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        大黃配伍藥對的瀉火作用變化及其共性關(guān)系研究

        2016-12-02 07:10:01麥藍(lán)尹鄧麗紅
        廣西中醫(yī)藥 2016年4期
        關(guān)鍵詞:甘遂干酵母瀉火

        龐 婷 謝 臻 陳 勇 麥藍(lán)尹 鄧麗紅

        廣西中醫(yī)藥大學(xué)530001南寧市明秀東路179號

        ·實(shí)驗(yàn)研究·

        大黃配伍藥對的瀉火作用變化及其共性關(guān)系研究

        龐 婷 謝 臻*陳 勇 麥藍(lán)尹 鄧麗紅

        廣西中醫(yī)藥大學(xué)530001南寧市明秀東路179號

        目的:研究大黃枳實(shí)、大黃黃連、大黃牡丹、大黃桃仁、大黃甘遂5個藥對配伍后大黃瀉火作用的變化及其共性關(guān)系。方法:將90只實(shí)驗(yàn)動物隨機(jī)分為生理鹽水組、模型組、阿司匹林組、大黃組、大黃枳實(shí)組、大黃黃連組、大黃牡丹組、大黃桃仁組、大黃甘遂組,每組10只。大黃組及大黃藥對組(大黃生藥量為15 g/kg)按10 ml/kg的容量給藥3 d后,于第4 d尾靜脈注射內(nèi)毒素及干酵母復(fù)制大鼠發(fā)熱模型,0.5 h后分別灌胃給藥,觀察比較各大鼠給藥后7 h內(nèi)的體溫變化。結(jié)果:與模型組比較,大黃各藥對配伍后其瀉火作用均有不同程度的改變,其中大黃組、大黃黃連組對內(nèi)毒素及干酵母所致的發(fā)熱具有顯著退熱作用;且與大黃組比較,大黃黃連組對內(nèi)毒素及干酵母所致的發(fā)熱具有更顯著的退熱作用。結(jié)論:大黃藥對配伍后其瀉火作用均有不同程度的改變,其中大黃黃連組的瀉火作用最強(qiáng),與大量文獻(xiàn)報道的大黃藥對配伍后蒽醌類成分的變化相對應(yīng)。

        大黃藥對;配伍;瀉火;變化;共性關(guān)系

        大黃(Rhei Radix et Rhizoma)為臨床常用瀉下通便的中藥,常稱“將軍”,其主要用法為瀉下、活血祛瘀、瀉火、清熱解毒及利水,臨床上通常將大黃與其他藥味配伍使用,如大黃與黃芩、黃連、肉桂等配伍使用,從而改變其化學(xué)成分,降低肝毒性或提高其中某味藥的功效或選擇不同的功效[1-3]。目前報道的大多是大黃與多味藥配伍前后化學(xué)成分含量及藥效的變化[4-6],未能反映出大黃與單味藥配伍后其瀉下功效的改變及在不同配伍中體現(xiàn)的共性關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)從大黃的瀉火功效入手,選取大黃經(jīng)典常用組方大承氣湯、瀉心湯、大黃牡丹湯、桃核承氣湯和大陷胸湯中的藥對——大黃枳實(shí)、大黃黃連、大黃牡丹、大黃桃仁和大黃甘遂,研究以上藥對配伍后大黃瀉火功效的變化及共性關(guān)系,為進(jìn)一步系統(tǒng)地探索大黃配伍的物質(zhì)基礎(chǔ)提供依據(jù)?,F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

        1 實(shí)驗(yàn)材料

        1.1 儀器HWS12水浴鍋(上海一恒公司);BP211D電子分析天平(德國Sartorius);D24UV純水儀(法國Merck millipore);WND-200萬能粉碎機(jī)(天津太斯特儀器有限公司);MC-246電子體溫計(歐姆龍)。

        1.2 藥物與試劑中藥飲片:大黃(四川產(chǎn),批號:160307001);枳實(shí)(江西產(chǎn),批號:160101771);黃連(四川產(chǎn),批號:151007231);牡丹皮(安徽產(chǎn),批號:1602188);桃仁(河北產(chǎn),批號:2903070);醋甘遂(陜西產(chǎn),批號:20140701)。生大黃、枳實(shí)、黃連及桃仁購于廣東康美藥業(yè)有限公司,牡丹皮及醋甘遂購于廣東康美中藥飲片有限公司。取大黃及5個藥對的中藥飲片適量,大黃5個藥對(大黃枳實(shí)、大黃黃連、大黃牡丹、大黃桃仁、大黃甘遂)分別按大承氣湯、瀉心湯、大黃牡丹湯、桃核承氣湯和大陷胸湯中的1∶1、1∶1.5、1∶0.25、1∶1、1∶0.1的藥物比例配伍,加10倍量水先浸泡30 min后加熱至微沸,控制微沸狀態(tài)繼續(xù)煎煮20 min,濾布濾過,濃縮成浸膏,用時再配成相應(yīng)濃度的藥液即可。

        阿司匹林腸溶片(湖南,生產(chǎn)批號:150703);大腸桿菌內(nèi)毒素(Lippolysaccharide from Escherichia coli 055:B5,批號:L8880,Sigma);高活性干酵母(湖北,20150315);凡士林、生理鹽水及實(shí)驗(yàn)用水為純化水。

        1.3 動物清潔級SD大鼠,體重180±20 g,雌雄各半。實(shí)驗(yàn)動物均由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供,生產(chǎn)許可證號:2015-0003,動物質(zhì)量合格證號:0001757。

        2 方法

        2.1 大黃及其配伍藥對對干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響實(shí)驗(yàn)前連續(xù)3 d測量大鼠體溫,每天2次,選取基礎(chǔ)體溫36.5~38℃的SD大鼠90只,隨機(jī)分為9組:大黃組、大黃枳實(shí)組、大黃黃連組、大黃牡丹組、大黃桃仁組、大黃甘遂組、生理鹽水組、阿司匹林腸溶片組、模型組。每組10只。大黃組及大黃各藥對組分別連續(xù)灌胃大黃提取液(按大黃生藥量15g/kg計)3 d,每天2次。各組動物于第4 d實(shí)驗(yàn)前測3次肛溫作為基礎(chǔ)體溫,除生理鹽水組外,余組動物均尾靜脈注射(20 μg/kg)內(nèi)毒素溶液復(fù)制發(fā)熱模型[7],0.5 h后灌胃各中藥提取液及阿司匹林腸溶片溶液(劑量為20.5 g/kg),于給藥后0.5 h、1.5 h、2 h、4 h、5 h、6 h、7 h測定各組動物肛溫,記錄數(shù)據(jù)。

        2.2 大黃及其配伍藥對對內(nèi)毒素所致大鼠發(fā)熱的影響實(shí)驗(yàn)前連續(xù)3 d測量大鼠體溫,每天2次,選取基礎(chǔ)體溫36.5~38℃的SD大鼠90只,隨機(jī)分為9組:大黃組、大黃枳實(shí)組、大黃黃連組、大黃牡丹組、大黃桃仁組、大黃甘遂組、生理鹽水組、阿司匹林腸溶片組、模型組。大黃組及大黃藥對組分別連續(xù)灌胃各大黃藥對提取液(按大黃生藥量15g/kg計)3 d,每天2次。各組動物于第4 d實(shí)驗(yàn)前測3次肛溫作為基礎(chǔ)體溫,除生理鹽水組外,余組動物均背部皮下注射(20 μg/kg)干酵母混懸液復(fù)制發(fā)熱模型[8],0.5 h后灌胃各中藥提取液及阿司匹林腸溶片溶液(劑量為20.5 g/kg),于給藥后0.5 h、1.5 h、2 h、4 h、5 h、6 h、7 h測定各組動物肛溫,記錄數(shù)據(jù)。

        2.3 統(tǒng)計學(xué)處理使用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用方差分析后的t檢驗(yàn)及GraphPad Prisam6.0作圖。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        3 結(jié)果

        3.1 大黃及其配伍藥對對干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響結(jié)果見表1、圖1。

        表1 大黃及其配伍藥對對干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響(x±s,n=10)

        圖1 大黃及其配伍藥對對干酵母所致大鼠發(fā)熱的影響

        表1顯示,與模型組比較,除大黃桃仁組外,大黃組及大黃其他藥對組第7 h的體溫均明顯下降(P均<0.05),表明除大黃桃仁組外大黃各藥對均有一定的瀉火作用;與模型組比較,大黃組、大黃枳實(shí)組、大黃黃連組及大黃甘遂組第2 h、5 h、6 h的體溫均明顯下降(P<0.05);與大黃組比較,大黃黃連組第4 h、5 h、6 h的體溫明顯下降(P均<0.05),表明與模型組及大黃組比較,大黃黃連組對干酵母所致大鼠發(fā)熱的瀉火作用更顯著。

        3.2 大黃及其配伍藥對對內(nèi)毒素所致大鼠發(fā)熱的影響結(jié)果見表2、圖2。

        表2 大黃及其配伍藥對對內(nèi)毒素所致大鼠發(fā)熱的影響(x±s,n=10)

        圖2 大黃及其配伍藥對對內(nèi)毒素所致大鼠發(fā)熱的影響

        表2顯示,與模型組比較,大黃及其配伍藥對對內(nèi)毒素所致的大鼠發(fā)熱均有不同程度的退熱作用,其中大黃組、大黃黃連組和大黃甘遂組1.5~7 h的體溫與模型組比較大多有顯著性差異(P<0.05),與模型組比較,大黃及其配伍藥對第2 h的體溫均有顯著下降(均P<0.05);與大黃組比較,大黃黃連組4~6 h的體溫有顯著性差異(P<0.05),表明大黃黃連組對內(nèi)毒素所致發(fā)熱的退熱作用更顯著。

        4 討論

        干酵母致熱和內(nèi)毒素致熱是經(jīng)典的研究體溫變化的實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,本?shí)驗(yàn)采用此兩種發(fā)熱模型探討大黃5個藥對的瀉下功效變化及變化規(guī)律,為大黃藥對配伍的物質(zhì)基礎(chǔ)研究奠基。根據(jù)前期急毒實(shí)驗(yàn)及大黃臨床用藥,本實(shí)驗(yàn)選擇大黃的給藥劑量為15 g/kg。阿司匹林腸溶片為常用的解熱鎮(zhèn)痛藥,可避免首過效應(yīng),用于感冒、發(fā)熱、頭痛等,價廉且療效顯著,故本實(shí)驗(yàn)選擇阿司匹林腸溶片作為陽性對照藥。干酵母或內(nèi)毒素復(fù)制發(fā)熱模型后動物體溫變化較明顯,且與生理鹽水組比較均有顯著性差異,故本實(shí)驗(yàn)選擇干酵母或內(nèi)毒素復(fù)制發(fā)熱0.5 h后給藥,觀察比較大黃及其配伍藥對對干酵母或內(nèi)毒素復(fù)制發(fā)熱的體溫變化。

        表1、圖1及表2、圖2表明大黃及大黃配伍藥對后其瀉火作用總體上雖有一定的差別,但其變化在一定程度上對大黃的作用存在共性關(guān)系。表1、圖1表明,與模型組比較,除大黃桃仁組外,大黃及大黃其他配伍藥對組第7 h的體溫均有明顯下降(P<0.05),顯示除大黃桃仁組外,大黃及大黃配伍藥對對干酵母所致發(fā)熱均有一定的瀉火作用;與大黃組比較,大黃黃連組第4~6 h的體溫明顯下降(P均<0.05),表明與模型組及大黃組比較,大黃黃連組對干酵母所致大鼠發(fā)熱的瀉火作用更顯著。表2、圖2表明,與模型組比較,大黃組、大黃黃連組和大黃甘遂組的體溫在大多時間點(diǎn)上均有明顯下降(P<0.05),表明大黃及大黃黃連、大黃甘遂藥對對內(nèi)毒素所致大鼠發(fā)熱均有明顯的退熱作用;與大黃組比較,大黃黃連組對內(nèi)毒素所致發(fā)熱的退熱作用更顯著。

        有研究表明,大黃與黃連配伍后總蒽醌類溶出降低[9],但在特定比例內(nèi)配伍對大黃的蒽醌類成分(除大黃酸外)的溶出具有助溶作用[10]。由本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,大黃與黃連配伍后其瀉火作用與模型組及大黃組比較均有顯著差異,表明大黃與黃連配伍后其瀉火作用增強(qiáng),原因可能為大黃的蒽醌類成分(除大黃酸外)溶出增加;大黃配伍甘遂對干酵母及內(nèi)毒素所致的發(fā)熱也有較好的退熱作用,這可能與甘遂在大黃蒽醌類酸性條件下其主要成分萜類部分水解成其他成分,蒽醌類含量發(fā)生變化相關(guān),具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究探討;桃仁的主要成分為脂肪酸,與大黃配伍后降低甚至消除了大黃的瀉火作用,原因可能是大黃與富含脂肪酸的桃仁配伍后,脂肪酸增加了大黃酸的溶出[11],從而影響蒽醌類成分的比例,具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究探討。

        大黃與部分藥物配伍后大都會引起蒽醌類成分含量的增加或減少,有研究報道大黃蒽醌類成分對肝腎存在潛在毒性[12],由此可以推測大黃配伍藥對后蒽醌類成分含量降低,減輕了大黃的肝毒性,從而增強(qiáng)大黃的瀉火作用,但兩者的相關(guān)性有待進(jìn)一步研究驗(yàn)證。大黃與含生物堿、萜類等化合物的藥味配伍,可使大黃蒽醌類與之發(fā)生酸堿中和反應(yīng)或水解作用,從而降低大黃酸的含量,增強(qiáng)大黃的瀉火作用;而與富含脂肪酸等化合物的藥味配伍則可能使大黃酸的溶出增加,從而降低藥對的瀉火作用。實(shí)驗(yàn)中大黃各藥對配伍后對干酵母及內(nèi)毒素所致發(fā)熱的退熱瀉火作用變化,可能與配伍后化學(xué)成分的溶出、轉(zhuǎn)移或轉(zhuǎn)化有關(guān),在一定程度上具有共性關(guān)系,且有一定規(guī)律可尋。

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        (2016-07-11收稿/編輯陳明偉)

        R285.5

        A

        1003-0719(2016)04-0067-04

        國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號:81360524);廣西研究生教育創(chuàng)新計劃資助項(xiàng)目(編號:JGY2013041);廣西教育科學(xué)“十二五”規(guī)劃課題(編號:2013C038)

        *通信作者,博士,研究生導(dǎo)師;E-mail:xie zhen@126.com

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