李海輝 王彥榮 劉 洋 顧莉莉

陜西省延安市人民醫(yī)院眼科，陜西延安716000

門診干眼患者炎癥因子表達(dá)水平及干眼相關(guān)危險(xiǎn)因素研究

李海輝 王彥榮 劉 洋 顧莉莉

陜西省延安市人民醫(yī)院眼科，陜西延安716000

目的探討門診干眼患者炎癥因子的表達(dá)水平及干眼相關(guān)危險(xiǎn)因素。方法選取2014年6月～2016年3月在延安市人民醫(yī)院眼科門診就診的48例干眼患者（A組）和同期在眼科門診單純配鏡的96例非干眼者（B組）作為研究對(duì)象。所有研究對(duì)象均行眼表疾病指數(shù)（OSDI）問卷、淚膜破裂時(shí)間（BUT）檢查、淚液分泌試驗(yàn)Ⅰ（SⅠt）和角膜熒光素染色試驗(yàn)，采用ELISA法檢測(cè)兩組血液和眼淚中白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的濃度，采用多因素Logistic回歸和Spearman秩相關(guān)分析等分析數(shù)據(jù)。結(jié)果A組血液和眼淚中IL-6、IL-1β和TNF-α濃度均明顯高于B組（均P＜0.05）。血液和眼淚中的IL-6、IL-1β和TNF-α均分別與OSDI、BUT、SⅠt和角膜熒光素染色試驗(yàn)結(jié)果顯著相關(guān)（rIL-6血=0.91、-0.94、-0.93、0.61，rIL-6眼淚=0.86、-0.81、-0.77、0.58；rIL-1β血=0.56、-0.48、-0.71、0.62，rIL-1β眼淚=0.55、-0.43、-0.69、0.53；rTNF-α血=0.53、-0.49、-0.45、0.51，rTNF-α眼淚= 0.51、-0.47、-0.44、0.50，均P＜0.05）。多因素Logistic回歸分析顯示，糖尿?。∣R=0.313，95%CI=0.118～0.831，P= 0.020）、沙眼（OR=0.197，95%CI=0.066～0.587，P=0.004）、視頻終端綜合征（OR=0.072，95%CI=0.007～0.774，P= 0.030）和服用抗組胺藥物（OR=0.142，95%CI=0.025～0.796，P=0.027）是干眼的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。結(jié)論血液和眼淚中TNF-α、IL-1β和IL-6的濃度與干眼的病情關(guān)系密切。延安地區(qū)干眼危險(xiǎn)因素眾多，應(yīng)采取針對(duì)性的預(yù)防措施。

白細(xì)胞介素-6；白細(xì)胞介素-1β；腫瘤壞死因子-α；干眼；危險(xiǎn)因素

干眼是影響患者生活質(zhì)量的常見眼部疾病，近年來因?yàn)槠浒l(fā)病率逐年上升且年輕化而備受關(guān)注［1］。干眼的病因復(fù)雜，目前發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，但越來越多的研究證實(shí)炎癥因素與干眼關(guān)系密切［2］，但很少有研究比較炎癥因子在干眼患者及正常人中表達(dá)水平異同，關(guān)于炎癥因子與干眼檢查結(jié)果的相關(guān)關(guān)系也報(bào)道甚少［3］，而延安地區(qū)關(guān)于干眼相關(guān)危險(xiǎn)因素暫未見報(bào)道。本研究擬探討干眼與非干眼患者外周血和眼淚中炎癥因子的表達(dá)水平異同，分析干眼的相關(guān)危險(xiǎn)因素，為其防治提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年6月～2016年3月在延安市人民醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）眼科門診連續(xù)就診的48例（96眼）干眼患者作為實(shí)驗(yàn)組（A組），同時(shí)選擇同期在我院眼科門診單純配鏡的96例非干眼者作為對(duì)照組。匹配標(biāo)準(zhǔn)：性別相同，兩組年齡差＜3歲，均同一地區(qū)居?。?0年。干眼診斷參考我國(guó)2013年角膜病學(xué)組制訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］。所有研究對(duì)象在最近3個(gè)月內(nèi)均沒有眼外傷、眼手術(shù)等。研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，均取得受試者和家屬知情同意。

1.2 方法

1.2.1 眼科檢查采用眼表疾病指數(shù)（ocu1ar surface disease index，OSDI）問卷對(duì)所有研究對(duì)象進(jìn)行干眼癥狀評(píng)估［4］。所有研究對(duì)象均行淚膜破裂時(shí)間（breakup time of tear fi1m，BUT）、淚液分泌試驗(yàn)Ⅰ（Shirmer I test，SⅠt）和角膜熒光素染色試驗(yàn)。熒光素鈉試紙和準(zhǔn)淚液檢測(cè)試紙均購(gòu)自天津晶明新技術(shù)開發(fā)有限公司。

1.2.2 外周血炎癥因子檢測(cè)所有研究對(duì)象均清晨采集空腹肘靜脈血5 mL置于EDTA管中，2000 r/min離心10 min，分離血漿于-20℃保存?zhèn)錂z。采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法（ELISA）檢測(cè)白細(xì)胞介素-6（inter1eukin-6，IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（inter1eukin-1 beta，IL-1β）和腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-a1pha，TNF-α）在靜脈血中的濃度。ELISA試劑盒購(gòu)自北京晶美生物技術(shù)公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.2.3 淚液中炎癥因子檢測(cè)采用毛細(xì)管法于早晨8∶00～10∶00采集所有研究對(duì)象的淚液，通過研究對(duì)象數(shù)次瞬目后用25 μL毛細(xì)管在外眥收集淚液約15 μL，于-80℃保存?zhèn)錂z。采用ELISA法檢測(cè)IL-6、IL-1β和TNF-α的濃度，相關(guān)試劑盒和操作方法同“1.2.2”項(xiàng)下。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，如方差齊，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，如方差不齊，則采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)用中位數(shù)（四分位數(shù)）［M（Q25，Q75）］表示，兩組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；眼科檢查結(jié)果與炎癥因子的相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)分析；干眼相關(guān)影響因素分析采用多因素Logistic回歸分析（以P＜0.1為納入標(biāo)準(zhǔn)）。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組眼科檢查結(jié)果比較

兩組OSDI評(píng)分、SⅠt、BUT和熒光素染色評(píng)分差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見表1。

2.2 兩組外周血和眼淚中炎癥因子水平比較

A組外周血和眼淚中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見表2。

2.3 眼科檢查結(jié)果與炎癥因子相關(guān)性分析

Spearman相關(guān)分析顯示，眼科檢查結(jié)果（OSDI、SⅠt、BUT和熒光素染色評(píng)分）均與炎癥因子（外周血和眼淚中IL-6、IL-1β和TNF-α水平）顯著相關(guān)，其中，SⅠt和BUT與炎癥因子（外周血和眼淚中IL-6、IL-1β和TNF-α水平）呈負(fù)相關(guān)，而OSDI評(píng)分和熒光素染色評(píng)分與炎癥因子（外周血和眼淚中IL-6、IL-1β和TNF-α水平）呈正相關(guān)。見表3。

2.4 干眼相關(guān)因素的單因素分析

單因素分析顯示，高血壓病（χ2=15.73，P＜0.01）、糖尿?。é?=13.37，P＜0.01）、沙眼（χ2=14.67，P＜0.01）、結(jié)締組織?。é?=7.43，P＜0.01）、絕經(jīng)后雌激素治療（χ2=3.13，P＜0.1）、視屏終端綜合征（χ2= 12.91，P＜0.01）、服用抗組胺藥（χ2=12.38，P＜0.01）、使用角膜接觸鏡（χ2=3.17，P＜0.1）和長(zhǎng)期濫用滴眼液（χ2=10.48，P＜0.01）均符合多因素Logistic回歸分析的納入條件。見表4。

表1 兩組眼科檢查結(jié)果比較［M（Q25，Q75）］

表2 兩組外周血和眼淚中炎癥因子水平比較（）

表2 兩組外周血和眼淚中炎癥因子水平比較（）

注：與B組相比，*P＜0.05；IL-6：白細(xì)胞介素-6；IL-1β：白細(xì)胞介素-1β；TNF-α：腫瘤壞死因子-α

組別IL-6（μg/L）外周血眼淚IL-1β（μg/L）外周血眼淚TNF-α（ng/L）外周血眼淚A組（n=48）B組（n=96）100.55±13.56*32.72±13.11 22.06±7.68*8.06±5.99 38.56±8.67*10.22±8.17 132.22±11.05*14.12±10.12 38.56±20.11*27.04±15.64 708.26±100.24*20.12±10.12

表3 眼科檢查結(jié)果與炎癥因子相關(guān)性分析

表4 干眼相關(guān)因素的單因素分析［n（%）］

2.5 干眼相關(guān)因素的多因素Logistic回歸分析

以單因素分析P＜0.1的因素為自變量，以干眼為因變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，糖尿病、沙眼、視屏終端綜合征和服用抗組胺藥為干眼的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（均P＜0.05）。見表5。

表5 干眼相關(guān)因素的多因素Logistic回歸分析

3 討論

IL-6、IL-1β和TNF-α是單核巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生的體內(nèi)重要炎癥因子，均可通過激活單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞等促進(jìn)局部白細(xì)胞聚集，引起炎性反應(yīng)［5-6］。A組血液與眼淚中炎癥因子（IL-6、IL-1β和TNF-α）的表達(dá)均明顯強(qiáng)于B組（均P＜0.05），這與北京等地報(bào)道的類似［2，7-9］，提示炎癥在干眼發(fā)病中起著重要作用，其原因可能與干眼患者眼表常存在免疫調(diào)節(jié)機(jī)制紊亂有關(guān)［10］。國(guó)外也證實(shí)了眼表上皮自身反應(yīng)性T細(xì)胞浸潤(rùn)及前炎癥因子的高表達(dá)所致的炎性反應(yīng)是導(dǎo)致干眼發(fā)病及病情進(jìn)展的關(guān)鍵因素［11］。

IL-6、IL-1β和TNF-α均與眼科檢查結(jié)果相關(guān)，其中與SⅠt和BUT呈負(fù)相關(guān)，而與熒光素染色評(píng)分呈正相關(guān)，這與Boehm等［12］報(bào)道類似，提示IL-6、IL-1β和TNF-α可反映淚膜的穩(wěn)定性、淚液動(dòng)力學(xué)和眼表完整性，也參與了淚膜穩(wěn)定性下降和眼表損害等過程，其表達(dá)水平變化反映了干眼的進(jìn)展過程［13］。IL-6、IL-1β和TNF-α與OSDI評(píng)分呈正相關(guān)，提示IL-6、IL-1β和TNF-α也可反映干眼患者的癥狀和體征。

本研究顯示，糖尿病是干眼的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，其原因可能如下：高糖狀態(tài)可導(dǎo)致糖尿病患者的角膜感覺神經(jīng)障礙，造成眼淚放射的傳入路徑受阻，降低三叉神經(jīng)對(duì)角膜的營(yíng)養(yǎng)作用，同時(shí)可破壞角膜上皮的屏障作用和導(dǎo)致杯狀細(xì)胞減少?gòu)亩鴾p低眼表面親水性。高糖狀態(tài)也可導(dǎo)致糖尿病患者的上皮剝脫，角膜知覺減退，瞬目減少和淚液蒸發(fā)增加等［14-15］。此結(jié)果與廣東省惠東縣報(bào)道一致［16］，但與新疆喀什地區(qū)報(bào)道不同［14］，原因可能與各地區(qū)的研究對(duì)象、環(huán)境、研究手段和醫(yī)療條件等不同有關(guān)。沙眼是干眼的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，這與劉菲菲等［17］報(bào)道一致，原因可能與沙眼可導(dǎo)致淚液分泌異常有關(guān)。視頻終端綜合征患者常存在屏幕放置距離太近、工間休息時(shí)間太少和視覺常處于陰暗環(huán)境等情況［18］，可能導(dǎo)致干眼，該結(jié)果與德州市和惠東縣的研究結(jié)果一致［16，19］。服用抗組胺藥是干眼的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，其原因可能與抗組胺藥物是H1或H2受體拮抗劑，有些能通過血液循環(huán)穿透淚腺，影響毒蕈堿活動(dòng)，減少淚液中水液層和杯狀細(xì)胞的分泌有關(guān)［20-21］。值得注意的是，抗組胺藥若與某些藥物（例如抗鎮(zhèn)靜藥、鼻血管收縮藥等）聯(lián)合應(yīng)用，可加重干眼癥狀［21］，臨床中應(yīng)盡可能避免此情況出現(xiàn)。值得一提的是，高血壓、結(jié)締組織病、絕經(jīng)后雌激素治療、使用角膜接觸鏡和長(zhǎng)期濫用滴眼液在本研究中均未顯示為干眼的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，這與其他地區(qū)報(bào)道不同［19-20］，提示干眼獨(dú)立危險(xiǎn)因素有地區(qū)差異性，原因可能與我國(guó)幅員廣闊，不同地區(qū)的遺傳因素、生活環(huán)境等存在差異有關(guān)［20］，臨床工作者應(yīng)注意本地區(qū)的干眼獨(dú)有危險(xiǎn)因素，采取有效應(yīng)對(duì)措施。

綜上所述，IL-6、IL-1β和TNF-α與干眼病情關(guān)系密切，而干眼的危險(xiǎn)因素眾多，鑒于陜北地區(qū)處于干燥風(fēng)沙地帶，干眼患者常見，臨床應(yīng)關(guān)注干眼的危險(xiǎn)因素，特別對(duì)于有獨(dú)立危險(xiǎn)因素的的患者，應(yīng)采取合理措施干預(yù)和防治干眼。

［1］秦毅，潘志強(qiáng).干眼的病因、發(fā)病機(jī)制與治療進(jìn)展［J］.中華眼科雜志，2013，49（9）：857-863.

［2］中華醫(yī)學(xué)會(huì)眼科學(xué)分會(huì)角膜病學(xué)組.干眼臨床診療專家共識(shí)（2013年）［J］.中華眼科雜志，2013，49（1）：73-75.

［3］孫松，談旭華，任天麗，等.干眼患者淚液及外周血中白細(xì)胞介素-6表達(dá)水平檢測(cè)及相關(guān)研究［J］.中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志，2013，31（2）：186-190.

［4］Amparo F，Schaumberg DA，Dana R.Comparison of Two Questionnaires for Dry Eye Symptom Assessment：The Ocu1ar Surface Disease Index and the Symptom Assessment in Dry Eye［J］.Ophtha1mo1ogy，2015，122（7）：1498-1503.

［5］Schu1ze MB.Type 2 diabete：Do patients with norma1 weight die ear1ier？Higher morta1ity is not restricted to overweightpatients［J］.DtschMedWochenschr，2012，137（42）：2140.

［6］王麗麗，李達(dá).糖尿病患者白內(nèi)障術(shù)后焦慮水平對(duì)干眼癥狀及炎癥因子的影響［J］.國(guó)際眼科雜志，2016，16（5）：841-843.

［7］Zhang J，Yan X，Li H.Ana1ysis of the corre1ations of mucins，inf1ammatory markers，and c1inica1 tests in dry eye［J］.Cornea，2013，32（7）：928-932.

［8］Na KS，Mok JW，Kim JY，et a1.Corre1ations between tear cytokines，chemokines，and so1ub1e receptors and c1inica1 severity of dry eye disease［J］.Invest Ophtha1mo1 Vis Sci，2012，53（9）：5443-5450.

［9］馬宇，劉意，周利曉.2型糖尿病合并干眼癥患者血漿炎癥細(xì)胞因子和乳鐵蛋白水平的變化及意義［J］.海南醫(yī)學(xué)，2012，23（12）：12-13.

［10］常昆，鄭曉汾.Th細(xì)胞及其相關(guān)因子參與干眼發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.國(guó)際眼科縱覽，2016，40（1）：18-22.

［11］Stevenson W，Chauhan SK，Dana R.Dry eye disease：an immune-mediated ocu1ar surface disorder［J］.Arch Ophtha1mo1，2012，130（1）：90-100.

［12］Boehm N，Riechardt AI，Wiegand M，et a1.Proinf1ammatory cytokine profi1ing of tears from dry eye patients by means of antibody microarrays［J］.Invest Ophtha1mo1 Vis Sci，2011，52（10）：7725-7730.

［13］李軍，李丹，范春霞，等.干眼癥患者結(jié)膜上皮細(xì)胞和淚液中TNF-α、IL-1β的表達(dá)及意義［J］.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2010，26（11）：1128-1129.

［14］龔瑩瑩，辜臻晟，張帆，等.新疆喀什地區(qū)維吾爾族人群干眼流行病學(xué)調(diào)查［J］.中華眼視光學(xué)與視覺科學(xué)雜志，2015，17（10）：594-599.

［15］張秀.95例干眼癥狀患者的客觀檢查結(jié)果分析［J］.中國(guó)中醫(yī)眼科雜志，2012，22（1）：42-44.

［16］莊紹君，雷帥臣，羅旭東，等.廣東省惠東縣社區(qū)人群干眼的流行病學(xué)調(diào)查［J］.中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志，2012，30（2）：168-171.

［17］劉菲菲，芮東升，邵明月，等.石河子大學(xué)在校生干眼患病狀況及影響因素分析［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2016，43（1）：91-94.

［18］馬曉蕓，朱劍鋒，殷麗紅，等.視頻終端工作人群干眼流行特征分析［J］.中華眼視光學(xué)與視覺科學(xué)雜志，2014，16（9）：527-531.

［19］王靜，梁玲，鄒會(huì)會(huì).2011/2014年德州市特定人群干眼癥流行趨勢(shì)及相關(guān)危險(xiǎn)因素研究［J］.國(guó)際眼科雜志，2016，16（5）：934-936.

［20］楊萬舉，楊燕寧，邢怡橋，等.干眼病危險(xiǎn)因素的病例對(duì)照研究［J］.中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2012，6（15）：4315-4231.

［21］楊永升，張守康，謝立科.藥源性干眼癥［J］.國(guó)際眼科縱覽，2012，36（4）：245-250.

Study on the inflammatory factor exPression level and risk factors of Patients with dry eye in outPatient clinic

LI HaihuiWANG YanrongLIU YangGU Lili
Department of Ophtha1mo1ogy，the Peop1e's Hospita1 of Yan'an City，Shaanxi Province，Yan'an716000，China

Objective To investigate the the expression 1eve1 of inf1ammatory factor in dry eye patients of outpatient c1inic and its risk factors.Methods 48 patients with dry eye（group A）and 96 vo1unteers（group B）were enro11ed from Ophtha1mo1ogy C1inic of the Peop1e's Hospita1 of Yan'an City from June 2014 to March 2016.The test of ocu1ar surface disease index（OSDI）questionnaire，tear fi1m breakup time（BUT），sehirmerⅠtest（SⅠt）and cornea1 f1uorescence staining test were performed.Inter1eukin-6（IL-6），inter1eukin-1beta（IL-1β）and tumor necrosis factor-a1pha（TNF-α）in serum and tear were detected using enzyme-1inked immunosorbent assay.Data was ana1yzed by the method of mu1-tifactor Logistic regression ana1ysis and Spearman rank corre1ation ana1ysis.Results The concentrations of IL-6，IL-1β and TNF-α in serum and tear in group A were significant1y higher than those in group B（P＜0.05）.IL-6，IL-1β and TNF-α 1eve1s in serum and tear were a11 corre1ated with the score of OSDI，BUT，SⅠt and cornea1 f1uorescence staining test resu1ts（rIL-6-b1ood=0.91，-0.94，-0.93，0.61；rIL-6-tear=0.86，-0.81，-0.77，0.58；rIL-1β-b1ood=0.56，-0.48，-0.71，0.62；rIL-1β-tear=0.55，-0.43，-0.69，0.53；rTNF-α-b1ood=0.53，-0.49，-0.45，0.51；rTNF-α-tear=0.51，-0.47，-0.44，0.50；a11 P＜0.05）. Mu1ti-factor Logistic regression ana1ysis showed that diabetes（OR=0.313，95%CI=0.118-0.831，P=0.020），trachomatis（OR=0.197，95%CI=0.066-0.587，P=0.004），visua1 disp1ay termina1 syndrome（OR=0.072，95%CI=0.007-0.774，P= 0.030）and taking antihistamines（OR=0.142，95%CI=0.025-0.796，P=0.027）were independent risk factors of dry eye. Conclusion The concentrations of TNF-α，IL-1β and IL-6 in serum and tear are c1ose1y re1ated to dry eye condition. Many risk factors contributed to dry eye in Yan'an District.Pertinence measures shou1d be taken to prevent the disease.

Inter1eukin-6；Inter1eukin-1beta；Tumor necrosis factor-a1pha；Dry eye；Risk factors

R770.4

A

1674-4721（2016）07（c）-0127-04

2016-04-22本文編輯：程銘）

陜西省衛(wèi)生科研項(xiàng)目（E8）；陜西省延安市科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（2014KW-12）。