羅曉云，胡仁靜，武標，戴亞新

（1.江蘇省無錫市第二人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 無錫 214002；2.江蘇省無錫市第五人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 無錫 214005）

高爾基體蛋白73在早期肝癌中診斷價值

羅曉云1，胡仁靜1，武標1，戴亞新2

（1.江蘇省無錫市第二人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 無錫 214002；2.江蘇省無錫市第五人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 無錫 214005）

目的探討高爾基體糖蛋白（GP73）在早期肝癌中的診斷價值。方法采用酶聯(lián)免疫吸附試驗和化學發(fā)光法檢測104例肝細胞癌（HCC）血清中的GP73和甲胎蛋白（AFP）的水平，以100例慢性肝炎、肝硬化、61例胃腸腺癌肝轉移腫瘤、50例健康人群的樣本檢測作為對照組做統(tǒng)計學分析。結果在104例HCC患者中，血清GP73和AFP水平高于其他組，經(jīng)Kruskal-Wallis檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；HCC組與慢性肝病組、肝臟轉移癌組、對照組的GP73、AFP水平比較，經(jīng)Mann-Whitney檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。GP73、AFP在診斷HCC的受試者工作特征曲線上顯示，GP73的曲線下面積為0.932，敏感性為78.9%，特異性為89.0%；AFP的曲線下面積為0.817，敏感性為60.6%，特異性為88.5%。GP73與金標一致性檢驗的Kappa值為0.75，而AFP的Kappa值為0.63。GP73相對于AFP的NRI的結果為0.53，說明GP73檢驗效能高于AFP。結論GP73對HCC的診斷價值優(yōu)于AFP，有望成為較好的HCC早期診斷新指標。

肝細胞癌；高爾基體糖蛋白73；甲胎蛋白

肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）占原發(fā)性肝癌（primary hepatocelluar carcinoma，PHC）的90%[1]，惡性程度高，預后差。目前臨床常用的篩查HCC的血清學指標仍是甲胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP），但其敏感性和特異性都不夠理想[2]。近年來報道一項新的診斷HCC血清腫瘤標志物，高爾基體糖蛋白-73（Golgprotein-73，GP73）[3-4]。本文通過比較HCC及其他胃腸腺癌肝轉移、肝病、正常體檢人群血清中的GP73和AFP檢測結果，探討GP73對HCC的診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2013～2015年無錫市第二人民醫(yī)院和無錫市第五人民醫(yī)院住院患者265例。其中，慢性肝病100例為慢性肝病組，年齡59（35～80）歲；男性65例，女性35例。HCC 104例為HCC組，年齡58（35～72）歲；男性65例，女性39例。胃腸腺癌肝轉移61例為肝臟轉移癌組，年齡62（45～76）歲；男性35例，女性26例。慢性肝病患者符合2005年中華醫(yī)學會肝病學分會、中華醫(yī)學會感染病學分會聯(lián)合修訂的《慢性乙型肝炎防治指南》診斷標準；HCC患者符合中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會2001年制定的《原發(fā)性肝癌的臨床診斷標準》。對照組50例，來自無錫第二人民醫(yī)院職工健康體檢人群，年齡58（45～70）歲；男性28例，女性22例。

1.2研究方法

AFP檢測使用化學發(fā)光法與貝克曼配套試劑，參考值＜9 ng/ml，對于初檢AFP＞300 ng/ml的標本自動稀釋后再檢測，檢測上限為54 000 ng/ml。血清GP73檢測使用北京熱景生物技術有限公司提供的商品化酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒，試劑線性范圍為0～250 ng/ml，＞250 ng/ml的樣本使用配套稀釋液手工稀釋后再檢測。根據(jù)試劑盒說明書進行操作，檢測GP73。MK3酶標儀檢測吸光度值（A）后，根據(jù)標準曲線計算GP73含量。

1.3統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，GP73、AFP呈偏態(tài)分布，用中位數(shù)和四分位數(shù)表示，多組間比較用Kruskal-Wallis檢驗；兩兩比較，采用Mann-WhitneyU檢驗。繪制受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）曲線，計算臨界值、敏感性、特異性和ROC曲線的線下面積。用Kappa值來評估GP73及AFP與病理結果的一致性，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。重分類改善指標（net reclassification improvement，NRI）用于比較兩個指標的診斷能力，一個指標比另外一個指標診斷準確率是否提高，判斷兩者診斷的效能的差異。指標1陽性、金標準陽性表示為A1，指標1陽性、金標準陰性表示為B1，指標1陰性、金標準陽性表示為C1，指標1陰性、金標準陰性表示為D1。指標2陽性、金標準陽性表示為A2，指標2陽性、金標準陰性表示為B2，指標2陰性、金標準陽性表示為C2，指標2陰性、金標準陰性表示為D2。A2-A1為指標2比指標1診斷患者正確提高的人數(shù)，p1=（A2-A1）/（A+C）為在患者中指標2相對指標1診斷正確率的提高數(shù)；p3=（C2-C1）/（A+C）為在患者中指標2相對指標1診斷錯誤率的提高數(shù)；p2=（B2-B1）/（B+D）為在非患者中指標2相對指標1診斷錯誤率的提高數(shù)；p4=（D2-D1）/（B+D）為在非患者中指標2相對指標1診斷正確率的提高數(shù)；NRI=（p1-p3）-（p2-p4），即NRI代表指標2比指標1分類改善的比例，若所得到的NRI＞0則為正改善，＜0為則為負改善，=0則為無改善。

2 結果

2.1GP73和AFP檢測結果

HCC組的GP73、AFP水平與慢性肝病組、肝臟轉移癌組和對照組比較，經(jīng)Kruskal-Wallis檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（H=126.501、101.812和76.103，P= 0.013、0.001和0.000），HCC組的GP73、AFP水平高于其他組。HCC組GP73水平分別與慢性肝病組、肝臟轉移癌組、對照組比較，組間多重比較用Mann-Whitney檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（U=1 650.103、841.012和174.352，P=0.002、0.000和0.000）；各組AFP水平比較，差異有統(tǒng)計學意義（U=1183.510、1147.820和221.301，P=0.000）。見表1。

2.2GP73和AFP診斷HCC的ROC曲線下面積

為分析無錫地區(qū)GP73和AFP對肝癌患者診斷效能，以GP73和AFP診斷肝癌的數(shù)據(jù)為基礎，ROC曲線分析顯示，GP73的曲線下面積為0.932（95%CI：0.898，0.958），敏感性為78.9%，特異性為89.0%；AFP的曲線下面積為0.817（95%CI：0.769，0.859），敏感性為60.6%，特異性為88.5%。GP73曲線下面積＞AFP，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.023），表明GP73診斷肝癌的價值優(yōu)于AFP。見附圖。

2.3不同GP73水平作為臨界值的敏感性和特異性比較

隨著GP73水平逐漸增高，篩查的特異性增加而敏感性遞減。以GP73 125.2ng/ml為臨界值時，其敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值達到最佳，分別為84.1%、90.0%、89.4%和84.9%。見表2。

2.4一致性檢驗的Kappa值及診斷HCC的NRI指標

以GP73 125.2 ng/ml為臨界值時，GP73與金標準一致性檢驗的Kappa值為0.75，而AFP的Kappa值為0.63。GP73相對于AFP的重分類改善指標NRI的結果為0.53，說明GP73檢驗效能高于AFP。

表1　各組血清GP73和AFP水平比較[M（P25，P75）]

表2　不同GP73水平作為臨界值的敏感性和特異性比較（%）

附圖HCC患者GP73和AFP的ROC曲線

3 討論

盡管HCC是一種進展快、預后差的惡性腫瘤，但是通過體檢、B超檢查發(fā)現(xiàn)生長在肝臟表面包膜下的癌結節(jié)和肝左葉的小肝癌，結合血清學腫瘤標志物的檢測，及時早期確診做手術切除，仍然能夠長期生存。然而，目前檢測的AFP由于敏感性不高，難以滿足早期肝癌診斷的需求[5]，當上述患者的血清學檢測AFP陰性或低濃度時，常常誤診為結節(jié)性肝硬化、肝細胞結節(jié)性增生或其他良性病變，從而延誤最佳治療時機。

GP73是存在于高爾基體的一種跨膜糖蛋白，是KLADNEY等[6]研究成人巨細胞性肝炎病原學是偶然發(fā)現(xiàn)的，GP73在正常肝細胞中很少或不表達，主要由膽管上皮細胞表達。以后又有學者發(fā)現(xiàn)，HCC患者血清中的GP73明顯升高[7-10]，在肝癌中的診斷價值優(yōu)于AFP[11]，在104例HCC患者的GP73和AFP水平高于其他各組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。ROC曲線分析顯示，GP73的曲線下面積為0.932，敏感性為78.9%，特異性為89.00%；AFP的曲線下面積為0.817，敏感性為60.6%，特異性為88.5%，與文獻報道一致[12]。GP73與金標準一致性檢驗的Kappa值為0.75，而AFP的Kappa值為0.63。GP73相對于AFP的NRI的結果為0.53，說明GP73檢驗效能高于AFP。ROC曲線下面積、Kappa及NRI值表明，GP73在診斷肝癌中敏感性和特異性都高于AFP，對于HCC有早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，提高患者的生存質量。

在61例肝臟轉移癌中，35例胃腸癌中5例為低分化腺癌，有不同程度的陽性表達。提示部分胃腸癌有肝組織樣分化。而該5例胃腸低分化腺癌伴肝細胞樣分化的患者恰巧也是血AFP和GP73高于正常值的患者。因此，GP73除用于健康人體檢篩查外，也能提示有肝細胞樣分化的胃腸低分化腺癌，然后通過胃鏡、腸鏡檢查對腫瘤定位與確診。通過多學科的協(xié)作，GP73檢測可以在HCC以外的病種進行拓展研究，GP73將會有更廣闊的應用前景。

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（童穎丹 編輯）

Diagnostic value of Golgi protein 73 in early hepatocellular carcinoma

Xiao-yun Luo1,Ren-jing Hu1,Biao Wu1,Ya-xin Dai2
(1.Clinical Laboratory,the Second People's Hospital of Wuxi,Wuxi,Jiangsu 214002,China; 2.Clinical Laboratory,the Fifth People's Hospital of Wuxi,Wuxi,Jiangsu 214005,China)

Objective To evaluate the diagnostic value of Golgi protein 73(GP73)in early hepatocellular carcinoma.Methods Adopting ELISA and chemiluminescence method,the serum levels of GP73 and alpha fetoprotein(AFP)in 104 cases of hepatocellular carcinoma were detected.Meanwhile 100 cases of chronic hepatitis or liver cirrhosis,50 cases of healthy people and 61 cases of gastrointestinal cancer with liver metastases were chosen as control groups.Their data were statistically analyzed.Results The GP73 and AFP levels in the 104 cases of hepatocellular carcinoma were higher than those of the others,and the differences were statistically significant by Kruskal-Wallis test(P＜0.05).By Mann-Whitney test,the GP73 and AFP levels of the hepatocellular carcinoma group were significantly different from those of the patients with chronic liver disease,liver metastases and healthy people(P＜0.05).ROC curves of GP73 and AFP in diagnosing hepatocellular carcinoma showed,the area under the curve(AUC)of GP73 was 0.932,the sensitivity was 78.9%, the specificity was 89.0%;the AUC of AFP was 0.817,the sensitivity was 60.6%,the specificity was 88.5%. The Kappa value between GP73 and the gold standard was 0.75 and the Kappa value between AFP and the gold standard was 0.63.Compared with AFP,the NRI of GP73 was 0.53,which indicated that GP73 was better than AFP.Conclusions The diagnostic value of GP73 is superior to that of AFP in terms of hepatocellular carcinoma,and it is expected to become a better serum marker in the early diagnosis of primary liver cancer.

hepatocellular carcinoma;Golgi protein 73;alpha fetoprotein

R735.7

B

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.21.021

1005-8982（2016）21-0100-04

2015-12-09

武標，E-mail：wubiao2011@163.com；Tel：18751578909