菅敏　李俊新　劉超

【摘要】 目的：探討小兒反復(fù)呼吸道感染（RRTI）與T淋巴細(xì)胞亞群及微量元素之間的關(guān)系。方法：選取2013年12月-2015年1月來本院就診的68例RRTI患兒為病例組，選取同期的68例健康兒童為對照組，采用流式細(xì)胞儀及原子吸收光譜法對兩組兒童外周血T淋巴細(xì)胞亞群及全血微量元素進(jìn)行檢測及比較。結(jié)果：RRTI組兒童血鋅、鐵、鈣、CD3+、CD4+及CD4+/CD8+均低于對照組，CD8+高于對照組，比較差異有同統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；且發(fā)作期與緩解期比較，差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。RRTI組銅、鎂與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：RRTI患兒存在免疫功能失調(diào)，微量元素鈣、鐵、鋅均有不同程度下降，并可能與患兒的發(fā)病、病情轉(zhuǎn)歸、預(yù)后有關(guān)，這些指標(biāo)的變化可作為患病風(fēng)險及評價療效的參考指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 T淋巴細(xì)胞亞群； 微量元素； 反復(fù)呼吸道感染

Correction between the T Lymphocyte Subsets， Trace Elements and Children with Recurrent Respiratory Tract Infection/JIAN Min， LI Jun-xin， LIU Chao.//Medical Innovation of China，2016，13（04）：061-064

【Abstract】 Objective： To explore the relationship between the trace elements， blood T lymphocyte subsets， and children with recurrent respiratory tract infection. Method： 68 children with recurrent respiratory tract infection from December 2013 to January 2015 in the hospital were chosen as observation group， and 68 healthy children at the same period were selected as control group. The level of blood trace elements and blood T lymphocyte subsets was detected and compared by atomic absorption spectrometry and flow cytometry between the two groups. Result： The zinc， ferrum， calcium， and CD3+， CD4+， CD4+/CD8+ of the observation group was significantly lower than that of the control group， while CD8+ was higher， with significant difference （P<0.05）. Detection result of the observation group at the stage of attack was lower than that of the children at the stage of catabasis （P<0.05）. There was no significant difference in the contents of copper and magnesium in blood between the two groups （P>0.05）. Conclusion： Immune dysfunction can be observed in children with RRTI， trace elements such as calcium， ferrum， zinc decrease in varying degrees， which can be correlated with onset， outcome， and prognosis of children with RRTI， the changes of indexes can be used as reference indexes to evaluate curative effect.

【Key words】 T lymphocyte subsets； Trace elements； Recurrent respiratory tract infection

First-authors address： Qingdao Women and Childrens Hospital， Qingdao 266034， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.04.018

反復(fù)呼吸道感染（Recurrent respiratory tract infection， RRTI）是兒科常見病、多發(fā)病，其病程長、病情反復(fù)難愈，易導(dǎo)致許多并發(fā)癥，對患兒的生長發(fā)育和智力發(fā)育極為不利。其病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，除與先天性免疫缺陷和遺傳因素有關(guān)外，目前認(rèn)為與微量元素的缺乏及人體的免疫功能紊亂有關(guān)[1-2]。本文通過比較RRTI患兒和健康兒童外周血T淋巴細(xì)胞亞群及全血微量元素水平，探討兒童RRTI與微量元素的關(guān)系及了解RRTI患兒免疫功能的變化狀態(tài)，為本病的預(yù)防及治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年12月-2015年2月本院收治的0～7歲RRTI患兒68例為病例組，男32例，女36例，平均年齡（3.2±1.2）歲；其中緩解期患兒33例，發(fā)作期患兒35例。所有入選病例均符合中華醫(yī)學(xué)會兒科分會制訂的RRTI診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。同時選取在本院門診查體的健康兒童68例為對照組，男34例，女34例，平均年齡（3.0±1.5）歲。兩組兒童均排除先天性心臟病、佝僂病、貧血、肺及氣管等疾病，采血前3個月內(nèi)均未使用過免疫調(diào)節(jié)劑。兩組研究對象性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 儀器與方法 微量元素的檢測應(yīng)用原子吸收光譜儀及其配套試劑（北京博暉公司生產(chǎn)，BH5100S）進(jìn)行檢測。外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測應(yīng)用流式細(xì)胞儀（美國BD公司生產(chǎn)，BD FACSCANTO TM Ⅱ）收獲細(xì)胞，由multiSET軟件自動分析得出CD3+、CD4+、CD8+細(xì)胞在外周血中的百分率及CD4+/CD8+比值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 使用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 RRTI組與對照組T淋巴細(xì)胞亞群水平比較 RRTI組CD3+、CD4+及CD4+/CD8+均低于對照組，CD8+高于對照組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。RRTI發(fā)作期CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+與緩解期比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 RRTI組與對照組微量元素比較 RRTI組血鋅、鐵、鈣濃度均低于對照組，比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；RRTI組銅濃度高于對照組，鎂濃度低于對照組，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。RRTI發(fā)作期血鋅、鐵、鈣濃度與緩解期比較均降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3 討論

RRTI是指1年以內(nèi)發(fā)生上、下呼吸道感染的次數(shù)頻繁，超出了正常范圍。RRTI患兒大多存在呼吸道解剖異常、呼吸道吸入、免疫缺陷病、先天性心臟病等基礎(chǔ)疾病。研究[4-5]表明，小兒免疫系統(tǒng)發(fā)育不成熟，免疫功能紊亂是RRTI的主要原因之一。目前，判斷細(xì)胞免疫功能常用的方法是T淋巴細(xì)胞亞群檢測[6]。人體內(nèi)有兩種主要的T細(xì)胞，分為CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞。CD4+T細(xì)胞是輔助誘導(dǎo)性T細(xì)胞亞群（Th細(xì)胞），輔助B細(xì)胞、其他T細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的免疫應(yīng)答，產(chǎn)生抗體并且促進(jìn)抑制性T細(xì)胞、細(xì)胞毒性T細(xì)胞的增殖與成熟及激活巨噬細(xì)胞清除細(xì)胞內(nèi)病原體。CD4+細(xì)胞減少說明B細(xì)胞產(chǎn)生免疫球蛋白減少以及細(xì)胞免疫功能低下；CD8+是抑制性細(xì)胞（Ts）或細(xì)胞毒性細(xì)胞（Tc）亞群，在免疫調(diào)節(jié)方面起負(fù)反饋作用，可抑制過度的免疫反應(yīng)，在維持免疫耐受方面有重要作用，其數(shù)量增多表示免疫受到抑制；CD4+/CD8+比值表示Th與Ts之間功能平衡的狀態(tài)，是人體免疫系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定最重要的指標(biāo)，其降低提示Th細(xì)胞功能相對不足，Ts細(xì)胞功能亢進(jìn)，人體細(xì)胞免疫功能降低[7-8]。T淋巴細(xì)胞亞群CD4+和CD8+通過直接作用和分泌細(xì)胞因子相互誘導(dǎo)、相互抑制形成T細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)，在維持免疫穩(wěn)定和人體免疫應(yīng)答的調(diào)控方面具有重要作用。研究表明，各種致病因子侵入人體后，既能使患兒體內(nèi)的T淋巴細(xì)胞大量凋亡，使其數(shù)量減少，又能誘發(fā)T淋巴細(xì)胞亞群分化異常，引起人體細(xì)胞免疫功能的紊亂，使病情很難控制，甚至出現(xiàn)惡化[9-10]。?？似糩11]研究發(fā)現(xiàn)，CD4+細(xì)胞降低是RRTI發(fā)病機(jī)制的重要環(huán)節(jié)。易著文[12]研究發(fā)現(xiàn)，RRTI患兒免疫異常者占20.9%～36.0%。張志剛等[13]還報道CD4+/CD8+每降低1個單位，RRTI風(fēng)險增加16.1。本研究發(fā)現(xiàn)，RRTI組CD3+、CD4+細(xì)胞百分率、CD4+/CD8+比值均明顯低于對照組，而CD8+細(xì)胞百分率則高于對照組，提示RRTI患兒免疫功能異常和紊亂，細(xì)胞免疫功能低下。RRTI緩解期和發(fā)作期之間比較，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD8+存在明顯差異說明RRTI患兒細(xì)胞免疫狀態(tài)有明顯的變化規(guī)律，且與其所處分期相關(guān)，因此可作為疾病發(fā)展轉(zhuǎn)歸的有效判斷因子。其可能的機(jī)制是受病毒感染的RRTI患兒，其Th細(xì)胞遭到侵犯，CD4+細(xì)胞分化受阻，破壞增加，而Ts細(xì)胞活化，CD8+數(shù)量增多，造成免疫功能紊亂；同時免疫器官受到病毒侵犯，造成總T淋巴細(xì)胞減少，功能障礙，免疫功能降低甚至受到抑制，從而繼發(fā)細(xì)菌感染，免疫功能進(jìn)一步減低，使呼吸道感染反復(fù)發(fā)生。值得關(guān)注的是，本研究發(fā)現(xiàn)RRTI患兒發(fā)作期及緩解期均存在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD8+異常，而非RRTI的呼吸道感染恢復(fù)期T淋巴細(xì)胞亞群已恢復(fù)正常[14]。這說明非RRTI的急性呼吸道感染的患兒，其細(xì)胞免疫功能低下與失調(diào)是暫時性的；而RRTI患兒不僅存在細(xì)胞免疫功能異常，且該異常為一持續(xù)過程。

微量元素作為人體內(nèi)酶、維生素、激素等活性物質(zhì)的重要組成成分，在維護(hù)人體的正常代謝和生命體征中起著至關(guān)重要的作用，尤其對于正處于發(fā)育期的兒童更是必不可少的。微量元素在體內(nèi)含量較少，卻具有很大的生物活性，其缺乏或過量都將嚴(yán)重影響兒童的生長發(fā)育、智力水平及免疫功能[15]。銅、鋅、鈣、鎂、鐵是人體必需的微量元素，也是人體最容易出現(xiàn)失衡的微量元素[16]。鐵參與核酸和蛋白質(zhì)合成，其缺乏將引起整個人體的生理紊亂。缺鐵或隱性缺鐵可抑制抗體產(chǎn)生，干擾溶菌酶的活性，使白細(xì)胞殺菌功能減弱，降低對感染的應(yīng)答效能，易發(fā)生RRTI[17-18]。文獻(xiàn)[19]證實，缺鐵會直接損傷淋巴細(xì)胞的生成，造成外周血淋巴細(xì)胞絕對數(shù)降低，Th細(xì)胞和Ts細(xì)胞比值減少。淋巴細(xì)胞在隱性缺鐵階段已有下降，其中以CD4+下降最為顯著；淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)低下，CD4+分泌IL-2、IL-6減少，從而減弱了遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，降低了淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。缺鐵還可使RBC-C3b數(shù)目和/或活性降低，導(dǎo)致紅細(xì)胞對外源性致病原的黏附清除能力減弱。缺鋅主要損傷細(xì)胞免疫，也可同時伴較嚴(yán)重的體液免疫損傷。鋅參與核酸、蛋白質(zhì)和能量的代謝及氧化還原過程，有利于免疫細(xì)胞的分裂和增殖。缺鋅時，胸腺、淋巴結(jié)萎縮，使淋巴細(xì)胞功能減弱，免疫細(xì)胞發(fā)育受到障礙，從而降低人體免疫功能和白細(xì)胞殺菌作用。研究證實，鋅缺乏與兒童腹瀉、肺炎等感染性疾病密切相關(guān)，因此合理補(bǔ)鋅可促進(jìn)兒童免疫細(xì)胞的發(fā)育和分化增殖，提高人體的免疫應(yīng)答[20]。鈣能增加氣管、支氣管的纖毛運動，促進(jìn)吞噬細(xì)胞的游走、吞噬，增強(qiáng)呼吸道清除功能。免疫球蛋白的生成及細(xì)胞因子的釋放都離不開鈣離子。鈣能增加血管的致密度，降低其通透性，在肌肉應(yīng)激、細(xì)胞粘著等生理過程中都起著非常重要的作用。缺鈣不僅引起兒童佝僂病，還可使細(xì)胞因子的活性降低（如IL-1、IL-5、IL-6、TNF-α），從而破壞淋巴細(xì)胞的功能，導(dǎo)致人體免疫功能降低，機(jī)體易感染性增大而發(fā)生RRRI[21-22]。本研究結(jié)果顯示，RRTI組鋅、鐵、鈣均低于對照組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義；RRTI組銅略高于對照組，鎂低于對照組，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，說明微量元素的變化與RRTI的發(fā)生有一定關(guān)系，尤其是鋅、鐵含量明顯低于對照組，提示鋅、鐵缺乏可導(dǎo)致患兒身體防御功能下降而易患感染，積極補(bǔ)充鋅、鐵可使人體免疫狀態(tài)得到一定的改善。RRTI組發(fā)作期鋅、鐵、鈣均低于緩解期，說明微量元素與病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，可將其作為監(jiān)測疾病、干預(yù)治療效果的重要參考指標(biāo)。

綜上所述，外周血T淋巴細(xì)胞亞群和全血微量元素與RRTI的發(fā)病和治療密切相關(guān)。RRTI患兒抵抗力降低，消耗增加，吸收和利用微量元素的功能受到障礙，而微量元素的缺乏又引起T淋巴細(xì)胞亞群比例失衡，機(jī)體免疫功能降低，導(dǎo)致機(jī)體對外界抗感染能力的減弱，以至反復(fù)感染。因此，對RRTI患兒進(jìn)行抗感染治療同時，應(yīng)積極改善和提高患兒免疫功能并建議檢測微量元素，及時補(bǔ)充缺乏的微量元素，對RRTI的治療和預(yù)防可起到積極的作用。

參考文獻(xiàn)

[1]譚春迎.反復(fù)呼吸道感染患兒與同齡健康小兒血液中5種微量元素檢測對照分析[J].中國中西醫(yī)結(jié)合兒科學(xué)，2009，27（4）：341-342.

[2]馮益真.實用小兒呼吸病學(xué)[M].北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，1995：207.

[3]中華醫(yī)學(xué)會兒科分會呼吸學(xué)組《中華兒科雜志》編輯委員會.反復(fù)呼吸道感染的臨床概念和處理原則[J].中華兒科雜志，2008，46（2）：108-110.

[4]孟平英，鄭速征.反復(fù)呼吸道感染患兒免疫功能變化分析[J].中華實用診斷與治療雜志，2013，27（7）：718-719.

[5]勞金泉，潘強(qiáng).學(xué)齡前兒童反復(fù)呼吸道感染相關(guān)因素分析[J]中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2013，10（10）：125-126.

[6]楊錫強(qiáng).T細(xì)胞亞群的臨床意義[J].中國實用兒科雜志，2000，15（4）：250-260.

[7]楊錫強(qiáng)，沈錦.T細(xì)胞功能缺陷所致的免疫球蛋白缺乏癥[J].國外醫(yī)學(xué)：兒科學(xué)分冊，1990，17（5）：228-232.

[8]韓瑞珠，郝艷艷，侯安存.反復(fù)呼吸道感染兒童細(xì)胞免疫及體液免疫狀況[J].實用兒科臨床雜志，2008，23（10）：736-737.

[9] Zanetti M， Castiglioni P， Ingulli E. Principles of memory CD8 T-cells generation in relation to protective immunity[J].Adv Exp Med Biol，2010，684（2）：108-125.

[10] Mu J， Jeyanathan M， Shaler C R， et al. Respiratory mucosal immunization with adenovirus gene transfer vector induce helper CD4 T-cell independent protective immunity[J].J Gene Med，2010，12（8）：693-704.

[11]?？似?反復(fù)呼吸道感染患兒細(xì)胞及體液免疫功能及血清SIL-2R水平監(jiān)測的臨床研究[J].臨床兒科雜志，2000，18（6）：352-354.

[12]易著文.疑難兒科學(xué)[M].武漢：湖北科學(xué)技術(shù)出版社，2002：162-184.

[13]張志剛，李星.小兒反復(fù)呼吸道感染與免疫功能相關(guān)關(guān)系的研究[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2012，50（13）：40-41.

[14]馬蘭，侯安存，杭敏，等.呼吸道合胞病毒及其他病毒肺炎患兒血淋巴細(xì)胞亞群的變化[J].實用兒科臨床雜志，2006，21（16）：1058-1059.

[15]張海瓊，蔣渝采，韋小妮，等.柳州地區(qū)6736例學(xué)齡前兒童微量元素檢測結(jié)果分析[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2011，8（33）：100-102.

[16]曾秀雅，王前明，謝連志，等.1550例12歲以下兒童全血微量元素結(jié)果分析[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2014，11（13）：83-85.

[17]肖毅華，張邦梅.小兒反復(fù)呼吸道感染120例病因與發(fā)病機(jī)制分析[J].長江大學(xué)學(xué)報（自然版），2013，12（1）：20-22.

[18]于翠云.反復(fù)呼吸道感染患者的相關(guān)因素探討與預(yù)防措施[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2013，10（8）：137-138.

[19]張?zhí)烀?反復(fù)呼吸道感染兒童全血微量元素分析[J].長江大學(xué)學(xué)報自然科學(xué)版：醫(yī)學(xué)（下旬），2013，10（18）：36.

[20]顧蓁，沈華琴，趙普.鋅制劑防治小兒急性腹瀉效果觀察[J].臨床兒科雜志，2011，29（12）：249-251.

[21]岳愛玲.反復(fù)呼吸道感染兒童免疫功能與微量元素的探討[J].醫(yī)學(xué)信息，2012，25（1）：389-390.

[22] Pourfallah F， Javadian S， Zamani Z， et al. Evaluation of serum levels of essential trace elements in patients with pulmonary tuberculosis before and after treatment by age and gender[J].Pak J Biol Sci，2011，4（10）：590-594.

（收稿日期：2015-10-01） （本文編輯：王宇）