喻金梅 安云婷 戴紅春

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miRNA-145在不同宮頸組織中的表達(dá)意義

喻金梅 安云婷 戴紅春

目的 探討miR-145表達(dá)在不同宮頸癌組織中的意義。方法 應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)RT-PCR技術(shù)，檢測20例正常宮頸組織、20例宮頸鱗狀上皮內(nèi)瘤樣病變(cervical intraepithelial neoplasias，CIN)組織及40例宮頸鱗癌(cervical cancer，CC)Ⅱ期中分化組織中miRNA-145表達(dá)情況。結(jié)果 miR-145的相對表達(dá)量在宮頸癌組織中為(0.400±0.242)，明顯低于CIN組織[(0.742±0.419)]，低于正常宮頸組織(1.082±0.478)，差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。結(jié)論 miR-145的相對表達(dá)量在正常宮頸組織、CIN組織 、宮頸癌組織中逐漸下降，提示miR-145可能參與宮頸癌發(fā)生、發(fā)展。

miR-145；宮頸組織

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1747～1748)

宮頸癌(cervical cancer)是最常見的女性惡性腫瘤之一，僅次于乳腺癌，在全球范圍內(nèi)，每年約有20多萬女性死于宮頸癌。目前世界上每年大約有50萬宮頸癌的新發(fā)病例，我國每年宮頸癌的新發(fā)病例約13.15萬，占世界宮頸癌心發(fā)病例的1/3[1]。宮頸上皮細(xì)胞由正常宮頸上皮發(fā)展為上皮內(nèi)瘤變最后進(jìn)展為浸潤性宮頸癌是內(nèi)因外因綜合作用的結(jié)果，其中人類乳頭瘤病毒(HPV)家族中的高危型HPV的持續(xù)感染是宮頸癌及其癌前病變發(fā)生的主要外因。由于宮頸癌篩查是的普遍開展，只有35%～65% CIN-3/CIS,12%～20% CIN-2 和 <5% CIN-1的患者可能發(fā)展成浸潤癌[2-3]，因此尋找具有預(yù)測癌癥進(jìn)展的標(biāo)記物成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。有關(guān)研究表明miRNA的差異表達(dá)與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，這可能有助于宮頸癌的早期診斷、治療及預(yù)后的判斷，

1 材料與方法

1.1 臨床資料

收集江西省婦幼保健院2012年03月至2013年10月新鮮宮頸組織標(biāo)本80例，其中宮頸鱗癌Ⅱ期中分化組織為40例，CIN組織為20例，因子宮腺肌癥、子宮肌瘤等子宮良性病變行全子宮切除的正常宮頸組織20例作為對照組。其中40例宮頸癌組織中患者年齡≤50歲22例，>50歲18例；腫瘤直徑≤4 cm 23例，>4 cm 17例；腫瘤類型：潰瘍型5例，頸管型2例，內(nèi)生型9例，外生型24例。所有的宮頸標(biāo)本離體后30 min內(nèi)放到液氮中冷凍后轉(zhuǎn)移到-80 ℃冰箱中保存。

納入標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)：①所有的CIN宮頸組織標(biāo)本和宮頸鱗癌組織均經(jīng)活組織病理檢查證實(shí)；②所有患者術(shù)前都沒有經(jīng)過物理治療、放療、化療等治療；③宮頸鱗癌組織經(jīng)宮頸活檢術(shù)獲得，CIN組織來自行宮頸錐切術(shù)切除的組織。④宮頸癌按2009年宮頸癌FIGO臨床分期進(jìn)行分期。

1.2 方法

應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)RT-PCR技術(shù)，檢測20例正常宮頸組織、20例宮頸鱗狀上皮內(nèi)瘤樣病變組織及40例宮頸癌組織的miRNA-145表達(dá)情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

從宮頸癌組織、CIN組織及正常宮頸組織中分別提取RNA，經(jīng)RT-PCR所得目的基因與內(nèi)參基因U6的灰度值比值結(jié)果見表1，圖1。宮頸癌組織中miR-145相對表達(dá)量為(0.400±0.242)，明顯低于CIN組織(0.742±0.419)，低于正常宮頸組織(1.082±0.478)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=28.476，P<0.001)，三組之間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示miR-145有可能參與宮頸癌的惡性生物學(xué)行為。

表1 miR-145在三組組織中的表達(dá)情況

注：①為對照組和CIN組比較，②為對照組與宮頸癌組比較，③為CIN組和宮頸癌組比較。

圖1 miR-145在不同宮頸組織中的表達(dá)情況

3 討論

宮頸癌是1種常見的婦科惡性腫瘤，其中鱗癌超過70%。抑癌基因和癌基因的表達(dá)異?；蚴Ш猓荒苡行Э刂萍?xì)胞的增殖和凋亡，在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中起至關(guān)重要的作用。miRNA作為生物體內(nèi)1種重要的基因調(diào)控分子，其在疾病中的作用特別是在腫瘤中的作用是近年來研究的熱點(diǎn)。信號通路和腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，隨著人們對惡性腫瘤研究的不斷深入，越來越多的信號通路被發(fā)現(xiàn)，其中PI3K信號通路在腫瘤中的作用越來越受重視。miRNAs在宮頸癌組織中表達(dá)上調(diào)或下調(diào)，推斷其可能通過調(diào)控其靶基因參與多種信號通路，在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中起著癌基因或抑癌基因的作用。miR-145是最近研究比較多的1種microRNA，其在腫瘤的形成、發(fā)生、發(fā)展中的作用越來越受重視。

Martinez等[4]利用Northern blot研究發(fā)現(xiàn)miR-143、miR-145和miR-218在HPV-16感染的宮頸癌細(xì)胞株中表達(dá)低于正常宮頸組織，同時(shí)該結(jié)果和其熒光定量PCR研究的結(jié)果一致。Wang等[5]運(yùn)用miRNA微陣列技術(shù)結(jié)合RNA印跡檢測發(fā)現(xiàn)miR-145在宮頸癌組織中的表達(dá)比在鄰近正常宮頸組織中低，為進(jìn)一步研究miR-145的低表達(dá)對宮頸癌發(fā)生、發(fā)展的作用，其利用人工合成的miR-145轉(zhuǎn)染到HeLa細(xì)胞中，發(fā)現(xiàn)上調(diào)miR-145能抑制HeLa細(xì)胞的生長，從而預(yù)測miR-145能抑制宮頸癌細(xì)胞生長和增殖，在宮頸癌細(xì)胞惡性過程中起著很重要的作用。Huang[6]的研究表明miR-145在晚期小細(xì)胞宮頸癌組織(FIGO IB2-Ⅳ)中的表達(dá)量明顯低于早期宮頸癌組織(FIGOI B1)。Shi等[7]的研究也表明miR-145在宮頸癌組織中低表達(dá)，并且表明miR-145能夠抑制宮頸癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。國內(nèi)郭麗芬等[8]運(yùn)用原位雜交技術(shù)研究20例正常宮頸組織、43 例CIN組織，68 例宮頸癌組織的miR-145表達(dá)發(fā)現(xiàn)miR-145在CIN Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中陽性表達(dá)逐漸下降，而在子宮頸癌組織中miR-145陽性表達(dá)率最低，推測miR-145可能參與了宮頸癌發(fā)生及發(fā)展的過程，可以為宮頸癌患者的治療和預(yù)后判斷提供依據(jù)。這些研究結(jié)果均提示宮頸癌組織中miR-145的異常表達(dá)在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中的作用不可忽視。

類似于上述研究結(jié)果，本研究發(fā)現(xiàn)miR-145的相對表達(dá)量在宮頸癌組織中為(0.400±0.242)，明顯低于CIN組織(0.742±0.419)，低于正常宮頸組織(1.082±0.478)，可見在正常宮頸組織、CIN組織和宮頸癌組織中miR-145的相對表達(dá)量逐漸下降，差異有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05 )，兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由此推測低表達(dá)的miR-145可能與宮頸癌發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。本研究將進(jìn)一步研究關(guān)于miR-145與宮頸鱗癌臨床病理特征之間關(guān)系，預(yù)示miR-145可能通過調(diào)節(jié)某一癌基因發(fā)揮作用，影響宮頸癌細(xì)胞的生物學(xué)特性。

[1] 曹漢毅主編.婦科常見腫瘤診治指南〔M〕.北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:62.

[2] Holowaty P,Miller AB,Rohan T,et al.Natural history of dysplasia of the uterine cervix〔J〕.J Natl Cancer Inst,1999，91(3):252-258.

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(編輯：吳小紅)

Expression of miRNA-145 in Different Cervical Tissues

YUJinmei，ANYunting，DAIHongchun.

JiangxiMaternalandChildHealthCareHospital,NanChang,330006

Objective To explore the expression of miR-145 in normal cervical tissues.Methods The expressions of miR-145 in 20 cases of normal cervical tissues，20 cases of human cervical intraepithelial neoplasias tissues and 40 cases of stageⅡ cervical cancer were detected by RT-PCR.Results The expression of miR-145(0.400±0.242)in cervical cancer tissues was significantly lower than those of cervical intraepithelial neoplasia tissues(0.742±0.419) and normal cervical tissues(1.082±0.478),and the difference was significant(P<0.001).Conclusion The expression of miR-145 in cervical cancer tissues is less than the cervical intraepithelial neoplasia tissues and normal cervical tissues,those results suggest that miR-145 probably participate in the occurrence and development of cervical cancer.

Cervical cancer；miRNA-145

330006 江西省婦幼保健院

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.11.003

R737.33

A

1001-5930(2016)11-1747-02

2016-04-29

2016-08-08)