張 睿閆 昊張繼紅*

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)，新疆烏魯木齊 830001；2.新疆維吾爾自治區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，新疆烏魯木齊 830011)

新疆塔城地區(qū)羊棘球蚴病個(gè)體流行率測(cè)量

張 睿1閆 昊2張繼紅2*

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)，新疆烏魯木齊 830001；2.新疆維吾爾自治區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，新疆烏魯木齊 830011)

目的：為了了解新疆塔城地區(qū)羊棘球蚴病真實(shí)流行率。方法：采用橫斷面研究，采樣分為兩階段抽樣策略，第一階段為縣(市)抽樣采用隨機(jī)抽樣策略，預(yù)定流行率=85%、CI=90%、可接受誤差=15%；第二階段為個(gè)體抽樣采用按養(yǎng)殖大小成比例抽樣(PPS)策略，預(yù)期流行率=30%，CI=90%，可接受誤差=5%，采集血清1839份，血清樣品進(jìn)行ELISA抗體檢測(cè)，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果、敏感性和特異性計(jì)算真實(shí)流行率。結(jié)果：塔城地區(qū)羊棘球蚴病個(gè)體表觀流行率(AP)為52.7%，統(tǒng)計(jì)分析得出個(gè)體真實(shí)流行率(TP)為55.2%，95%置信區(qū)間為52.9～57.4%。結(jié)論：1.本次研究首次通過(guò)兩階段抽樣策略對(duì)羊棘球蚴病在個(gè)體流行率進(jìn)行了測(cè)量，從方法上相對(duì)以往的監(jiān)測(cè)方法更加科學(xué)，包括不同年齡、性別的羊只，更接近研究時(shí)段內(nèi)該地區(qū)的真實(shí)情況。2.相比之下，血清學(xué)檢測(cè)簡(jiǎn)便、快速、檢測(cè)通量大，我地區(qū)可在今后的羊棘球蚴病流行病學(xué)調(diào)查、監(jiān)測(cè)和檢測(cè)工作逐步推廣ELISA診斷方法，進(jìn)而更客觀、更準(zhǔn)確地掌握棘球蚴病流行情況，做好防控工作。

新疆；羊棘球蚴??；真實(shí)流行率；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)1 背景

1 前言

棘球蚴病（Echinococcosis），又稱為包蟲(chóng)?。℉ydatid disease，Hd），是由細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)（Echinococcus granulosus，Eg）的中絳期——棘球蚴（Echinococcus）寄生在哺乳動(dòng)物臟器內(nèi)形成機(jī)械性壓迫，造成不同程度的組織損傷和功能障礙，同時(shí)可引起過(guò)敏反應(yīng)，甚至突然死亡，是一種嚴(yán)重的人畜共患寄生蟲(chóng)病[1]。綿羊是最主要的中間宿主，犬是終末宿主。據(jù)獸醫(yī)部門流行病調(diào)查數(shù)據(jù)推算，每年患病家畜在5 000萬(wàn)頭以上，因家畜死亡和臟器廢棄造成的直接經(jīng)濟(jì)損失逾30億元[2]。

羊棘球蚴病感染調(diào)查可以直接反映當(dāng)?shù)丶蝌什×餍谐潭?，同時(shí)是執(zhí)行預(yù)防措施和評(píng)價(jià)控制效果的重要指標(biāo)。目前羊棘球蚴病感染調(diào)查仍以O(shè)IE推薦的屠宰場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)檢查為主，家畜屠宰后對(duì)肝臟、肺臟進(jìn)行棘球蚴病包囊檢查，該方法存在問(wèn)題有：內(nèi)臟棘球蚴包囊檢查只能在家畜屠宰時(shí)進(jìn)行，存在很大局限性，同時(shí)家畜年齡大多年齡偏大，部分家畜可能是感染其它動(dòng)物疫病的病畜，增加了流行病學(xué)調(diào)查的偏差。棘球蚴病感染初期或家畜年齡較小感染時(shí)，可能棘球蚴幼蟲(chóng)在內(nèi)臟表面未能形成包囊或包囊不明顯，導(dǎo)致檢查出現(xiàn)假陰性。檢查人員可能將棘球蚴包囊與其它寄生蟲(chóng)病或傳染病形成的結(jié)節(jié)狀病變混淆，導(dǎo)致檢查出現(xiàn)假陽(yáng)性。

近年來(lái)，多種新的免疫學(xué)方法應(yīng)用于羊棘球蚴病檢測(cè)，其原理是利用抗原、抗體特異性結(jié)合的原理制備特異性抗原檢測(cè)血清中的抗體。血清抗體檢測(cè)方法的應(yīng)用，其檢測(cè)敏感性、特異性、實(shí)用性要優(yōu)于傳統(tǒng)的檢測(cè)方法，為了解羊感染棘球蚴病真實(shí)感染情況提供了檢測(cè)與監(jiān)測(cè)手段，為流行病學(xué)調(diào)查與疫情監(jiān)測(cè)、疾病診斷提供了新的技術(shù)手段和途徑。

2 材料和方法

2.1 材料

2.1.1 樣品

采自塔城地區(qū)5個(gè)縣（市）的羊血清1839份。

2.1.2 主要試劑盒

綿羊棘球蚴?。òx(chóng)?。〦LISA檢測(cè)試劑，蘭州獸醫(yī)研究所產(chǎn)品，檢測(cè)方法的敏感性和特異性分別為91.8%、95.4%。

2.2 方法

2.2.1 檢測(cè)方法

綿羊棘球蚴?。òx(chóng)?。〦LISA檢測(cè)試劑，參照《NY/T 1466-2007動(dòng)物棘球蚴病診斷技術(shù)》進(jìn)行操作。

2.2.2 抽樣策略

為了測(cè)量羊棘球蚴病的真實(shí)流行率，本研究選擇采用橫斷面研究。塔城地區(qū)轄區(qū)內(nèi)所有羊只為此次調(diào)查的總體樣本，采樣分為兩階段抽樣策略[3]。

第一階段縣（市）選取采用隨機(jī)抽樣策略。轄區(qū)內(nèi)5縣2市編號(hào)后作為抽樣框，根據(jù)專家意見(jiàn)，縣市預(yù)定流行率=85%（縣市估計(jì)流行率基于個(gè)體流行率＞20%，即確定為流行縣市），置信水平=90%，可接受絕對(duì)誤差=15%，采用WinEpi軟件按照估計(jì)流行率抽樣方法計(jì)算抽取縣（市）數(shù)，用EXCEL軟件的隨機(jī)數(shù)發(fā)生器抽取縣（市）。

第二階段個(gè)體抽樣策略采用按養(yǎng)殖大小成比例抽樣（PPS）策略。根據(jù)專家意見(jiàn)以及當(dāng)?shù)貧v年監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，個(gè)體預(yù)期流行率設(shè)定為30%，置信水平=90%，可接受誤差=5%，采用WinEpi軟件按照估計(jì)流行率抽樣方法計(jì)算每個(gè)縣個(gè)體樣本數(shù)，將每個(gè)縣（市）2015年秋季重大動(dòng)物疫病免疫檔案信息整理編號(hào)后作為抽樣框，用EXCEL軟件的隨機(jī)數(shù)發(fā)生器抽取個(gè)體。

2.2.3 數(shù)據(jù)分析

羊棘球蚴病個(gè)體表觀流行率（AP）即檢測(cè)的血清學(xué)陽(yáng)性數(shù)占所有檢測(cè)數(shù)的比值。個(gè)體真實(shí)流行率（TP）根據(jù)公式TP=（AP+Sp-1）/（Se+Sp-1）計(jì)算得到，真實(shí)流行病的95%置信區(qū)間根據(jù)公式CI=P±Z×[p×（1-p）/n]-1，其中，P是真實(shí)流行率，Z為標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布概率p=0.05所對(duì)應(yīng)的值，n為抽樣數(shù)量。

3 結(jié)果

3.1 抽樣結(jié)果

第一階段隨機(jī)選取出5個(gè)縣（市），其中3個(gè)縣（市）以牧區(qū)畜牧業(yè)為主，2個(gè)縣（市）以半農(nóng)半牧區(qū)畜牧業(yè)為主。第二階段計(jì)算每個(gè)縣（市）需要抽取226份樣品，具體樣品來(lái)源見(jiàn)表1。

表1 樣品來(lái)源

3.2 各縣（市）真實(shí)流行率的描述性統(tǒng)計(jì)

根據(jù)上表2中列出的結(jié)果，對(duì)各縣（市）羊棘球蚴病的真實(shí)流行率進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)分析，詳見(jiàn)表3。

表3 各縣（市）真實(shí)流行率的描述性統(tǒng)計(jì)

3.3 個(gè)體流行率

總共對(duì)1839份血清進(jìn)行檢測(cè)，抗體陽(yáng)性969份，根據(jù)個(gè)體流行率計(jì)算公式可得到塔城地區(qū)羊棘球蚴病個(gè)體表觀流行率（AP）為52.7%，根據(jù)2.1.2中該檢測(cè)方法敏感性Se=91.8%、特異性Sp=95.4%，計(jì)算所得個(gè)體真實(shí)流行率（TP）為55.2%，95%置信區(qū)間為52.9～57.4%。

4 討論

4.1 抽樣策略

在第二階段抽樣過(guò)程中，將每個(gè)縣（市）鎮(zhèn)2015年秋季重大動(dòng)物疫病免疫檔案進(jìn)行整理，將養(yǎng)殖戶、飼養(yǎng)量信息錄入成采樣框，采用按養(yǎng)殖大小成比例抽樣，使得轄區(qū)內(nèi)的羊被抽中的概率是一致的，由于當(dāng)?shù)仫曫B(yǎng)模式、飼養(yǎng)情況特殊，每戶養(yǎng)殖量在300-1200之間，當(dāng)養(yǎng)殖戶與采樣量確定后，進(jìn)入養(yǎng)殖戶采樣時(shí)，隨機(jī)抽取相應(yīng)數(shù)量，相對(duì)于將該縣（市）全部羊編號(hào)后簡(jiǎn)單隨機(jī)抽樣而言，該方法具有較好的可操作性和實(shí)用性，可在今后大范圍監(jiān)測(cè)抽樣時(shí)逐步推廣，可減少因便利采樣帶來(lái)的誤差。

4.2 流行率測(cè)量

該地區(qū)歷年監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)來(lái)源屠宰場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)檢查，數(shù)量為每年200羊，監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示該地區(qū)羊棘球蚴病流行率為42.39%，本次研究通過(guò)兩階段抽樣策略對(duì)羊棘球蚴病在個(gè)體流行率進(jìn)行了測(cè)量，從方法上相對(duì)以往的監(jiān)測(cè)方法更加科學(xué)，樣本量1839份，包括不同年齡、性別的羊只，試驗(yàn)結(jié)果顯示該地區(qū)羊棘球蚴病個(gè)體真實(shí)流行率為55.2%，95%置信區(qū)間為52.9～57.4%，更接近研究時(shí)段內(nèi)該地區(qū)的真實(shí)情況。

由于寄生蟲(chóng)病相對(duì)于家畜病毒病、細(xì)菌病而言，有其獨(dú)特的生活史、發(fā)育史，具有單向性、循環(huán)性的特性，致使羊棘球蚴病主要傳染源為感染棘球蚴病的犬科動(dòng)物的排泄物以及所污染的其它物質(zhì)。在牧區(qū)，養(yǎng)殖戶公用同一片草場(chǎng)，所有羊只在同一片草場(chǎng)活動(dòng)、采食，轉(zhuǎn)場(chǎng)時(shí)，經(jīng)過(guò)同一條牧道，所以本文認(rèn)為，在牧區(qū)羊棘球蚴病感染情況同質(zhì)化水平很高，具體情況有待進(jìn)一步研究。

4.3 建議

在本次研究調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，該地區(qū)整體羊只調(diào)運(yùn)情況為調(diào)出量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于調(diào)入量，羊只飼養(yǎng)模式屬于牧區(qū)自繁自養(yǎng)、傳統(tǒng)游牧。在牧區(qū)，牧羊犬隨羊只活動(dòng)，而半農(nóng)半牧區(qū)的犬只以拴養(yǎng)為主，從犬與羊只接觸頻次來(lái)說(shuō)，牧區(qū)要遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于半農(nóng)半牧區(qū)。根據(jù)此次研究數(shù)據(jù)和棘球蚴病特性，建議如下：

（1）加快建立家/牧犬的登記管理制度，并集中收容、處理流浪犬只。

（2）加大以“犬犬投藥、月月驅(qū)蟲(chóng)”為中心的預(yù)防控制措施的實(shí)施力度，尤其是加大牧區(qū)牧羊犬的驅(qū)蟲(chóng)力度。

（3）對(duì)轄區(qū)內(nèi)新生羔羊?qū)嵤┭蚣蝌什∫呙缑庖?，尤其是牧區(qū)新生羔羊，提高對(duì)棘球蚴病的抵抗力。

（4）加強(qiáng)屠宰檢疫管理，杜絕“私屠亂宰”行為，嚴(yán)禁將感染有包囊的家畜臟器亂棄或投喂犬只。

（5）加大棘球蚴病科普知識(shí)的宣傳力度，翻譯為多語(yǔ)言使農(nóng)牧民了解棘球蚴病的危害及防控知識(shí)。

4.4 局限性

本次研究中，由于經(jīng)費(fèi)、人員以及實(shí)際情況的局限，所以在第二階段一個(gè)縣的個(gè)體抽樣數(shù)未達(dá)到計(jì)劃采樣數(shù)，這可能造成該縣結(jié)果精確度下降。但其他縣（市）實(shí)際獲得樣品量均大于計(jì)劃采樣數(shù)，提高了結(jié)果精度。

5 結(jié)論

屠宰場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)對(duì)家畜內(nèi)臟進(jìn)行棘球蚴病包囊檢查簡(jiǎn)單易行、成本低廉，一直被用于羊棘球蚴病檢疫、監(jiān)測(cè)及流行病學(xué)調(diào)查，但是由于該方法的敏感性、特異性依賴于檢查者的專業(yè)技能、羊感染時(shí)間的長(zhǎng)短、棘球蚴發(fā)育情況等因素的限制，而出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性，增加了流行病學(xué)調(diào)查的偏差。相比之下，血清抗體檢測(cè)方法的應(yīng)用，其檢測(cè)敏感性、特異性、實(shí)用性要優(yōu)于傳統(tǒng)的檢測(cè)方法，可為流行病學(xué)調(diào)查與疫情監(jiān)測(cè)、疾病診斷提供了新的技術(shù)手段和途徑。

本次研究首次利用獸醫(yī)流行病學(xué)相關(guān)原理對(duì)羊棘球蚴病個(gè)體流行率進(jìn)行測(cè)量，相對(duì)以往宰后檢查的監(jiān)測(cè)方法，通過(guò)兩階段抽樣策略對(duì)個(gè)體進(jìn)行抽樣，降低了便利采樣對(duì)結(jié)果的影響，從方法上相對(duì)以往的監(jiān)測(cè)方法更加科學(xué)，同時(shí)，監(jiān)測(cè)對(duì)象包括不同年齡、性別的羊只，研究結(jié)果更接近研究時(shí)段內(nèi)該地區(qū)的真實(shí)情況。

[1] 李炳軍.包蟲(chóng)病流行病學(xué)調(diào)查現(xiàn)狀[J].醫(yī)學(xué)綜述，2009，15（8）：1195-1198.

[2] 張壯志，張文寶.我國(guó)包蟲(chóng)病防控及其面臨的困難[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2011，06：27-29.

[3] 黃保續(xù).獸醫(yī)流行病學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2011：189.

張睿（1986—），女，新疆烏魯木齊市人，大學(xué)學(xué)歷，助理獸醫(yī)師，從事動(dòng)物疫病綜合防控工作。