zhǔn)確稱取適量樣品，置于250mL錐形瓶中，加入50mL異辛烷-冰醋酸溶液，蓋上塞子搖動至樣品溶解。加入0.5mL飽和碘化鉀溶液，蓋上塞子使其反應(yīng)，時(shí)間為1min，在此期間搖動至少3次，然后立即加入30mL蒸餾水。用0.01mo1· L-1硫代硫酸鈉溶液滴定，不停用力攪動，直至黃色幾乎消失。添加約0.5mL淀粉溶液，繼續(xù)滴定，臨近終點(diǎn)時(shí)，不斷搖動使所有的碘從溶劑層釋放出來，逐滴滴至藍(lán)色消失，即為終點(diǎn)［5］。同時(shí)做空白試驗(yàn)。

1.3.2 GB/T5538—2005改進(jìn)法

取適量樣品，置于250mL錐形瓶中，加入50mL異辛烷-冰醋酸溶液，蓋上塞子搖動至樣品溶解。加入0.5mL飽和碘化鉀溶液，蓋上塞子使其反應(yīng)，時(shí)間為1min，在此期間搖動至少3次，然后立即分別加入60mL、90mL、120mL蒸餾水。用0.01mol·L-1硫代硫酸鈉溶液滴定，不停用力攪動，直至黃色幾乎消失。添加約0.5mL淀粉溶液，繼續(xù)滴定，臨近終點(diǎn)時(shí)，不斷搖動使所有的碘從溶劑層釋放出來，逐滴滴至藍(lán)色消失，即為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。

1.3.3 GB/T5538—1995法

準(zhǔn)確稱取適量樣品，置于250mL錐形瓶，加10mL三氯甲烷溶解試樣，加入15mL乙酸和1mL飽和碘化鉀溶液迅速塞好瓶蓋，混勻溶液1min，在15～25℃避光靜置5min。加入約75mL蒸餾水，以0.5%淀粉溶液為指示劑，用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定析出的碘 （估計(jì)值小于12時(shí)用0.002mol·L-1標(biāo)準(zhǔn)溶液，大于12時(shí)用0.01mol·L-1標(biāo)準(zhǔn)溶液），滴定過程要用力振搖。同時(shí)做空白試驗(yàn)［6］。

1.3.4 結(jié)果計(jì)算

過氧化值以mmol·kg-1表示。P=1000（V-V0）c/（2m）。

式中：V為樣品測定消耗硫代硫酸鈉溶液的體積，mL；V0為空白消耗硫代硫酸鈉溶液的體積，mL；c為硫代硫酸鈉溶液的濃度，mol·L-1；m為樣品的質(zhì)量，g。

2 結(jié)果與分析

2.1 GB/T5538—2005法的精密度

選取2種飼料用魚油、2種飼料用豆油樣品，按GB/T5538—2005法測定其過氧化值，每份樣品平行測定7次，具體數(shù)據(jù)見表1。

表1 GB/T5538—2005法的精密度測定結(jié)果

在檢測過程中發(fā)現(xiàn)，溶劑水的量較少，碘單質(zhì)因不能及時(shí)被溶解而析出較明顯，故反應(yīng)具有一定的延時(shí)現(xiàn)象，易造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏高；另外，樣液有渾濁現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)難把握。通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)得出相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.58%～4.80%的范圍內(nèi)。說明該方法測定結(jié)果一致性較差，數(shù)據(jù)偏差較大。

2.2 GB/T5538—2005改進(jìn)法的結(jié)果

在不改變GB/T5538—2005方法實(shí)驗(yàn)原理的前提下，考慮到碘單質(zhì)在水中的溶解度較小，在滴定前，增加溶劑水的量，以確保析出的碘單質(zhì)能更好地被溶解。選取一種飼料用豆油，通過滴定前添加不同溶劑水的量，作為實(shí)驗(yàn)改進(jìn)方法測定其過氧化值，每份樣品平行測定7次，具體數(shù)據(jù)見表2。

表2 GB/T5538—2005改進(jìn)法測豆油一樣品的精密度測定結(jié)果

經(jīng)過實(shí)驗(yàn)得出溶劑水的不同添加量對檢測結(jié)果有影響。溶劑水添加量為60mL時(shí)，不能完全避免試驗(yàn)終點(diǎn)的延時(shí)現(xiàn)象，通過計(jì)算，試驗(yàn)結(jié)果降低比GB/T5538—2005法降低0.65%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.03%，試驗(yàn)結(jié)果的一致性相對較差。溶劑水添加量為90mL時(shí)，因析出的碘單質(zhì)能很好地被溶解，避免了滴定終點(diǎn)的延時(shí)現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)結(jié)果降低2.23%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差1.19%，試驗(yàn)結(jié)果的一致性很好。溶劑水添加量為120mL時(shí)，析出的碘單質(zhì)能很好地被溶解，避免了滴定終點(diǎn)的延時(shí)現(xiàn)象，通過計(jì)算，實(shí)驗(yàn)結(jié)果降低 2.17，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差1.86%，試驗(yàn)結(jié)果的一致性相對較差。究其原因，主要是溶劑水添加量為120mL時(shí)，滴定體積過大，操作不方便，有時(shí)，振搖力度過大，甚至?xí)?dǎo)致樣液溢出，影響了測定的準(zhǔn)確度和一致性。所以測定飼料用油脂過氧化值滴定時(shí)把國標(biāo)GB/T5538—2005規(guī)定的30mL水的添加量改為90mL作為GB/T5538—2005改進(jìn)法。

2.3 GB/T5538—2005改進(jìn)法的精密度

選取同樣的2種飼料用魚油、2種飼料用豆油樣品，按GB/T5538—1995改進(jìn)法測定其過氧化值，每份樣品平行測定7次，具體數(shù)據(jù)見表3。

表3 GB/T5538—2005改進(jìn)法的精密度測定結(jié)果

通過試驗(yàn)得出，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.22% ～1.77%，說明該方法測定結(jié)果一致性較好，數(shù)據(jù)穩(wěn)定。同時(shí)該檢測數(shù)據(jù)作為驗(yàn)證改進(jìn)方法的可行性的對比依據(jù)。

2.4 GB/T5538—1995法的精密度

選取同樣的2種飼料用魚油、2種飼料用豆油樣品，按GB/T5538—1995試驗(yàn)方法測定其過氧化值，每份樣品平行測定7次，具體數(shù)據(jù)見表4。

表4 GB/T5538—1995法的精密度測定結(jié)果

在檢測過程中發(fā)現(xiàn)，該方法滴定終點(diǎn)明顯，操作方便。通過實(shí)驗(yàn)得出相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.26%～1.96%的范圍內(nèi)，說明該方法測定結(jié)果一致性好，數(shù)據(jù)穩(wěn)定。因?yàn)楸痉椒ㄊ褂脮r(shí)間長，檢測結(jié)果穩(wěn)定可靠，為了分析其他方法的可行性，在后面的數(shù)據(jù)對比中，表4中的檢測結(jié)果作為驗(yàn)證其他方法可行性的對比標(biāo)準(zhǔn)。

2.5 方法檢測結(jié)果比較

選取3種方法檢測的均值結(jié)果的任意2組進(jìn)行相對偏差的對比，具體數(shù)據(jù)見表5。

表5 3種方法檢測結(jié)果的比較

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，GB/T5538—1995與GB/T 5538—2005結(jié)果的相對偏差在4.94% ～9.88%，GB/T5538—1995與GB/T5538—2005改進(jìn)法結(jié)果的相對偏差在2.27%～4.56%，GB/T5538—2005與GB/T5538—2005改進(jìn)法結(jié)果的相對偏差在2.51% ～6.99%，3種方法的相對偏差均小于10%，說明3種方法的檢測結(jié)果均有意義。但相比較來說GB/T5538—1995與GB/T5538—2005改進(jìn)法結(jié)果的相對偏差波動范圍最小，說明 GB/T 5538—2005改進(jìn)法完全可以替代GB/T5538—1995作為飼料用油脂過氧化值的檢測方法。

3 小結(jié)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，GB/T5538—2005較GB/T 5538—1995，用異辛烷代替三氯甲烷，提高了試驗(yàn)的安全性，但是，該法因在滴定時(shí)，樣液受渾濁乳化的干擾，反應(yīng)具有延時(shí)現(xiàn)象，終點(diǎn)難以把握，實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致性較差。在不改變實(shí)驗(yàn)原理的前提下，提出GB/T5538—2005的改進(jìn)法，即在滴定前溶劑水的用量由30mL增加到90mL，經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，改進(jìn)法避免了滴定終點(diǎn)的延時(shí)現(xiàn)象，滴定終點(diǎn)較明顯，測定結(jié)果一致性很好。

通過精密度試驗(yàn)得出，GB/T5538—2005改進(jìn)法和GB/T5538—1995的精密度相當(dāng)，完全可以替代后者進(jìn)行油脂過氧化值的檢測。

通過飼料用油脂過氧化值3種方法檢測的均值結(jié)果相互之間的相對偏差的對比發(fā)現(xiàn)，三種方法的相對偏差均小于10%，說明3種方法的檢測結(jié)果均有意義。但相比較來說GB/T5538—1995與GB/T5538—2005改進(jìn)法兩方法結(jié)果的相對偏差波動范圍最小，說明GB/T5538—2005改進(jìn)法完全可以替代GB/T 5538—1995作為飼料用油脂過氧化值的檢測方法。

［1］ 朱麗瓊，陳嘉東，鐘國才，等.關(guān)于油脂過氧化值檢測若干問題探討 ［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（8）：162-163.

［2］ 何英.油脂過氧化值測定方法的比較 ［J］.糧食儲藏，2000，1（29）：45-47.

［3］ 陳云良.永停終點(diǎn)指示碘量法測定油脂過氧化值 ［J］.理化檢驗(yàn)：化學(xué)分冊，2010，46（5）：574-575.

［4］ 李靈宏.氯仿的致突變、致畸和致癌性研究進(jìn)展 ［J］.衛(wèi)生毒理學(xué)雜志，1991，5（1）：50-52.

［5］ 動植物油脂過氧化值測定：GB/T5538—2005［S］.

［6］ 動植物油脂過氧化值測定：GB/T5538—1995［S］.

（責(zé)任編輯：萬 晶）

S816.34

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0528-9017（2016）05-0748-03

2016-02-01

于 菲 （1979—），女，浙江余姚人，工程師，從事食品檢測方面工作，E-mail：yilian_mtx@163.com。

文獻(xiàn)著錄格式：于菲，朱凌盈，趙帥兵，等.飼料用油脂過氧化值檢測方法探討 ［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，57（5）：748-751.

10.16178/j.issn.0528-9017.20160542