王玉鋒 （河南省新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 453003)

一例豬圓環(huán)病毒病的診治

王玉鋒 （河南省新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 453003)

本文通過(guò)一例豬圓環(huán)病毒病的確診過(guò)程，綜述了豬圓環(huán)病毒病的流行病學(xué)、臨床癥狀、病理變化等，并結(jié)合目前生豬生產(chǎn)實(shí)際提出了本病的防治對(duì)策。

豬；圓環(huán)病毒病；診治；防治

豬圓環(huán)病毒病是指以2-型圓環(huán)病毒為主要病原、單獨(dú)或繼發(fā)/混合感染其他致病微生物的一系列疾病的總稱。豬2-型圓環(huán)病毒感染可導(dǎo)致豬繁殖障礙、仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征、豬皮炎-腎病綜合征、肺炎、腸炎、先天性震顫等。

新鄉(xiāng)市一個(gè)大型豬場(chǎng)，母豬存欄1500頭，從去年冬天開(kāi)始出現(xiàn)母豬懷孕60～80d后仔豬死亡流產(chǎn)，少數(shù)發(fā)生在60d左右，多數(shù)發(fā)生在80d左右，頭胎產(chǎn)及經(jīng)產(chǎn)母豬均有發(fā)生，而且出現(xiàn)一旦發(fā)生這樣的病例，則與該病例同一豬舍的整棟都發(fā)生的現(xiàn)象。已死亡一頭母豬，共有8棟豬舍3月內(nèi)沒(méi)生小豬，因此懷疑為繁殖障礙性疾病，此前，該場(chǎng)在其他檢測(cè)機(jī)構(gòu)對(duì)細(xì)小病毒病進(jìn)行監(jiān)測(cè)，排除了細(xì)小病毒 （PPV）感染。經(jīng)我們對(duì)該場(chǎng)場(chǎng)主的仔細(xì)詢問(wèn)及對(duì)患病豬的癥狀討論分析，初步推斷應(yīng)該為圓環(huán)病毒感染。

1 病料采集

首先對(duì)采集病料的器械消毒，無(wú)菌采集母豬血液，冷藏保存；病死豬淋巴結(jié)、肝臟、脾臟，流產(chǎn)死胎的臍帶血、胎衣放入無(wú)菌容器內(nèi)，做好標(biāo)記，置-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2 觸片鏡檢

將無(wú)菌采集的病料按實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法做觸片，用革蘭氏和姬姆薩進(jìn)行染色并干燥，于400x顯微鏡下鏡檢，結(jié)果未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌。

3 分離培養(yǎng)

無(wú)菌采集心血、肝臟、脾臟、淋巴結(jié)等組織，將其接種于肉湯、營(yíng)養(yǎng)、瓊脂、麥康凱培養(yǎng)基上，于37℃的恒溫箱中放置24h，經(jīng)觀察無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。

4 血清學(xué)檢驗(yàn)

將采集該場(chǎng)母豬血液，短暫離心，取上清液，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清中豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體（PRRSAb）、 豬瘟抗體 （CSFVAb）、 偽狂犬抗體 （ADVAb）、圓環(huán)病毒病 （PCV），結(jié)果除圓環(huán)病毒抗體為陰性外，其余均為陽(yáng)性。

5 病原學(xué)檢驗(yàn)

將采集的流產(chǎn)死胎的臍帶血、胎衣，死亡母豬的淋巴結(jié)、脾臟等組織于研磨器中研磨，加入1.5ml生理鹽水后繼續(xù)研磨，待勻漿后轉(zhuǎn)至1.5ml滅菌離心管中，8000轉(zhuǎn)離心2min，取上清液100μl于1.5ml滅菌離心管中，用DNA提取試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書提取核酸用于熒光PCR檢測(cè)病原。排除了豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬瘟、偽狂犬抗原。利用以下標(biāo)準(zhǔn)來(lái)判斷檢測(cè)到了圓環(huán)病毒病原。陽(yáng)性：檢測(cè)樣本Ct值≤35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線?？梢桑簷z測(cè)樣本Ct值＞35.0，重復(fù)一次實(shí)驗(yàn)，如果Ct值仍大于35.0，且曲線有明顯的增長(zhǎng)曲線，判定為陽(yáng)性，否在為陰性。陰性：檢測(cè)不到樣本Ct值。根據(jù)以上判定標(biāo)準(zhǔn)，利用熒光PCR檢測(cè)病原，結(jié)果如附圖所示，9份樣品均為陽(yáng)性，陽(yáng)性率達(dá)100%，目前，該豬場(chǎng)已對(duì)所有母豬進(jìn)行了圓環(huán)病毒病的普防，母豬流產(chǎn)現(xiàn)象得以控制，呈大幅下降趨勢(shì)，母豬生產(chǎn)正逐漸恢復(fù)正常。

附圖 豬圓環(huán)病病原熒光PCR檢測(cè)結(jié)果

從附圖可知，其中起跳的較粗的那條曲線為陽(yáng)性對(duì)照，其余9條曲線為9份樣品檢測(cè)曲線，通過(guò)與陽(yáng)性對(duì)照物比較，結(jié)合文中的臨床癥狀、流行病學(xué)調(diào)查、實(shí)驗(yàn)室診斷及判定標(biāo)準(zhǔn)可判定這9份樣品均為陽(yáng)性，即為圓環(huán)病毒感染，結(jié)果與預(yù)期相符。

6 防治措施

6.1 提高飼料質(zhì)量

對(duì)于有圓環(huán)病毒存在的豬場(chǎng)盡量要保證飼料中微量元素、維生素、必需氨基酸的含量。對(duì)仔豬補(bǔ)鐵由一次性改為二次，可在仔豬2～3日齡注射1ml鐵制劑，10～20日齡再注射2ml。

6.2 減少應(yīng)激

在圓環(huán)病毒易感期盡量不免疫；做好豬舍內(nèi)溫度的調(diào)控，根據(jù)不同季節(jié)的天氣變化及時(shí)做好防暑降溫及防寒保暖工作；轉(zhuǎn)群時(shí)不換料，即使換料也要加入抗應(yīng)激藥物。

6.3 加強(qiáng)豬場(chǎng)管理

嚴(yán)格檢疫引進(jìn)種豬，杜絕隱性感染；保持豬舍衛(wèi)生、干燥，豬舍要及時(shí)通風(fēng)換氣，降低氨氣等有害氣體濃度；保持科學(xué)合理的飼養(yǎng)密度；防止老鼠、飛鳥(niǎo)、貓等其他動(dòng)物進(jìn)入圈舍；嚴(yán)格執(zhí)行 “全進(jìn)全出”制度，出欄一批豬，要至少有10d左右的時(shí)間間隔，再入住下一批豬。

6.4 做好免疫預(yù)防工作

根據(jù)本場(chǎng)實(shí)際，制定科學(xué)合理的免疫程序。做好豬瘟、口蹄疫、高治病性藍(lán)耳等重點(diǎn)疫病及細(xì)小、偽狂犬病的程序免疫。

6.5 采取綜合施治

豬只感染圓環(huán)病毒病后，要采取隔離治療的方法?；疾∝i原圈舍要清理消毒。同時(shí)對(duì)患病豬只治療以標(biāo)本兼治及防止繼發(fā)感染為治療原則。