孫小莉 曹曉俠

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血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和血清癌胚抗原(CEA)在直腸癌中的表達及其臨床意義

孫小莉 曹曉俠

目的 探討血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和血清癌胚抗原(CEA)在直腸癌中的表達意義。方法 選擇60例直腸癌患者為研究對象，并選取同期體檢健康者60例作為對照組。使用免疫化學發(fā)光法和免疫組化法分別測定血清 CEA水平和VEGF蛋白表達水平，分析其表達水平及臨床關(guān)系。結(jié)果 ①研究組血清中CEA檢測值明顯高于對照組，P<0.05；②在不同直腸癌TNM分期中，腫瘤組織中CEA陽性率除T1、T2組之間無統(tǒng)計學差異(P=0.153)外，其余各組比較均有統(tǒng)計學差異(P<0.05)；在N分期不同階段，腫瘤組織CEA陽性率各組間比較差異有統(tǒng)計學意義；在不同M分期中，CEA陽性率分別為43.8%(M0)、88.7%(M1)，組間比較差異有統(tǒng)計學意義；在不同病理分期中CEA陽性率：Ⅰ期～Ⅱ期與Ⅲ期～Ⅳ期比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，Ⅰ期與Ⅱ期、Ⅲ期與Ⅳ期組間比較差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)；③腫瘤組織中VEGF表達與腫瘤浸潤程度(T分期)有關(guān)(P=0.01)，與淋巴轉(zhuǎn)移程度(N分期)相關(guān)(P=0.03)，與臨床病理分期有相關(guān)性(P=0.009)。結(jié)論 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和血清癌胚抗原(CEA)均與直腸癌的發(fā)病密切相關(guān)，并與臨床TNM分期表現(xiàn)出明顯相關(guān)性，對直腸癌的臨床診斷、治療和預(yù)后有重要意義。

血管內(nèi)皮生長因子；血清癌胚抗原；直腸癌

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1778～1781)

直腸癌作為常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率表現(xiàn)出逐年上升的趨勢。目前臨床上多選取手術(shù)治療，但其發(fā)病后5年生存率一直較低，且患者后期生存質(zhì)量較低[1]。因此，探尋某些檢測指標與直腸癌發(fā)病和預(yù)后的相關(guān)性對直腸癌的診斷、治療和預(yù)后有重要的臨床意義。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是癌癥常見因子，研究表明其為刺激腫瘤血管生長的最主要因子，與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展表現(xiàn)出密切的關(guān)系[2-3]。癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)是1種和消化系統(tǒng)密切相關(guān)的因子[4-7]，測定CEA的水平對結(jié)直腸癌的診斷和腫瘤復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移的監(jiān)測有較高的臨床價值[8]。本研究對直腸癌患者的血清VEGF、CEA的含量變化進行檢測，以期為進一步探討直腸癌發(fā)病機理提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

選取2013年5月至2015年5月來我院經(jīng)病理檢查確診為直腸癌的患者60例，其中男性34例，女性26例；年齡33～90歲，平均(42.6±30.2)歲。按照國際抗癌聯(lián)盟(UICC)TNM分期標準：T分期中T1 1例、T2 17例、T3 28例、T4 14例；N分期中N0 31例、N1 10例、N2 19例；M分期中M0 48例、M1 12例；臨床分期中：Ⅰ期3例，Ⅱ期20例，Ⅲ期23例，Ⅳ期14例。選取同期體檢健康者60例作為對照組，其中男性29例，女性31例，年齡31～90歲，平均(43.1±31.8)歲。2組患者在性別、年齡方面無統(tǒng)計學差異，具有可比性。

1.2 納入和排除標準

納入標準：所有經(jīng)臨床、病理診斷符合直腸癌的患者。排除標準:半年內(nèi)做過開顱、心臟、婦科等大手術(shù)的患者、糖尿病患者、免疫系統(tǒng)疾病患者及合并其他嚴重器質(zhì)性病變者。

1.3 方法

2組受試者均在清晨空腹時抽取靜脈血3 ml，所有標本在4 ℃下、3 000 r/min離心15 min，離心后分離血清。CEA檢測采用全自動電化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)Elecsys2010及其配套試劑，購自羅氏公司，具體操作及步驟參照說明書；術(shù)中采集確診的直腸癌患者的病理標本甲醛保存，采用免疫組化二步法檢測，VEGF一抗使用鼠抗人單克隆抗體(購自北京中山生物技術(shù)有限公司)，二抗(北京中山生物技術(shù)有限公司)使用通用型二步法免疫組化檢測試劑。實驗方法采用免疫組化二步法，VEGF工作濃度為1∶100，觀察其VEGF的表達情況，具體操作及檢測方法參照試劑盒說明書。

1.4 指標檢測

CEA正常參考值<5 μg/L，VEGF蛋白陽性染色呈棕黃色或棕褐色顆粒，染色結(jié)果選擇染色良好區(qū)域，隨機計數(shù)5個高倍視野(10×40)，從陽性細胞百分率和染色強度兩個方面評分：①陽性細胞百分率<10%為0分，≥10%～49%為1分，≥50%～74%為2分，≥75%為3分；②陽性細胞的染色強度定為:無著色為0分，輕度著色為1分，中度著色為2分，重度著色或胞質(zhì)中出現(xiàn)深棕色斑塊為3分。根據(jù)兩項得分之和為染色結(jié)果，<2分為陰性(-)；≥2分為陽性，其中2分為弱陽性(+)，3～4分為中等陽性(++)，5～6分為強陽性(+++)。

1.5 統(tǒng)計學處理

2 結(jié)果

2.1 CEA檢測結(jié)果比較

2.1.1 2組患者血清中CEA檢測結(jié)果 研究組CEA值為(23.01±17.12)ng/ml，對照組CEA值為(1.95 ±1.49)ng/ml，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.03)。

2.1.2 CEA陽性率與直腸癌TNM分期的關(guān)系 在不同直腸癌分期中，CEA陽性率分別為0%(T1)，23.5%(T2)，57.1%(T3)，78.6%(T4)，除T1、T2組之間無統(tǒng)計學意義(P=0.153)外，其余各組比較均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，表明CEA陽性率與直腸癌腫瘤浸潤程度呈正相關(guān)，但在浸潤程度較淺階段(T1、T2)陽性率與其相關(guān)性不明顯。在N分期不同階段，CEA陽性率分別為22.6%(N0)、70.0%(N1)、89.5%(N3)，各組間比較差異有統(tǒng)計學意義，表明直腸癌CEA陽性率與淋巴轉(zhuǎn)移情況呈正相關(guān)。在不同M分期中，CEA陽性率分別為43.8%(M0)、91.7%(M1)，組間比較差異有統(tǒng)計學意義，表明CEA陽性率與直腸癌遠處轉(zhuǎn)移程度呈正相關(guān)。結(jié)果見表1。

2.1.3 不同病理分期中CEA陽性情況比較 各期CEA陽性率分別為33.3%(Ⅰ期)、25%(Ⅱ期)、82.6%(Ⅲ期)、92.9%(Ⅳ期)，Ⅰ期、Ⅱ期與Ⅲ期、Ⅳ期比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，Ⅰ期與Ⅱ期、Ⅲ期與Ⅳ期組間比較差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)，說明在直腸癌臨床病理分期Ⅲ期和Ⅳ期中CEA陽性率明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期。結(jié)果見表1。

2.2 不同影響因素VEGF蛋白表達結(jié)果比較

腫瘤組織中VEGF表達與腫瘤浸潤程度(T分期)有關(guān)(P=0.01)，與淋巴轉(zhuǎn)移程度(N分期)相關(guān)(P=0.03)，與臨床病理分期有相關(guān)性(P=0.009)。見表2。

表1 CEA陽性率與直腸癌TNM分期的關(guān)系(例，%)

表2 不同影響因素VEGF蛋白表達結(jié)果比較

3 討論

結(jié)直腸癌是消化道常見腫瘤，目前臨床主要依據(jù)TNM分期制定治療方案，并對病情預(yù)后進行判定。統(tǒng)計資料表明，2005年我國結(jié)直腸癌發(fā)病數(shù)和死亡數(shù)分別達17.2萬和9.9萬，男女發(fā)病率分別為15.0(/10萬)和9.7(/10萬)，死亡率分別為8.6(/10萬)和5.4(/10萬)，發(fā)病率和死亡數(shù)逐漸超過了發(fā)達國家[9]。近年來我國結(jié)直腸癌的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢，但根據(jù)流行病學統(tǒng)計數(shù)據(jù)表明，結(jié)腸癌和直腸癌在上升程度和病因?qū)W方面存在著明顯差異:如近20年上海結(jié)腸癌發(fā)病率提高78%，而同期直腸癌的發(fā)病率僅上升6%[10]。直腸癌多見血便、便頻、膿血便，因其發(fā)病部位接近肛門，臨床癥狀明顯，患者易早期就診，且直腸癌患者易在早期就診，通過肛門指檢、肛鏡、乙狀結(jié)腸鏡，即可發(fā)現(xiàn)確診。而結(jié)腸癌的腹痛、腹脹、食欲減退易被忽視、延診和誤診。直腸癌存活率僅次于乳腺癌，故患者積極就診，醫(yī)生早期準確診斷及治療意義重大，我國消化道腫瘤專家曾提出了防治該病的措施：加強防癌健康教育、平衡飲食、積極治療癌前病變、養(yǎng)成良好生活習慣并積極進行體育鍛煉、大力推行定期篩查[11]。

血管內(nèi)皮因子(VEGF)是一種分子量34～45 KD的分泌性糖蛋白，可以改善微血管的通透性、促進血管內(nèi)皮細胞分裂增殖和血管重新構(gòu)建、同時可以使內(nèi)皮細胞發(fā)生遷移，調(diào)節(jié)血管病變等多種作用。另外VEGF可刺激血管內(nèi)皮細胞的己糖轉(zhuǎn)運，改變單核細胞的趨化性，導(dǎo)致部分腫瘤細胞可以逃脫免疫功能的監(jiān)視[12]。臨床研究發(fā)現(xiàn)實體瘤的生長和轉(zhuǎn)移與腫瘤血管生成關(guān)系密切[13]，VEGF作為腫瘤新生血管生成的重要調(diào)控因子，可以直接作用于血管內(nèi)皮細胞，刺激有絲分裂，提供腫瘤生長的必要物質(zhì)；另外還可以增加血管內(nèi)皮的通透性，促使腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移及血管內(nèi)皮細胞的遷移[14]。癌胚抗原(CEA)為結(jié)腸腺癌細胞中存在的酸性糖蛋白，在消化系惡性腫瘤中較為常見[15]。由于結(jié)直腸癌細胞極性紊亂，其分泌的CEA會進入血液導(dǎo)致血中CEA升高。目前臨床上CEA已經(jīng)成為診斷結(jié)直腸癌，判斷腫瘤分期和病變程度的一種重要因子，所以檢測血清中CEA的含量，對直腸癌患者病情的動態(tài)監(jiān)測跟蹤有重要意義[16]。

本研究結(jié)果顯示在不同直腸癌TNM分期中，CEA陽性率與直腸癌腫瘤浸潤程度呈正相關(guān)，但在浸潤程度較淺階段(T1、T2)陽性率與其相關(guān)性不明顯。直腸癌CEA陽性率與淋巴轉(zhuǎn)移情況呈正相關(guān)。在不同M分期中，CEA陽性率與直腸癌遠處轉(zhuǎn)移程度呈正相關(guān)。在直腸癌臨床病理分期Ⅲ期和Ⅳ期中CEA陽性率明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期。腫瘤組織中VEGF表達與腫瘤浸潤程度(T分期)有關(guān)(P=0.01)，與淋巴轉(zhuǎn)移程度(N分期)相關(guān)(P=0.03)，與臨床病理分期有相關(guān)性(P=0.009)?？傊?，VEGF和CEA是直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中的重要生物學因素，VEGF和CEA水平與直腸癌的臨床TNM分期密切相關(guān)，分期越高，表達越顯著，此兩項指標對直腸癌的診斷、治療、監(jiān)測及預(yù)后有重要臨床意義。

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(編輯：甘 艷)

Clinical Significance of Vascular Endothelial Growth Factor(VEGF) and Serum Carcinoembryonic Antigen(CEA) Expression in Colorectal Cancer

SUNXiaoli,CAOXiaoxia.

BaojiMaternalandChildHealthCareHospital,Baoji,721000

Objective To study the clinical significance of vascular endothelial growth factor(VEGF) and serum carcinoembryonic antigen(CEA) expression in colorectal cancer.Methods 60 cases of patients with rectal cancer were selected as the research object.Meanwhile 60 cases of healthy patients in the same period were selected as the control group.Immune chemiluminescence method and immunohistochemical method was used to detect the serum CEA level and VEGF protein expression level respectively,and the expression level and clinical significance were analyzed.Results ①Serum CEA level in the observation group were significantly higher than of the control group,P<0.05;② CEA positive rate in the tumor tissues all had significant difference except for the T1 and T2 groups(P=0.153);N staging tumor tissues CEA positive rates had statistical difference in each group;In different M installment,CEA positive rates were 43.8%(M0),88.7%(M1),there had statistically significant difference.CEA positive rates in different pathological stages:phase Ⅰ had statistical difference,(P<0.05),phase Ⅰ and phase Ⅱ,phase Ⅲ and Ⅳ had no statistic differences(P>0.05);③ VEGF expression in tumor tissues was related with tumor infiltrating degree in T staging(P=0.01),and degree of lymphatic metastasis in N staging(P=0.03),and clinical pathological stage(P=0.009).Conclusion The expression level of VEGF and CEA are closely related with rectal cancer,and shows an obvious correlation with clinical TNM staging.The expression of VEGF and CEA has important significance in the clinical diagnosis,treatment and prognosis of the colorectal cancer.

Vascular endothelial growth factor(VEGF);Serum carcinoembryonic antigen(CEA);Rectal cancer

721000 陜西省寶雞市婦幼保健院(孫小莉)；712000 陜西中醫(yī)學院附屬醫(yī)院(曹曉俠)

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.11.011

R735.3+7

A

1001-5930(2016)11-1778-04

2016-02-03

2016-09-26)