顧浩翔，陸 敏，車大鈿，李 嬪

（1.上海交通大學(xué)附屬兒童醫(yī)院呼吸內(nèi)科，上海200040；2.上海市兒童醫(yī)院兒童內(nèi)分泌科，上海200333）

血清TNF-α、IL-6、IL-8檢測(cè)在重癥支原體肺炎患兒中的價(jià)值

顧浩翔1，陸 敏1，車大鈿1，李 嬪2

（1.上海交通大學(xué)附屬兒童醫(yī)院呼吸內(nèi)科，上海200040；2.上海市兒童醫(yī)院兒童內(nèi)分泌科，上海200333）

目的 探討血清TNF-α、IL-6、IL-8檢測(cè)在重癥支原體肺炎患兒中的應(yīng)用價(jià)值。方法 選取我院于2012年4月至2015年2月入院治療的支原體肺炎兒童患者90例，觀察組45例為重癥支原體肺炎，對(duì)照組45例為一般支原體肺炎，采用流式熒光法，測(cè)定患兒發(fā)病極期、恢復(fù)期血清TNF-α、IL-6及IL-8的水平。結(jié)果 觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8在極期時(shí)的值分別為1.13±0.21、230.5±36.4、0.26±0.08 pg/mL和0.82±0.17、185±31.1、0.18±0.04 pg/mL，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；在恢復(fù)期，觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8的值分別為0.81±0.34、135.32±30.8、0.162 ±0.07 pg/mL和0.62±0.12、109.24±25.5、0.140±0.02 pg/mL，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組患者，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平治療后均顯著降低，前后差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細(xì)胞因子在重癥支原體肺炎的發(fā)生發(fā)展和疾病轉(zhuǎn)歸中起重要作用，可作為監(jiān)測(cè)支原體肺炎嚴(yán)重程度的指標(biāo)。

腫瘤壞死因子； 白細(xì)胞介素6； 白細(xì)胞介素8； 重癥支原體肺炎； 兒童； 應(yīng)用價(jià)值

支原體肺炎現(xiàn)已成為兒童下呼吸道感染，特別是小兒社區(qū)獲得性肺炎的常見病癥之一［1］。支原體肺炎以發(fā)熱、咳嗽、無(wú)痰或白色黏液痰等為主要臨床特征，患兒在使用抗生素后，還可能存在治療較為困難或者長(zhǎng)時(shí)間癥狀無(wú)明顯改善，逐漸發(fā)展成為重癥支原體肺炎的現(xiàn)象［2］。TNF-α（腫瘤壞死因子-α）、IL-6（白細(xì)胞介素6）、IL-8（白細(xì)胞介素8）等細(xì)胞因子及炎癥介質(zhì)對(duì)于重癥支原體肺炎的發(fā)病機(jī)制和病情程度等有正相關(guān)聯(lián)系［3-5］，本次研究對(duì)90例不同程度支原體肺炎兒童極期和恢復(fù)期的TNF-α、IL-6及IL-8進(jìn)行測(cè)試，在于探尋NF-α、IL-6及IL-8等炎性細(xì)胞因子在重癥支原體肺炎的發(fā)生發(fā)展和疾病轉(zhuǎn)歸中具體作用。

材料和方法

1 研究對(duì)象

選取2012年4月至2015年2月在我院進(jìn)行治療的支原體肺炎患兒90例，均符合支原體肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)（兒童肺炎支原體肺炎診治專家共識(shí)（2015年版），經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢查和影像學(xué)檢查得到確診。按病情輕重分為兩組。將重癥支原體肺炎的患兒定為觀察組，共45例；將一般支原體肺炎的患兒定為對(duì)照組。觀察組患兒符合如下基本情況：①血清支原體抗體IgM陽(yáng)性率在1：160以上；②符合重癥肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；③有缺氧表現(xiàn)并且有不同程度的肺外損害。排除標(biāo)準(zhǔn)：①無(wú)肺結(jié)核、支氣管哮喘等其他呼吸系統(tǒng)疾?、跈z測(cè)未發(fā)現(xiàn)除類胸膜肺炎微生物（PPLO）外其他病毒感染。其中男23例，女22例；年齡5～13歲，平均9.1±3.3歲，病史2～14 d；合并癥：心包積液6例，胸腔積液15例，中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變7例，肝脾大5例，皮疹13例。對(duì)照組男20例，女25例；年齡5～16歲，平均9.1±4.6歲，病史3～9 d；對(duì)照組為一般支原體肺炎，無(wú)明顯呼吸困難、缺氧及肺外合并癥等。兩組患者的基本資料對(duì)比，年齡、性別等一般資料上比較差異不顯著（P＞0.05），具有可比性，適合臨床研究。研究前所有患兒家長(zhǎng)都詳細(xì)聽取試驗(yàn)流程的介紹，并簽署了自愿參加本次研究的知情同意書。

2 研究方法

采用流式熒光法（FIA）檢測(cè)血清特異性MP-IgM抗體，分別于發(fā)病初期（或入院初期），治療前后，發(fā)病極期（3～7 d）及恢復(fù)期（8～10 d），空腹抽取每例患者4 mL全血，血樣分別置于美國(guó)BD公司分離膠試管中，-20℃下保存待檢。檢驗(yàn)儀器使用Luminex200流式熒光檢測(cè)儀（美國(guó)Luminex公司），先將配對(duì)三種檢測(cè)物的微球混合，加入待測(cè)血清。該混濁液中，抗體與抗原特異性相互配對(duì)，熒光標(biāo)記在此階段添加。進(jìn)而，微球被微量液體傳輸系統(tǒng)排成單列通過(guò)檢測(cè)器。通過(guò)檢測(cè)器內(nèi)熒光確認(rèn)微球的編號(hào)，其他熒光判斷該編號(hào)微球上的熒光強(qiáng)度，最后經(jīng)由計(jì)算機(jī)處理后得出TNF-α、IL-6及IL-8等細(xì)胞因子及炎癥介質(zhì)的含量。

3 觀察指標(biāo)

記錄并統(tǒng)計(jì)TNF-α、IL-6及IL-8在極期和恢復(fù)期的數(shù)值。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 15.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)表示，比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1 兩組患者極期測(cè)定情況

觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8在極期時(shí)的值分別為1.13±0.21、230.5±36.4、0.26±0.08 pg/mL和0.82±0.17、185±31.1、0.18±0.04 pg/mL，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明TNF-α、IL-6及IL-8對(duì)于支原體肺炎的反應(yīng)，水平越高，肺炎越嚴(yán)重。試驗(yàn)具體數(shù)據(jù)見表1。

表1　兩組患者極期TNF-α、IL-6及IL-8檢測(cè)結(jié)果的比較表（pg/mL）

2 兩組患者恢復(fù)期測(cè)定情況

觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8在恢復(fù)期時(shí)的值分別為0.81±0.34、135.32±30.8、0.162± 0.07 pg/mL和0.62±0.12、109.24±25.5、0.140± 0.02 pg/mL，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。試驗(yàn)具體數(shù)據(jù)見表2。

表2　兩組患者恢復(fù)期TNF-α、IL-6及IL-8檢測(cè)結(jié)果的比較表（pg/mL）

3 兩組患者治療前后TNF-α、IL-6及IL-8水平

重癥支原體患者不論是觀察組還是對(duì)照組，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平在治療后顯著降低，前后差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表3　兩組患者治療前后TNF-α、IL-6及IL-8含量比較（pg/mL）

討論

在兒童肺炎中，重癥支原體肺炎是難于治療、病因復(fù)雜、病程冗長(zhǎng)、病情危重的一種［6］。從近時(shí)期治療的方式來(lái)看，我國(guó)抗生素濫用的現(xiàn)象日漸嚴(yán)重，并且隨著生態(tài)破壞、環(huán)境污染以及其他影響兒童生活環(huán)境因素的發(fā)展，重癥支原體肺炎的發(fā)病率在我國(guó)兒童中呈逐年遞增的態(tài)勢(shì)［7］。

觀察組TNF-α、IL-6及IL-8在極期與恢復(fù)期的值明顯高于治療組，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組患者，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平治療后均顯著降低，前后差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。數(shù)據(jù)顯示了TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細(xì)胞因子在重癥支原體肺炎的發(fā)生發(fā)展和疾病轉(zhuǎn)歸中起重要作用。以往研究，多關(guān)注于TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細(xì)胞因子與支原體肺炎相關(guān)性，并未考慮TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細(xì)胞因子過(guò)度表達(dá)的原因。TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細(xì)胞因子過(guò)度表達(dá)的原因，可能在于參與了MP的發(fā)病機(jī)制。目前，MP的發(fā)病機(jī)制仍未有定論。兩種主流觀點(diǎn)：其一直接由病原體導(dǎo)致，其二間接由病原體激發(fā)了免疫炎癥反應(yīng)。IL-6一方面可促進(jìn)抗體的產(chǎn)生，另一方面會(huì)誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞分化，促進(jìn)釋放炎癥因子。同樣的，TNF-α水平低時(shí)可保護(hù)抗體，增強(qiáng)自身免疫，而濃度偏高，便成為炎癥遞質(zhì)，誘發(fā)炎癥逐漸嚴(yán)重。而 IL-8可激活中性粒細(xì)胞，促進(jìn)其釋放溶酶體酶與超氧化物。病原體侵入體內(nèi)，導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，一方面產(chǎn)生IL-6、TNF-α、IL-8，利用其促炎作用，消除微生物，另一方面，生成IL-10，抑制炎癥發(fā)生。若某一方失衡，就會(huì)導(dǎo)致機(jī)體穩(wěn)態(tài)紊亂。

目前，研究人員多數(shù)認(rèn)為，對(duì)于重癥肺炎的轉(zhuǎn)歸，炎性細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在其中起了重要作用，而且因?yàn)榉窝字гw與人體某些組織存在部分共同抗原［8］，在其進(jìn)入人體后，會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)組織的自身抗體，使得多系統(tǒng)的免疫損害，肺炎支原體的發(fā)病機(jī)制與直接毒性作用及免疫損害有關(guān)。肺炎支原體在進(jìn)入人體后，促使機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，這一過(guò)程中，多種細(xì)胞因子和其他體液因子同時(shí)產(chǎn)生，保護(hù)機(jī)體抵抗病原體侵襲，因?yàn)榉窝字гw的應(yīng)答過(guò)于強(qiáng)烈，多余的炎性細(xì)胞因子累積產(chǎn)生毒害效果［9］。

本研究的結(jié)果顯示，觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8在極期時(shí)的值分別為1.13±0.21、230.5± 36.4、0.26±0.08 pg/mL和0.82±0.17、185±31.1、0.18±0.04pg/mL，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），這說(shuō)明TNF-α、IL-6及IL-8在重癥支原體肺炎中起重要作用；在恢復(fù)期，觀察組與治療組TNF-α、IL-6及IL-8的值分別為0.81±0.34、135.32±30.8、0.162±0.07pg/mL和0.62±0.12、109.24±25.5、0.140±0.02pg/mL，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），結(jié)果表明：隨著病情的好轉(zhuǎn)，兩組患者的TNF-α、IL-6及IL-8水平都有降低，結(jié)果揭示了TNF-α、IL-6及IL-8對(duì)于支原體肺炎的反應(yīng)，水平越高，支原體肺炎越嚴(yán)重；不論是觀察組還是對(duì)照組，血清中TNF-α、IL-6及IL-8水平治療后顯著降低，前后差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

本次研究的不足之處在于研究的對(duì)象只有90例，有些片面性，不能代表全部情況，而且設(shè)計(jì)的觀察指標(biāo)有限，也有一定的局限性，這有待在今后的研究里改善，進(jìn)一步進(jìn)行探討研究。

綜上所述，TNF-α、IL-6及IL-8等炎性細(xì)胞因子在重癥支原體肺炎的發(fā)生發(fā)展和疾病轉(zhuǎn)歸中起重要作用。利用流式熒光法檢測(cè)TNF-α、IL-6及IL-8水平變化對(duì)臨床診斷治療及預(yù)后有一定的臨床價(jià)值，檢測(cè)TNF-α、IL-6及IL-8的水平，可作為監(jiān)測(cè)支原體肺炎嚴(yán)重程度的指標(biāo)。

［1］鐘曉，田寶琳，焦安夏，等.兒童難治性肺炎支原體肺炎44例臨床分析.中國(guó)實(shí)用兒科雜志，2015，30（8）：622-624.

［2］梁粵.肺炎支原體肺炎患兒外周血IL-10/IL-17表達(dá)與肺功能變化的相關(guān)性研究.臨床兒科雜志，2015，33（8）：686-689.

［3］魏紅玲，常艷美，魯珊.肺炎支原體肺炎合并肺栓塞一例.中華兒科雜志，2015，53（2）：143-144.

［4］陳莉莉，劉金榮，趙順英，等.常規(guī)劑量甲潑尼龍治療無(wú)效的兒童難治性肺炎支原體肺炎的臨床特征和治療探討.中華兒科雜志，2014，52（3）：172-176.

［5］張麗君，安淑華，李金英，等.肺炎支原體肺炎患兒氣道黏液栓形成的危險(xiǎn)因素.臨床兒科雜志，2015，33（5）：432-436.

［6］陳蒙，楊軍，趙德育.兩歲以下兒童肺炎支原體肺炎臨床特點(diǎn)分析.臨床兒科雜志，2014，32（12）：1135-1137.

［7］李文，尹育華.難治性肺炎支原體肺炎32例臨床特點(diǎn)及早期診治.中華實(shí)用兒科臨床雜志，2015，30（4）：316-317.

［8］梅玉霞，蔣瑾瑾，蔡斌，等.兒童難治性支原體肺炎臨床危險(xiǎn)因素分析.臨床兒科雜志，2014，32（12）：1138-1140.

［9］中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)呼吸學(xué)組，《中華實(shí)用兒科臨床雜志》編輯委員會(huì).兒童肺炎支原體肺炎診治專家共識(shí)（2015年版）.中華實(shí)用兒科臨床雜志，2015，30（4）：1304-1308.

（潘子昂編輯）

Evaluation of Serum TNF-α，IL-6，IL-8 in Children with Severe Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia

GU Hao-xiang1，LU Min1，CHE Da-dian1，LI Bin2
（1.Department of Respiratory Medicine，Shanghai Children's Hospital，Shanghai Jiao Tong University，Shanghai 200040，China；2.Department of Pediatric Endocrine，Children's Hospital of Shanghai，Shanghai 200333）

Objective To investigate serum TNF-α（tumor necrosis factor-α），IL-6（interleukin-6），IL-8（interleukin-8）detection in children with severe mycoplasma pneumoniae pneumonia.Methods We collected 90 pediatric patients with refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia who were admitted in our hospital were selected from April 2012 to February 2015.In the observation group，there were 45 patients with severe mycoplasma pneumoniae pneumonia，in the control group，there were 45 patients with mycoplasma pneumoniae pneumonia.TNF-α，IL-6 and IL-8 levels were detected at different clinical stages.Results The levels of TNF-α，IL-6 and IL-8 of observation group in the acute phase were 1.13±0.21，230.5±36.4 and 0.26±0.08，and treatment group were 0.82±0.17，185±31.1，0.18±0.04.The difference between two groups were statistically significant（P＜0.05）；In the recovery phase，the levels of TNF-α，IL-6 and IL-8 of observation group were 0.81±0.34，135.32±30.8 and 0.162±0.07 and treatment group were 0.62±0.12，109.24±25.5 and 0.140±0.02 The difference between two groups were statistically significant（P＜0.05）. TNF-α，IL-6 and IL-8 levels significantly reduced after treatment in both groups The differences between before and after treatment were statistically significant（P＜0.05）. Conclusion TNF-α，IL-6 and IL-8 like other inflammatory cytokines play important roles in the development and prognosis of severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia.They can be used as indicators to monitor the severity of the disease.

TNF-α； IL-6； IL-8； Severe mycoplasma pneumoniae pneumonia； Children； Value

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.09.004

2016-05-30；

2016-06-22

李嬪（1963—），女，博士學(xué)位，主任醫(yī)師，教授，博士生導(dǎo)師。主要研究方向：兒童內(nèi)分泌疾病，性早熟，矮小癥，糖尿病。Tel：18917128019；E-mail：Libin66655@126.com