閆瑞振，李立和，常玉芝

(天津醫(yī)科大學(xué)寶坻臨床學(xué)院檢驗科，天津 301800)

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·經(jīng)驗交流·

化療后中性粒細胞過氧化物酶和堿性磷酸酶活性變化實驗探討

閆瑞振，李立和，常玉芝

(天津醫(yī)科大學(xué)寶坻臨床學(xué)院檢驗科，天津 301800)

目的 探討惡性腫瘤患者化療前、后中性粒細胞過氧化物酶和堿性磷酸酶活性變化。方法 分別對156例婦科惡性腫瘤患者進行血常規(guī)、堿性磷酸酶和過氧化物酶積分分析并比較化療前、后酶活性變化。結(jié)果 惡性腫瘤患者化療后大未染色細胞顯著高于化療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=32.16，P<0.05)；化療后中性粒細胞堿性磷酸酶和過氧化物酶積分較化療前降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=75.3、64.2，P<0.05)。結(jié)論 惡性腫瘤化療前、后中性粒細胞過氧化物酶和堿性磷酸酶活性具有顯著改變，因此，為達到最佳治療與監(jiān)測效果，惡性腫瘤患者化療后應(yīng)注意中性粒細胞酶活性的改變。

腫瘤； 過氧化物酶； 堿性磷酸酶： 化療； 大未染色細胞

惡性腫瘤患者在進行藥物化療時常進行白細胞(WBC)、血小板總數(shù)檢測以便進行藥物劑量和再化療方案的調(diào)整，本院檢驗科通過中性粒細胞過氧化物酶和堿性磷酸酶活性、大未染色細胞檢測判斷惡性腫瘤患者治療與監(jiān)測效果表明其具有重要意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇經(jīng)本院確診的婦科卵巢癌患者156例，給予紫杉醇聯(lián)合卡鉑治療，每次治療2 d為1個療程，治療7個療程。根據(jù)腫瘤標(biāo)志物判斷療效，治療1周后進行血常規(guī)和血涂片染色積分檢測。

1.2 儀器與試劑 奧林巴斯CX41光學(xué)顯微鏡、西門子ADVIA 2120i全自動血細胞分析儀等。堿性磷酸酶染色試劑盒由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血研所科技公司提供(批號：20140304)，過氧化物酶染色試劑盒由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血研所科技公司提供(批號：20140110)，血常規(guī)配套檢測試劑由北京東南公司提供(批號：20140405)。

1.3 方法 分別于化療前、后采集患者靜脈血，制成血涂片分別進行血常規(guī)分析和堿性磷酸酶積分、過氧化物酶積分。計數(shù)100個中性粒細胞分別以1+、2+、3+、4+的個數(shù)乘以加號數(shù)計算分值。

1.3.1 堿性磷酸酶積分 細胞內(nèi)堿性磷酸酶在pH 9.4～9.6條件下水解磷酸萘酚AS-MX產(chǎn)生萘酚，后者被重氮鹽捕獲生產(chǎn)不溶性有色沉淀測定其中性粒細胞堿性磷酸酶活性并計算積分。

1.3.2 過氧化物酶積分 血細胞內(nèi)過氧化酶分解為過氧化氫(H2O2)，釋出初生態(tài)氧，使無色聯(lián)苯胺氧化成藍色聯(lián)苯胺，后者進一步變成棕黑色化合物，沉著于胞質(zhì)內(nèi)。

1.3.3 大未染色細胞 進行血常規(guī)測定，在過氧化物酶反應(yīng)池中使細胞著色，應(yīng)用流式細胞術(shù)原理，將細胞逐個通過激光檢測，然后利用設(shè)置在高、低兩個不同角度的信號感受器探測光線散射和吸收情況，經(jīng)過分析計算得到相關(guān)血細胞特性(如細胞體積、內(nèi)容物濃度及密度)，計算染色與未染色細胞數(shù)。

2 結(jié) 果

2.1 化療前、后中性粒細胞計數(shù)(LEU)、大未染色細胞計數(shù)(LUC)及LUC/LEU比較 化療前、后LUC比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=32.16，P<0.05)。見表1。

表1 化療前、后LEU、LUC及LUC/LEU比較(n=156)

*：t=32.16，P<0.05，與化療前比較。

2.2 化療前、后中性粒細胞堿性磷酸酶和過氧化物酶積分比較 化療前、后中性粒細胞堿性磷酸酶和過氧化物酶積分比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=75.3、64.2，P<0.05)。見表2。

表2 化療前、后中性粒細胞堿性磷酸酶和過氧化物酶積分比較，分，n=156)

*：t=75.3，P<0.05，與化療前比較；△：t=64.2，P<0.05，與化療前比較。

3 討 論

西門子ADVIA 2120i全自動血細胞分析儀具有檢測快速、參數(shù)多、準(zhǔn)確性高、自動化等特點，適合臨床常規(guī)應(yīng)用。LUC是ADVIA2120全自動血細胞分析儀推出的一種全新參數(shù)，指在過氧化物酶染色中未被染色的細胞包括大淋巴細胞、漿細胞、各種原始和幼稚細胞，LUC%是LUC數(shù)與WBC總數(shù)之比，正常參考范圍為0～4%，LUC增高超出正常參考范圍主要是由幼稚細胞引起的[1-2]。

目前90%以上化療藥物對患者骨髓有抑制作用[3]，患者因各種原因進行化療后大多數(shù)出現(xiàn)WBC減少(表1)，對于卵巢癌化療方案應(yīng)用最為廣泛的為紫杉類聯(lián)合鉑類，因化療對各種組織、器官的正常細胞群和腫瘤細胞群有不同程度的損傷，當(dāng)化療劑量到達一定數(shù)量值雖然可使腫瘤細胞全部死亡，但該劑量往往已超過正常組織的耐受量，最常見的不良反應(yīng)為骨髓抑制，其次為胃腸道反應(yīng)、脫發(fā)、局部刺激、過敏反應(yīng)等[4]。放、化療或化療的惡性腫瘤患者應(yīng)經(jīng)常進行外周血血常規(guī)檢查，以了解骨髓抑制情況，若WBC<2.0×109L-1、血小板小于2.0×1012L-1應(yīng)暫停治療并適當(dāng)隔離，避免感染[5]。

從表1可見，惡性腫瘤患者在化療前中性粒細胞顯著高于化療后，而且化療后大未染色細胞顯著高于化療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=32.16，P<0.05)，LUC/LEU為(15.0±3.26)%，盡管化療后WBC數(shù)目減少，大未染色細胞仍顯著增高，說明中性粒細胞過氧化物酶活性降低。從表2可見，惡性腫瘤患者化療后中性粒細胞堿性磷酸酶和過氧化物酶積分較化療前降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=75.3、64.2，P<0.05)。表明化療后中性粒細胞過氧化物酶活性降低，因此，在應(yīng)用西門子ADVIA 2120全自動血細胞分析儀進行血常規(guī)分析時卵巢癌患者化療后，由于過氧化物酶活性顯著降低，故大未染色細胞顯著增高，大未染色細胞與過氧化物酶活性顯著降低是一致的。

血常規(guī)測定中大未染色細胞不僅出現(xiàn)在惡性血液病患者，卵巢癌患者化療后中性粒細胞過氧化物酶和堿性磷酸酶活性降低，外周血中大未染細胞升高，因此，惡性腫瘤患者化療后除進行中性粒細胞和血小板數(shù)量檢查外還應(yīng)進行大未染色細胞、中性粒細胞過氧化物酶和堿性磷酸酶活性的檢查，以達到?jīng)Q定是否繼續(xù)化療的監(jiān)測效果。

[1]詹琦，俞萍麗.全自動血細胞分析儀計數(shù)LUC與手工鏡檢計數(shù)幼稚細胞的對照分析[J].福建醫(yī)藥雜志，2012，34(6)：52-54.

[2]王昌富，鄧明華，彭長華，等.血涂片復(fù)審原始/幼稚細胞的臨床診斷性試驗研究[J].實用檢驗醫(yī)師雜志，2011，3(1)：23-26.

[3]郭一民，賀詠寧，龍生平.充髓填精方防治惡性腫瘤化療后骨髓抑制的臨床觀察[J].時珍國醫(yī)國藥，2013，24(12)：2944-2945.

[4]于榮，侯建青.紫杉醇聯(lián)合鉑類化療對晚期卵巢上皮細胞癌患者CD4+CD25+FOXP3+細胞的影響及意義[J].濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2012，35(4)：248-251.

[5]張明珠，何廣元，朱紅.惡性腫瘤患者放化療前后白細胞參數(shù)變化的探討[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2005，13(3)：334-335.

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.02.062

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1673-4130(2016)02-0274-02

2015-07-06)