代 飛，范京惠，左玉柱，邸晶美，劉寶京，羅尚星，李清艷

( 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，河北 保定 071001）

保定市及周邊地區(qū)圓環(huán)病毒2型免疫情況調(diào)查

代 飛，范京惠，左玉柱**，邸晶美，劉寶京，羅尚星，李清艷*

( 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，河北 保定 071001）

從保定市周圍9個(gè)已免疫過豬圓環(huán)病毒2型疫苗的不同規(guī)模大小的豬場，共采集431份血清，其中，陽性抗體的血清數(shù)為266份，抗體陽性率為62.18%。陰性血清的血清數(shù)為113份，抗體率為26.22%。可疑血清數(shù)為50份，占收集血清的11.6%。由此可以得出，保定市周邊豬場的圓環(huán)疫苗免疫情況不理想。

保定；豬圓環(huán)2型；免疫情況

豬 圓 環(huán) 病 毒(PorcineCircovirus，PCV)屬于圓環(huán)病毒科(Circoviridae)，圓環(huán)病毒屬(Circovirus)，是目前發(fā)現(xiàn)最小的動(dòng)物病毒之一［1，2］。為無囊膜單股環(huán)狀DNA病毒。PCV 可分為PCV1 和PCV2兩種基因型。PCV2能導(dǎo)致豬群發(fā)病，PCV1不具有致病性。PCV2是引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎與腎病綜合征(Porcine dermatitis and nephropathy syndrome， PDNS)、豬先天性震顫(Congenita1 tremor of swi)、母豬繁殖障礙(Reproductivefai1ure)、豬呼吸道疾病綜合征(Porcine respiratory disease comp1ex， PRDC )的主要病原［3］，自1991年加拿大首次報(bào)道PMWS以來，該病已波及世界各地，在我國豬群中十分流行，臨床上常與豬高致病性繁殖與呼吸綜合征、豬口蹄疫以及豬細(xì)小病毒等混合感染、繼發(fā)感染，給全世界養(yǎng)豬業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失［4-5］；PCV 病毒粒子呈二十面體對稱，無囊膜，PCV2 基因組全長為 1 767 bp (PCV2b)或 1 768 bp(PCV2a)，PCV 基因組含有11 個(gè)開放閱讀框ORF1～ORF11，其中ORF1 和 ORF2 是最大的兩個(gè)開放閱讀框。ORF1編碼與病毒復(fù)制相關(guān)的兩個(gè)蛋白R(shí)ep 和 Rep’蛋白有關(guān)，ORF2 基因編碼病毒唯一的結(jié)構(gòu)蛋白 Cap 蛋白，Cap 蛋白能夠誘導(dǎo)機(jī)體的免疫應(yīng)答構(gòu)成病毒的核衣殼。本文利用ELISA方法對采集保定周邊的已免疫過豬圓環(huán)病毒疫苗的血清，調(diào)查了解豬圓環(huán)病毒疫苗的免疫情況，并評估發(fā)生豬圓環(huán)病毒病的潛在風(fēng)險(xiǎn)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)用豬血清來源

保定市及其周邊9個(gè)已免疫過豬圓環(huán)病毒疫苗的豬血清。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器酶標(biāo)儀（美國Thermo Scientific mu1tiskan FC型），離心機(jī)（美國Hea1 Force Neofuge 13R型），豬圓環(huán)病毒2型ELISA試劑盒，購自于深圳芬德生物技術(shù)有限公司。其他實(shí)驗(yàn)用品和耗材均有河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院免疫與微生物實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 方法

1.2.1 材料的采集與處理

采集各階段豬的全血，做好記錄（見表1），然后2 292 r/min離心5 min，冰箱4 ℃保存。

1.2.2 ELISA抗體檢測

依照PCV2的ELISA抗體檢測試劑盒的說明書進(jìn)行操作。

1.2.3 結(jié)果判定

加完終止液后，10 min內(nèi)在酶標(biāo)儀上測量各空的OD450值。OD450值大于等于0.38為陽性，樣品OD450值小于0.1為陰性。樣品值在0.1和0.38之值，判定為可疑。

2 結(jié)果

對9個(gè)養(yǎng)豬場431份血清，用ELISA試劑盒檢測抗體水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)陽性抗體的血清數(shù)為268份，抗體陽性率為62.18%。陰性血清的血清數(shù)為113份，抗體率為26.22%?？梢裳鍞?shù)為50份，占收集血清的11.6%（表2）。其中，經(jīng)產(chǎn)母豬的抗體陽性率為64.47%，后備母豬的抗體陽性率為52.63%，哺乳仔豬的抗體陽性率為61.31%，保育仔豬的抗體陽性率為65.88%（表3）。

表1 血清來源

表2 檢測結(jié)果

表1 血清來源

3 結(jié)論與討論

豬圓環(huán)病毒病是由豬圓環(huán)病毒感染引發(fā)的，以免疫抑制為主要特征的病毒性傳染病。目前，市場上還沒有有效的藥物來治療豬圓環(huán)病毒病，主要還是以預(yù)防為主。目前，市場上疫苗的類型主要是滅活疫苗和PCV2亞單位疫苗。豬群抗體水平低，可能有以下幾個(gè)原因；首先，可能是疫苗的運(yùn)輸、儲(chǔ)存、使用環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，疫苗要按說明書規(guī)定進(jìn)行儲(chǔ)存。豬場技術(shù)人員在注射疫苗的過程中出現(xiàn)操作失誤，注射器械不經(jīng)過嚴(yán)格的消毒。也可能豬群中感染了某些能夠引起免疫抑制的疾病。比如PRRS能破壞機(jī)體的免疫系統(tǒng)導(dǎo)致疫苗的免疫失敗。再有就是免疫程序不當(dāng)也會(huì)導(dǎo)致疫苗的免疫失敗。如果豬群在免疫疫苗之前使用了抗菌藥物，如：糖皮質(zhì)激素、鏈霉素、四環(huán)素等藥物。這些藥物能夠抑制動(dòng)物體內(nèi)抗體的產(chǎn)生，影響免疫效果。

從檢測結(jié)果來看，保定市周邊豬場的豬圓環(huán)病毒疫苗的免疫情況不夠理想，抗體陽性率只有50%～60%?？贵w水平過低不足以給豬群提供有效的免疫保護(hù)。

［1］TISCHER I，MIELDS W，WOLFF D，et a1.Studies on epidemio1ogy and pathogenicity of porcine circovirus［J］.Arch Viro1，1986，91：271-276.

［2］ MEEHAN B M，MC NEILLY F，TODD D，et a1. Characterization of nove1 circovirus DNAs associated with wasting syndromes in pigs［J］.J Gen Viro1，1998，79 (9)：2171-2179.

［3］SEGALES J，ALLAN G M，DOMINGO M.Porcine circovirus diseases［J］.Anim Hea，th Res Rev，2005，6(2)：119-142.

［4］ALLAN G M，ELLIS J A，Porcine circoviruses： A review ［J］.Vet DiagnInvest，2000，12：3-4.

［5］GUO L J，LU Y H，WEI Y W，et a1.Porcine circovirus type 2(PCV2)：genetic variation and new1y emerging genotype in China ［J］.Viro1 J，2010，7(1)：273.

2016-09-02）

河北農(nóng)業(yè)大學(xué)百名青年學(xué)術(shù)帶頭人培養(yǎng)計(jì)劃（編號(hào)0318011）

代飛（1990.08— ），河南鄧州人，預(yù)防獸醫(yī)學(xué)碩士研究生，主要從事豬傳染病防控研究