魏娟，周迪，曹文疆，程江

（新疆石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.中心實(shí)驗(yàn)室，新疆石河子832000）

乙肝病毒前S1抗原在乙肝感染者診療中的臨床意義

魏娟1，周迪2，曹文疆1，程江1

（新疆石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.中心實(shí)驗(yàn)室，新疆石河子832000）

目的通過(guò)檢測(cè)乙肝病毒前S1（Pre-S1）抗原在乙肝感染者中的陽(yáng)性檢出率，分析其與乙肝病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）的相關(guān)性，為乙肝感染者的診療提供依據(jù)。方法收集2013年1～6月在該院就診的慢性乙肝感染者134例，將其分為三組：A組乙肝e抗原（HBeAg）陽(yáng)性、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）陽(yáng)性、慢性活動(dòng)性乙肝患者18例；B組HBeAg陰性、ALT陽(yáng)性、慢性活動(dòng)性乙肝患者28例；C組無(wú)癥狀乙肝表面抗原（HBsAg）陽(yáng)性攜帶者88例。另收集乙肝血清學(xué)標(biāo)志物均陰性的健康體檢者20例。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）及雙抗體類心法分別測(cè)定乙肝五項(xiàng)血清學(xué)標(biāo)志物及Pre-S1抗原，比較四組Pre-S1抗原陽(yáng)性檢出率及其與血清HBV-DNA的關(guān)系。結(jié)果A組：HBV-DNA與Pre-S1抗原的檢出率分別為94.4%（17/18）、100.0%（18/18），HBV-DNA載量為5.0×106～6.0×107copies/mL；B組：HBV-DNA與Pre-S1抗原的檢出率分別為71.4%（20/28）、78.6%（22/28），HBV-DNA載量為1.6×104～3.2×106copies/mL；C組HBV-DNA載量小于0.5×102copies/mL，HBV-DNA與Pre-S1抗原的檢出率為0、68.2%（60/88）。三組間Pre-S1抗原陽(yáng)性檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；Pre-S1抗原陽(yáng)性檢出率隨著HBV-DNA載量的增加而增加。20例健康體檢者Pre-S1抗原檢測(cè)為陰性。結(jié)論P(yáng)re-S1抗原與HBV-DNA呈正相關(guān)，是病毒復(fù)制的監(jiān)測(cè)指標(biāo)之一。Pre-S1抗原在病毒復(fù)制的監(jiān)測(cè)方面體現(xiàn)其優(yōu)越性，在判斷感染者的病毒復(fù)制、傳染狀況有臨床指導(dǎo)意義。

肝炎，乙型，慢性；抗原，病毒；酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定

乙肝病毒（HBV）主要通過(guò)血液傳播，通常感染者會(huì)呈現(xiàn)慢性臨床過(guò)程或處于病毒攜帶狀態(tài)。隨著對(duì)HBV的深入研究，乙肝病毒前S1（Pre-S1）抗原檢測(cè)在輔助乙肝的診療中顯現(xiàn)出重要的意義。Pre-S1抗原為乙肝表面抗原（HBsAg）氨基端延伸的一段多肽，可與肝細(xì)胞膜上相應(yīng)受體或機(jī)體內(nèi)細(xì)胞因子結(jié)合，介導(dǎo)HBV感染[1]，與HBV的傳染性有關(guān)。臨床上常以乙肝五項(xiàng)血清學(xué)模式、乙肝病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）、肝功能、監(jiān)測(cè)患者的傳染狀況、病毒是否復(fù)制、肝臟損壞來(lái)衡量抗病毒治療的效果，近年來(lái)Pre-S1抗原正在成為臨床檢測(cè)HBV的又一血清標(biāo)志物。本研究就134例乙肝感染者血清樣本進(jìn)行Pre-S1抗原、HBV-DNA、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、乙肝血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)，以探討Pre-S1抗原在乙肝感染者診療中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1　資料與方法

1.1一般資料研究對(duì)象均為2013年1～6月在本院就診的乙肝感染者，將其分為三組：A組為乙肝e抗原（HBeAg）陽(yáng)性、ALT陽(yáng)性、慢性活動(dòng)性乙肝患者18例；B組為HBeAg陰性、ALT陽(yáng)性、慢性活動(dòng)性乙肝患者28例；C組為無(wú)癥狀乙肝表面抗原（HBsAg）陽(yáng)性攜帶者88例。另收集乙肝血清學(xué)標(biāo)志物均陰性的健康體檢者20例。134例感染者均符合2005年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)和感染分會(huì)聯(lián)合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》。其中男88例，女46例；年齡21～75歲。健康對(duì)照者20例中男14例，女6例；年齡22～54歲。

1.2檢測(cè)方法抽取空腹靜脈血5mL，分離血清于-20℃冷凍備用，樣本均要求無(wú)溶血及脂血。乙肝五項(xiàng)血清學(xué)標(biāo)志物采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）方法，Pre-S1抗原采用雙抗體夾心法，試劑盒均購(gòu)于上?？迫A生物制品有限公司；HBV-DNA采用核酸擴(kuò)增（PCR）熒光定量檢測(cè)法，試劑盒購(gòu)于深圳匹基生物工程股份有限公司，以HBV-DNA載量大于0.5×102copies/mL為HBV有復(fù)制，病毒載量越高提示病毒復(fù)制越活躍，傳染性越強(qiáng)；血清ALT在生化分析儀上測(cè)定，檢測(cè)過(guò)程中嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作，減少實(shí)驗(yàn)誤差。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

A組：HBV-DNA與Pre-S1抗原的檢出率分別為94.4%、100.0%，HBV-DNA載量為5.0×106～6.0×107copies/mL；B組：HBV-DNA與Pre-S1抗原的檢出率分別為71.4%、78.6%、HBV-DNA載量為1.6×104～3.2×106copies/mL；C組HBV-DNA載量小于0.5×102copies/mL，Pre-S1抗原的檢出率為68.2%。Pre-S1抗原陽(yáng)性檢出率隨著HBV-DNA載量的增加而增加，三組Pre-S1抗原陽(yáng)性檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1；20例健康體檢者Pre-S1抗原為陰性。

表1　三組HBV感染者HBV-DNA不同載量水平Pre-S1陽(yáng)性檢出率情況

3　討論

Pre-S1抗原是HBV前S1基因編碼，具有很強(qiáng)的免疫原性，對(duì)HBV附著肝細(xì)胞誘導(dǎo)特異性免疫反應(yīng)有重要作用，因其含有肝細(xì)胞膜受體，與病毒侵入肝細(xì)胞及HBV復(fù)制關(guān)系密切。Pre-S1抗原的消失在血清中也早于HBsAg陰轉(zhuǎn)、HBeAg陰轉(zhuǎn)及抗-HBe血清轉(zhuǎn)換[2]。有文獻(xiàn)報(bào)道，Pre-S1與HBV復(fù)制指標(biāo)HBeAg、HBV-DNA具有良好相關(guān)性[3-4]。本組數(shù)據(jù)資料與其報(bào)道是一致的。

ALT陽(yáng)性為慢性活動(dòng)性乙肝患者，ALT陰性為無(wú)癥狀HBsAg陽(yáng)性攜帶者。ALT主要存在于肝細(xì)胞內(nèi)。在正常情況下，血清酶活性相對(duì)恒定，在肝細(xì)胞損傷時(shí)，酶從細(xì)胞中釋出，從而使血液中酶明顯升高。

本研究結(jié)果顯示，在HBeAg陽(yáng)性、慢性活動(dòng)性乙肝患者分組中，患者處于疾病活動(dòng)期，病毒載量水平高、肝細(xì)胞有損傷、傳染性強(qiáng)，Pre-S1抗原陽(yáng)性表達(dá)100%與其病毒大量復(fù)制相吻合。其中1例HBV-DNA為陰性與患者病情不符，分析其原因可能為HBV-DNA序列發(fā)生變異及檢測(cè)方法缺陷有關(guān)，HBV-DNA檢測(cè)假陰性，而血清中Pre-S1抗原為強(qiáng)陽(yáng)性，說(shuō)明HBV發(fā)生變異時(shí)，Pre-S1抗原不受基因變異的影響仍能表達(dá)。在HBeAg陰性、慢性活動(dòng)性乙肝患者中，病毒載量較HBeAg陽(yáng)性組降低，隨著HBeAg陰轉(zhuǎn)或抗-HBe陽(yáng)轉(zhuǎn)，Pre-S1抗原表達(dá)也隨之下降，與HBV-DNA符合?；颊呷源嬖诓《緩?fù)制和傳染性、肝細(xì)胞損傷。有研究表明，HBeAg陰性慢性活動(dòng)性乙肝患者主要是由HBV發(fā)生變異所致。HBV前C區(qū)或核心啟動(dòng)子區(qū)基因發(fā)生突變，產(chǎn)生終止密碼子，使HBeAg表達(dá)受阻而導(dǎo)致陰性[5]。血清前S1抗原不受前C區(qū)變異的影響[6]。在無(wú)癥狀HBsAg陽(yáng)性病毒攜帶組中，ALT正常，Pre-S1抗原的陽(yáng)性率為68.2%，健康對(duì)照組20例Pre-S1抗原檢測(cè)均為陰性，提示機(jī)體內(nèi)含有HBV就有前S1抗原，前S1抗原存在于HBV表面，主要存在于完整的Dane顆粒、管型顆粒表面，在病毒感染肝細(xì)胞和機(jī)體免疫應(yīng)答的過(guò)程中起重要作用。ALT陽(yáng)性組Pre-S1抗原陽(yáng)性率與ALT正常組Pre-S1抗原陽(yáng)性率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。從本研究結(jié)果來(lái)看，Pre-S1抗原陽(yáng)性檢出率隨著HBV-DNA載量的增加而增加，三組間HBV-DNA不同載量水平的Pre-S1陽(yáng)性檢出率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這與國(guó)內(nèi)的一些報(bào)道相符合[7-8]。有實(shí)驗(yàn)報(bào)道，無(wú)論病毒載量的高低，Pre-S1抗原檢出率間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）[9]。這與本研究結(jié)果不符，可能與選擇的患者感染狀態(tài)、肝臟是否損傷有關(guān)。

Pre-S1抗原與HBV-DNA呈正相關(guān)，也是病毒復(fù)制的監(jiān)測(cè)指標(biāo)之一。檢測(cè)Pre-S1抗原能較為準(zhǔn)確地了解病毒在體內(nèi)的復(fù)制狀況和傳染性，也能了解疾病的轉(zhuǎn)歸和是否攜帶變異[10]。HBeAg檢測(cè)陰性時(shí)Pre-S1可作為很好的補(bǔ)充項(xiàng)目，一定程度上避免了HBeAg陰性所產(chǎn)生的誤導(dǎo)，在未開展聚合酶鏈反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室，檢測(cè)Pre-S1抗原臨床應(yīng)用價(jià)值更大。在HBV引物對(duì)應(yīng)的DNA序列發(fā)生變異時(shí)，Pre-S1抗原在病毒有無(wú)復(fù)制的監(jiān)測(cè)方面體現(xiàn)其優(yōu)越性，在評(píng)估傳染狀況及評(píng)價(jià)抗病毒治療的效果有臨床指導(dǎo)意義。

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10.3969/j.issn.1009-5519.2016.21.045

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1009-5519（2016）21-3366-02

（2016-08-03）