陳小庚, 魏杰淼, 閆虹

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臨床研究

肺炎支原體肺炎合并肺外表現(xiàn)患兒外周血輔助性T細(xì)胞表達(dá)水平分析

陳小庚, 魏杰淼, 閆虹

目的 分析肺炎支原體肺炎(MPP)合并肺外表現(xiàn)患兒外周血輔助性T細(xì)胞表達(dá)水平。方法 選擇2015年1月至12月在沈陽市兒童醫(yī)院門診就診或住院治療的MPP患兒97例，入選對象均在開始治療前接受了外周血輔助性T細(xì)胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)檢測，并與同期體檢結(jié)論正常兒童(對照組，35例)相同測試結(jié)果比較。結(jié)果 MPP組外周血CD3+、CD4+表達(dá)強度及CD4+/CD8+比值均明顯低于對照組，而CD8+水平則明顯高于后者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。97例MPP患兒中，合并肺外表現(xiàn)者43例(44.33%)，合并肺外表現(xiàn)組外周血CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明顯低于無肺外表現(xiàn)組，而CD8+水平則明顯高于后者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 MPP患兒存在著明確的外周血輔助性T細(xì)胞表達(dá)異常，合并肺外表現(xiàn)者變化更為顯著。

肺炎支原體肺炎； 肺外表現(xiàn)； 輔助性T細(xì)胞； 兒童

肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae，MP)是中國兒童呼吸道感染極為常見的病原體，好發(fā)于幼兒及學(xué)齡前兒童。MP感染不但帶來了呼吸系統(tǒng)病變，還會引發(fā)肺外臟器損傷，甚至出現(xiàn)諸多臟器、系統(tǒng)共同受累，后者更易使肺炎支原體肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia，MPP)病情呈現(xiàn)多元化、復(fù)雜化，發(fā)生臨床上的誤診、誤治[1-2]。新近認(rèn)為[3-5]，MP發(fā)生和進展與人體內(nèi)細(xì)胞免疫關(guān)系密切，MPP患兒是否合并肺外損傷的免疫學(xué)機制也有所不同，但迄今為止，國內(nèi)專項涉及這方面內(nèi)容報道不多。筆者連續(xù)選擇近一年在沈陽市兒童醫(yī)院門診就診或住院治療的MPP患兒97例，他們均在治療前接受了外周血輔助性T細(xì)胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)檢測，并按是否合并肺外損傷進行分組，并與同期體檢結(jié)論正常兒童(對照組，32例)相同檢查結(jié)果比較，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2015年1月至12月在沈陽市兒童醫(yī)院門診就診或住院治療的MPP患兒97例，其中男58例，女39例；年齡1～14歲，平均(6.03±2.94)歲。選取同期在本院健康體檢結(jié)論正常兒童35例為對照組，其中男22例，女13例；年齡1～14歲，平均(6.29±2.61)歲。兩組兒童的年齡和性別比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn) 參照《實用小兒呼吸病學(xué)》中MPP診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) (1)符合上述MPP診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)年齡≤14歲；(3)患兒家屬知情同意。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) (1)近期急、慢性感染性疾病患兒；(2)有心、肝、腎及神經(jīng)系統(tǒng)疾病史患兒；(3)近3個月接受激素或免疫抑制劑治療患兒。

1.5 外周血輔助性T細(xì)胞表達(dá)水平測定 入選對象均在空腹8 h后抽取靜脈血8 mL，高速離心10 min后，分離血清，保存于超低溫冰箱待檢。機器采用美國FC-500-MPL流式細(xì)胞儀，外周血輔助性T細(xì)胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)測定由海豐翔生物科技有限公司提供試劑盒，按照使用說明書規(guī)定步驟操作。

1.6 觀察指標(biāo) CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值。

2 結(jié)果

2.1 兩組對象外周血輔助性T細(xì)胞表達(dá)水平比較 見表1。

表1 兩組對象外周血輔助性T細(xì)胞表達(dá)水平比較

表1結(jié)果表明，MPP組外周血CD3+、CD4+表達(dá)強度及CD4+/CD8+比值均明顯低于對照組，而CD8+水平則明顯高于后者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 有無肺外表現(xiàn)MPP患兒外周血輔助性T細(xì)胞表達(dá)水平表達(dá)水平比較 97例MPP患兒中，合并肺外表現(xiàn)者43例(44.33%)，無肺外表現(xiàn)者54例(55.67%)。有無肺外表現(xiàn)MPP患兒外周血輔助性T細(xì)胞表達(dá)水平比較見表2。

表2 有無肺外表現(xiàn)MP患兒外周血輔助性T細(xì)胞表達(dá)水平比較

表2結(jié)果表明，合并肺外表現(xiàn)組外周血CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明顯低于無肺外表現(xiàn)組，而CD8+水平則明顯高于后者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

各種T淋巴細(xì)胞是人體內(nèi)免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用的細(xì)胞群，輔助性T細(xì)胞主要發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能，其中CD4+協(xié)調(diào)B細(xì)胞完成分化，并產(chǎn)生抗體，而CD8+則抑制這類抗體合成、分泌及刺激T細(xì)胞增殖。迄今為止，MPP發(fā)病確切機制不完全明了，目前主要傾向于免疫調(diào)節(jié)紊亂學(xué)說，發(fā)生了免疫抑制及免疫逃逸現(xiàn)象。MP是介于細(xì)菌與病毒之間沒有細(xì)胞壁的一種原核細(xì)胞微生物，隨著各種診斷技術(shù)完善及提高，MPP患病率明顯上升，其主要癥狀為發(fā)熱、頭痛、咽痛及劇烈干性嗆咳，部分患者還伴有多系統(tǒng)及多器官肺外并發(fā)癥，且較多累及血液、消化、心臟、泌尿以及神經(jīng)系統(tǒng)。已有大量資料[7-10]證實，輔助性T細(xì)胞及其分泌的炎性細(xì)胞因子體內(nèi)表達(dá)失常在MP呼吸道感染過程中扮演重要角色，并直接引發(fā)了患者呼吸系統(tǒng)免疫損傷；另一方面，MP抗原與人體宿主的心、肺、肝、腦、腎各主要臟器及平滑肌組織擁有相同抗原，MP入侵后產(chǎn)生了自身相應(yīng)抗體，結(jié)合后形成免疫復(fù)合物，導(dǎo)致肺及肺外靶器官發(fā)生病變，加重了MPP病情。筆者連續(xù)選擇近一年在沈陽市兒童醫(yī)院門診就診或住院治療的MPP患兒為觀察對象，他們均在治療前接受了外周血輔助性T細(xì)胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)檢測，并按是否合并肺外損傷進行分組，并與同期體檢結(jié)論正常兒童(對照組，35例)相同檢查結(jié)果比較，研究發(fā)現(xiàn)，MPP組外周血CD3+、CD4+表達(dá)強度及CD4+/CD8+比值均明顯低于對照組，而CD8+水平則明顯高于后者；同時，合并肺外表現(xiàn)者外周血CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明顯低于無肺外表現(xiàn)組，而CD8+水平則明顯高于后者。這些數(shù)據(jù)均提示，MPP患兒存在著明確的外周血輔助性T細(xì)胞表達(dá)異常，其中，CD3+、CD4+及CD4+/CD8+表達(dá)明確低下，而CD8+表達(dá)增強，合并肺外表現(xiàn)者上述變化更為顯著。一些國內(nèi)同行[11-14]通過免疫熒光和補體介導(dǎo)方法發(fā)現(xiàn)，急性期及肺外并發(fā)癥組MPP患兒體內(nèi)CD3+、CD4+表達(dá)水平呈一過性降低，CD4+/CD8+比值顯著下降，抑制性T細(xì)胞(CD8+)表達(dá)明顯加強，這都說明，MPP患兒體內(nèi)負(fù)免疫調(diào)節(jié)機制消弱，導(dǎo)致發(fā)生過度免疫反應(yīng)。另幾位作者發(fā)現(xiàn)，將兩組缺少T細(xì)胞的SCID小鼠和免疫功能正常小鼠感染分別感染相同數(shù)量MP，后者的肺部癥狀明顯強于前者，這些提示決定MPP病情主要因素不是病原體本身而是T淋巴細(xì)胞功能狀態(tài)[15]。

總之，MPP患兒，特別是合并肺外表現(xiàn)者存在明顯的外周血相關(guān)輔助性T細(xì)胞表達(dá)低下或絕對量不足，這也可能是MPP發(fā)生機制之一，由此推論通過各種途徑補充及刺激機體增加輔助性T細(xì)胞，促進他們在體內(nèi)表達(dá)平衡，就可能減輕患兒體內(nèi)炎癥反應(yīng)，并保護自身及清除病原，同時，這些細(xì)胞免疫體內(nèi)表達(dá)狀態(tài)也可能成為MPP確診標(biāo)識和評估療效參照指標(biāo)。

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(本文編輯：李志文)

Expression of T helper cells in peripheral blood of children with Mycoplasma pneumonia complicated with extrapulmonary manifestations

CHENXiaogeng，WEIJiemiao，YANHong.

TheChildrenHospitalofShenyang，Shenyang110032，China.

Objective To analyze the expression level of T helper cells in peripheral blood of children with Mycoplasma pneumonia complicated with extrapulmonary manifestations.Methods We detected the peripheral T helper cells(CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/ CD8+)in the blood of the 97 selected continuous cases of children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia before starting treatment,who received treatment in the Children Hospital of Shenyang from Jan.to Dec.2015,and compared with the results of the normal children on the medical conclusions at the same test in the same period(control group,n=35).Results The expression intensity of the peripheral CD3+,CD4+, and ratio of CD4+ /CD8+ of the Mycoplasma pneumoniae pneumonia group were significantly lower than the control group,while that of CD8+ was higher (P<0.05～ 0.01).In the 97 children with Mycoplasma pneumoniae pneumonia,43 cases had extrapulmonary manifestations(44.33%), and the CD3+level,the CD4+ level,CD4+ /CD8+ ration in the group with extrapulmonary manifestations were obviously lower than the group without extrapulmonary manifestations,while the CD8+ level was higher than the latter(P<0.05～0.01).Conclusion Peripheral blood helper T cells are abnormally expressed in children with Mycoplasma pneumonia;these abnormalities are more obvious in the patients complicated with extrapulmonary manifestations.

Mycoplasma pneumoniae pneumonia; Extrapulmonary manifestations; T helper cells； Child

110032沈陽,沈陽市兒童醫(yī)院內(nèi)二科(陳小庚,閆虹),內(nèi)五科(魏杰淼)

陳小庚(1978-),女,主治醫(yī)師。研究方向:小兒感染性肺疾病診斷及治療

陳小庚,E-mail:13889380301@163.com

10.3969/j.issn.1674-3865.2016.05.022

R725.6

A

1674-3865(2016)05-0525-03

2016-05-12)