單非

（遼寧省阜新市糧油監(jiān)測(cè)站，遼寧阜新 123000）

轉(zhuǎn)基因糧食作物的研究進(jìn)展與PCR法檢測(cè)研究

單非

（遼寧省阜新市糧油監(jiān)測(cè)站，遼寧阜新 123000）

農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，通過轉(zhuǎn)基因糧食作物的應(yīng)用，可顯著的提升作物的產(chǎn)量，降低傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中存在的污染，保證生態(tài)環(huán)境健康的發(fā)展，并提高食品的安全性，滿足人們對(duì)食品的需求，促進(jìn)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。近年來，轉(zhuǎn)基因糧食作物的研究不斷增多，取得了良好的研究成果，而且用于檢測(cè)轉(zhuǎn)基因糧食作用的方法也逐漸增多，促進(jìn)了研究的發(fā)展，本文中，主要介紹了轉(zhuǎn)基因糧食作物的研究進(jìn)展與PCR法在檢測(cè)中的應(yīng)用。

轉(zhuǎn)基因糧食作物 PCR法 檢測(cè) 研究進(jìn)展

隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)水平的進(jìn)步，轉(zhuǎn)基因糧食作物的種類不斷增多，對(duì)于有利于人們身體健康方面的作用，目前尚未明確，但可以確定的是轉(zhuǎn)基因糧食作物可能會(huì)產(chǎn)生一定的危害，因此，需要對(duì)轉(zhuǎn)基因作物進(jìn)行科學(xué)有效的檢測(cè)，PCR法為眾多檢測(cè)方法中的一種，引來眾多研究人員的關(guān)注，獲得了比較多的研究成果，而且在檢測(cè)實(shí)踐中也有著比較廣泛的應(yīng)用。

1 轉(zhuǎn)基因糧食作物的研究進(jìn)展

1.1 轉(zhuǎn)基因水稻研究進(jìn)展

自從首株轉(zhuǎn)基因水稻面世后，關(guān)于轉(zhuǎn)基因水稻的研究不斷的增多，而且取得了飛速的發(fā)展，多項(xiàng)轉(zhuǎn)基因水稻研究成果已經(jīng)開始邁入田間試驗(yàn)階段，轉(zhuǎn)基因水稻正在逐漸的向著產(chǎn)業(yè)化方向發(fā)展。現(xiàn)階段，研究出的轉(zhuǎn)基因水稻品種主要包含以下幾種：第一，抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻，水稻種植中，影響水稻產(chǎn)量高低的一個(gè)重要因素即為蟲害，傳統(tǒng)水稻種植中，以噴灑農(nóng)藥的方式來防治蟲害，解決蟲害的同時(shí)，增加水稻生產(chǎn)成本，而且會(huì)極大的危害生態(tài)環(huán)境，抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻研發(fā)之后，可以提升水稻植株自身的抗蟲能力，降低蟲害帶來的影響［1］；第二，抗病轉(zhuǎn)基因水稻，水稻生長過程中，發(fā)生浸染性病害或生理性病害之后，不僅會(huì)造成減產(chǎn)，甚至?xí)?dǎo)致植株死亡，抗病轉(zhuǎn)基因水稻研究成功后，可以顯著的提升水稻的抗病能力，現(xiàn)階段，Xa21轉(zhuǎn)基因雜交稻組合正在田間進(jìn)行試驗(yàn)，此種水稻具有良好的抗白葉枯病的能力。除了抗病、抗蟲轉(zhuǎn)基因水稻之外，現(xiàn)已經(jīng)研究出抗逆境、抗除草劑的轉(zhuǎn)基因水稻，具有良好的研究進(jìn)展。

1.2 轉(zhuǎn)基因玉米研究進(jìn)展

玉米是我國主要的糧食作用之一，可在很大程度上保障我國糧食安全，并為眾多的工業(yè)生產(chǎn)、飼料生產(chǎn)等提供原材料能源。玉米育種中，轉(zhuǎn)基因技術(shù)主要在抗病蟲、抗除草劑等方面應(yīng)用。在抗病蟲轉(zhuǎn)基因玉米方面，培育玉米種子時(shí)，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，培育出雜交玉米種子，提高玉米的抗病抗蟲能力，現(xiàn)階段，T4代轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米、T1代轉(zhuǎn)基因抗病玉米等已經(jīng)在吉林、山東等省份中進(jìn)行了相應(yīng)的種植試驗(yàn)。培育抗除草劑玉米品種時(shí)，在其中加入抗除草劑耐性基因，比如Bar基因，可以提高玉米品種的抗除草劑能力，現(xiàn)階段，抗咪唑啉酮玉米、抗Liberty玉米、抗草甘膦玉米等品種均已培育成功。此外、耐鹽、耐旱轉(zhuǎn)基因玉米、抗病毒轉(zhuǎn)基因玉米、高植酸酶轉(zhuǎn)基因玉米等均在研究當(dāng)中。

1.3 轉(zhuǎn)基因小麥研究進(jìn)展

與水稻和玉米的轉(zhuǎn)基因技術(shù)相比，小麥轉(zhuǎn)基因的研究開始的比較晚，不過也取得了比較好的研究進(jìn)展?？钩嗝共∞D(zhuǎn)基因小麥?zhǔn)且环N抗病小麥品種，可以提升小麥抗赤霉病的能力，降低小麥患赤霉病的幾率。蚜蟲對(duì)小麥的生長危害非常大，影響小麥種植的產(chǎn)量，以往防治蚜蟲的主要措施為采用殺蟲劑，防治的效果比較好，但殺蟲劑同樣會(huì)將蚜蟲的天敵消滅，導(dǎo)致生態(tài)平衡被破壞，而抗蚜蟲轉(zhuǎn)基因小麥研究成功后，可有效的解決這一問題［2］。

2 PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因糧食作物的研究

2.1 PCR法基本原理

PCR法是指聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法，1983年，由美國的科學(xué)家Mullis發(fā)明，是一種在體外將特定基因或DNA序列快速擴(kuò)增的方法，因此，PCR法也被稱之為基因體外擴(kuò)增法。在PCR法中，將已知的待擴(kuò)增的DNA片段序列放置在試管中，利用人工合成的方法，制成引物和底物，與現(xiàn)有的DNA鏈互補(bǔ)，其中，引物2段，為寡核苷酸，底物4種，為脫氧核苷酸，通過高溫聚合酶，在體外進(jìn)行周期反應(yīng)，并不斷的循環(huán)，實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增［3］。PCR法的優(yōu)點(diǎn)為靈敏性、特異性及效率性都比較高，在轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)中有著比較廣泛的應(yīng)用。

2.2 在轉(zhuǎn)基因糧食作物檢測(cè)中的應(yīng)用研究

對(duì)于轉(zhuǎn)基因糧食作物的檢測(cè)來說，檢測(cè)的基礎(chǔ)可以采用兩種，一種為DNA RNA，一種為蛋白質(zhì)水平，現(xiàn)階段，常用的檢測(cè)方法包含PCR法、基因芯片法等，這其中，由于其他檢測(cè)方法均存在一定的不足之處或局限性，因此，應(yīng)用最為廣泛的為PCR法。以轉(zhuǎn)基因玉米檢測(cè)為例，應(yīng)用PCR法檢測(cè)時(shí)，首先在市場(chǎng)中隨機(jī)抽取非轉(zhuǎn)基因玉米種子及轉(zhuǎn)基因玉米種子，回到實(shí)驗(yàn)室中后，利用DNA提取試劑盒，并利用DNA聚合酶、DNA分子量標(biāo)記等試劑進(jìn)行提取和制備DNA試驗(yàn)，提取和制備試驗(yàn)完成之后，需要確定引物，以便于完成擴(kuò)增試驗(yàn)。隨后，利用選擇的的引物，利用PCR法，對(duì)選中的全部玉米種子進(jìn)行特異性擴(kuò)增，最后，依據(jù)擴(kuò)增試驗(yàn)結(jié)果，鑒定PCR產(chǎn)物，比如選擇的轉(zhuǎn)基因玉米種子為MON810、Bt11、Bt176和MON863時(shí)，實(shí)驗(yàn)時(shí)選擇的陽性對(duì)照為經(jīng)農(nóng)業(yè)部轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)樣品玉米樣品，而陰性對(duì)照則選擇為非轉(zhuǎn)基因玉米鄭單958，經(jīng)過上述的試驗(yàn)過程之后，DNA提取結(jié)果顯示，玉米總DNA提取之后，利用zSSⅡb進(jìn)行Ⅱ擴(kuò)增時(shí)，目的片段可擴(kuò)增出88bp大小，與轉(zhuǎn)基因糧食作物PCR檢測(cè)的要求相符合。

3 結(jié)語

現(xiàn)階段，隨著糧食作物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，轉(zhuǎn)基因糧食作物的品種越來越多，而且多數(shù)轉(zhuǎn)基因品種已經(jīng)開始進(jìn)行田間試驗(yàn)，為糧食作物產(chǎn)量的提升提供了良好的保證。PCR法為檢測(cè)糧食作物中轉(zhuǎn)基因成分的有效方法，敏感性及特異性都比較好，可以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性，而且檢測(cè)速度比加快，具有良好的檢測(cè)效果。

［1］倪娜，張智勇，李國瑞等.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2013，01：64-70.

［2］熊建文，彭端，覃曉娟等.轉(zhuǎn)植酸酶基因玉米的研究與安全評(píng)價(jià)［J］.基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2011，02：251-256.

［3］王甜，陳慶富.熒光定量PCR技術(shù)研究進(jìn)展及其在植物遺傳育種中的應(yīng)用［J］.種子，2007，02：56-61.

［4］王紅梅，張昌泉，李錢峰等.以谷蛋白GluA-2信號(hào)肽增強(qiáng)外源蛋白在轉(zhuǎn)基因水稻胚乳中的表達(dá)與積累［J］.作物學(xué)報(bào)，2015，04：524-530.