劉愛(ài)東 劉 揚(yáng) 馬 征

(華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院病理科,河北 唐山 063000)

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真核翻譯起始因子3h和PTEN在胃腺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義

劉愛(ài)東 劉 揚(yáng)1馬 征1

(華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院病理科,河北 唐山 063000)

目的 檢測(cè)胃腺癌組織中真核翻譯起始因子(EIF)3h和PTEN的表達(dá)及其臨床意義。方法 選擇95例胃腺癌作為觀察組，70例正常胃黏膜組織作為對(duì)照組，采用免疫組化法檢測(cè)兩組中EIF3h和PTEN的表達(dá)。結(jié)果 觀察組中EIF3h表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，觀察組中PTEN表達(dá)的陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組，觀察組中EIF3h和PTEN表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤(rùn)、癌結(jié)節(jié)和Ki67增殖指數(shù)均密切相關(guān)，且EIF3h和PTEN的表達(dá)負(fù)相關(guān)，生存分析顯示EIF3h和PTEN的表達(dá)與預(yù)后相關(guān)。結(jié)論 胃腺癌組織中EIF3h高表達(dá)、PTEN低表達(dá)時(shí)，對(duì)腫瘤的進(jìn)展有促進(jìn)作用，兩者具有協(xié)同負(fù)向作用，術(shù)后聯(lián)合檢測(cè)EIF3h和PTEN的表達(dá)對(duì)判斷胃腺癌的預(yù)后有一定價(jià)值。

胃腺癌；真核翻譯起始因子3h；PTEN

近年研究顯示腫瘤在發(fā)生發(fā)展過(guò)程中出現(xiàn)明顯的基因和蛋白的異常表達(dá)〔1〕。真核翻譯起始因子(EIF)3h是一個(gè)含有10～13不同亞基的大翻譯起始復(fù)合物，可以使Met復(fù)合物穩(wěn)定地結(jié)合到40S核糖體亞基上，引起細(xì)胞的異型增生，同時(shí)能誘導(dǎo)腫瘤進(jìn)展〔2〕。PTEN是較為經(jīng)典的抑癌基因，具有雙特異性磷酸酶的活性，可以廣泛作用于細(xì)胞信號(hào)通路中的信號(hào)分子，抑制腫瘤的發(fā)展〔3〕。本文探討胃腺癌組織中EIF3h和PTEN的表達(dá)及臨床意義。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取2006年1～12月行胃腺癌根治手術(shù)后留取的蠟塊組織及患者的臨床資料作為觀察組，納入均符合WHO關(guān)于胃腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)。觀察組95例，男54例，女41例，年齡42～79〔平均(60.6±5.9)〕歲，高分化39例，中分化35例，低分化21例，患者手術(shù)前均未進(jìn)行放、化療。同時(shí)選取距腫瘤邊緣>3 cm切端為正常的胃黏膜組織70例作為對(duì)照組，男39例，女31例，年齡43～76〔平均(59.5±5.8)〕歲。

1.2 免疫組化檢測(cè)EIF3h和PTEN蛋白的表達(dá) EIF3h蛋白的濃縮液購(gòu)自Cell Signaling生物公司，按不同比例進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇最佳配比濃度用于正式實(shí)驗(yàn)。PTEN的工作液購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。EIF3h和PTEN的檢測(cè)應(yīng)用免疫組化技術(shù)SP法，DAB染色，嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)步驟，并均由同一技師操作，嚴(yán)格質(zhì)控。

1.3 EIF3h和PTEN蛋白檢測(cè)結(jié)果的判定方法 EIF3h和PTEN均以細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞，每張切片選擇10個(gè)400倍的高倍視野，取其平均值作為樣本最終的陽(yáng)性表達(dá)率，以陽(yáng)性細(xì)胞≥5%定為陽(yáng)性，以陽(yáng)性細(xì)胞<5%定為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線性相關(guān)分析和生存分析。

2 結(jié) 果

2.1 觀察組與對(duì)照組EIF3h和PTEN蛋白表達(dá)陽(yáng)性率比較 觀察組EIF3h表達(dá)的陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組(66.32% vs 12.86%，χ2=46.830 2，P<0.000 1)，PTEN表達(dá)的陽(yáng)性率明顯低于對(duì)照組(42.11% vs 95.71%,χ2=50.812 4，P<0.000 1)。見(jiàn)圖1。

圖1 EIF3h、PTEN在胃腺癌及正常胃黏膜組織中的表達(dá)(DAB，×200)

2.2 觀察組不同臨床特征患者EIF3h和PTEN蛋白表達(dá)陽(yáng)性率的比較 觀察組中EIF3h和PTEN表達(dá)的陽(yáng)性率均與腫瘤的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管浸潤(rùn)、癌結(jié)節(jié)和Ki67增殖指數(shù)(圖2)密切相關(guān)(P<0.05)，見(jiàn)表1。

2.3 觀察組中EIF3h和PTEN表達(dá)的相關(guān)性 觀察組中EIF3h和PTEN的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.53，P=0.019 2)。

2.4 觀察組中EIF3h和PTEN表達(dá)的生存分析 本組患者隨訪時(shí)間為7～60個(gè)月，平均24.9個(gè)月。經(jīng)檢驗(yàn)，胃腺癌組織中EIF3h和PTEN的表達(dá)均與患者預(yù)后相關(guān)(P<0.05)，即EIF3h高表達(dá)、PTEN低表達(dá)患者的預(yù)后差。見(jiàn)圖3，圖4。

表1 觀察組不同臨床特征患者EIF3h和PTEN蛋白表達(dá)陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

圖2 Ki67在胃腺癌中陽(yáng)性表達(dá)(DAB，×200)

圖3 EIF3h蛋白表達(dá)與胃腺癌預(yù)后的關(guān)系

圖4 PTEN蛋白表達(dá)與胃腺癌預(yù)后的關(guān)系

3 討 論

胃腺癌病變發(fā)生和進(jìn)展時(shí)細(xì)胞異常增生，同時(shí)存在復(fù)制被錯(cuò)誤修復(fù)并表達(dá)到下一代細(xì)胞，引發(fā)腫瘤的傳代基因和細(xì)胞異常表達(dá)，此時(shí)參與增殖、翻譯和拮抗癌的相關(guān)基因均發(fā)生明顯變化。翻譯起始階段40S核糖體在發(fā)揮功能時(shí)需要相關(guān)因子的協(xié)助，尤其是其與mRNA結(jié)合時(shí)更加必要〔4〕。有研究認(rèn)為EIF3是一個(gè)含有10～13不同亞基的大翻譯起始復(fù)合物，其亞基EIF3h對(duì)復(fù)合物的功能起到關(guān)鍵性作用，因此這些亞基稱為核心亞基〔5〕。近年學(xué)者也發(fā)現(xiàn)EIF3h可以使Met復(fù)合物穩(wěn)定地結(jié)合到40S核糖體亞基上，并有助于保存這個(gè)復(fù)合物在60S核糖體亞單位之上。當(dāng)外源性刺激或有絲分裂信號(hào)刺激細(xì)胞時(shí)，mTOR結(jié)合EIF3h復(fù)合物，并且使S6K1磷酸化〔6〕。此種作用可以引起細(xì)胞的異型增生，同時(shí)能誘導(dǎo)腫瘤進(jìn)展。有研究認(rèn)為真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)分子伴侶TCP-1結(jié)合到新合成的EIF3h時(shí)需正確折疊，最后的兩個(gè)亞基表達(dá)特定的基因〔7〕。在腫瘤進(jìn)展過(guò)程中，此種作用可以使細(xì)胞微環(huán)境發(fā)生變化，有效的促進(jìn)細(xì)胞信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞增殖和整個(gè)翻譯過(guò)程〔8〕。PTEN是一種腫瘤抑制基因，其所編碼的蛋白質(zhì)是一種磷酸酶。研究顯示PTEN可以引發(fā)細(xì)胞內(nèi)第二信使磷脂酰肌醇(3,4,5)-三磷酸(PIP3)出現(xiàn)去磷酸化，不僅抑制細(xì)胞的增殖，還可以抑制腫瘤的轉(zhuǎn)化〔9〕。但是關(guān)于PTEN在腫瘤中的作用可能更趨于多向性，如其可能與P53的作用有關(guān)〔10〕，也可能與NEDD4-1基因和作用相關(guān)〔11〕。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示兩種蛋白異常表達(dá)可以誘發(fā)正常細(xì)胞癌變，并引發(fā)腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)異常增殖。EIF3h引發(fā)腫瘤細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)的功能與其調(diào)節(jié)翻譯有關(guān)。也有研究認(rèn)為EIF3h可以快速地誘導(dǎo)NIH-SH3細(xì)胞出現(xiàn)惡性表型〔12〕。也有學(xué)者認(rèn)為EIF3h的高表達(dá)可以抑制MYC依賴的凋亡抑制過(guò)程，進(jìn)而直接引起細(xì)胞的失控性增生〔13〕。而PTEN在作用過(guò)程中也可以對(duì)MYC有一定影響〔14〕。PTEN的表達(dá)一旦丟失，可以引起明顯的細(xì)胞增殖作用，可以無(wú)限制地引起以Ki67陽(yáng)性細(xì)胞為主細(xì)胞的增殖作用，此時(shí)腫瘤細(xì)胞失控性增生、分化障礙，進(jìn)而癌變、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。本研究提示EIF3h、PTEN兩種蛋白異常表達(dá)參與胃腺癌的進(jìn)展。此時(shí)腫瘤向周圍浸潤(rùn)生長(zhǎng)能力提高，脈管浸潤(rùn)的能力增強(qiáng)，周圍形成癌結(jié)節(jié)的能力增高，并破壞神經(jīng)。腫瘤細(xì)胞中EIF3h高表達(dá)、PTEN低表達(dá)意味著腫瘤呈高轉(zhuǎn)移和高風(fēng)險(xiǎn)狀態(tài)，細(xì)胞間的黏附作用減弱，遷移及活動(dòng)能力均增強(qiáng)，易于種植于其他部位形成轉(zhuǎn)移灶〔15,16〕。由于以上因素均為臨床判斷生物學(xué)行為的重要指標(biāo)，因此EIF3h高表達(dá)、PTEN低表達(dá)提示不良的預(yù)后，而生存分析直接證實(shí)了此觀點(diǎn)。因此聯(lián)合檢測(cè)EIF3h和PTEN的表達(dá)可以作為判定胃腺癌預(yù)后的指標(biāo)。

總之，胃腺癌組織中EIF3h高表達(dá)、PTEN低表達(dá)時(shí)對(duì)腫瘤的進(jìn)展有促進(jìn)作用，術(shù)后檢測(cè)EIF3h和PTEN的表達(dá)對(duì)判斷胃腺癌的預(yù)后有一定價(jià)值。

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〔2015-03-17修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢(mèng)園)

1 唐山職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)校區(qū)

劉愛(ài)東(1975-)，男，醫(yī)學(xué)碩士，副主任醫(yī)師，副教授，主要從事腫瘤分子病理學(xué)研究。

R735.1

A

1005-9202(2016)19-4815-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.19.065