菅敏　李俊新　劉超

【摘要】 目的：探討小兒反復(fù)呼吸道感染（RRTI）與T淋巴細胞亞群及微量元素之間的關(guān)系。方法：選取2013年12月-2015年1月來本院就診的68例RRTI患兒為病例組，選取同期的68例健康兒童為對照組，采用流式細胞儀及原子吸收光譜法對兩組兒童外周血T淋巴細胞亞群及全血微量元素進行檢測及比較。結(jié)果：RRTI組兒童血鋅、鐵、鈣、CD3+、CD4+及CD4+/CD8+均低于對照組，CD8+高于對照組，比較差異有同統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；且發(fā)作期與緩解期比較，差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。RRTI組銅、鎂與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：RRTI患兒存在免疫功能失調(diào)，微量元素鈣、鐵、鋅均有不同程度下降，并可能與患兒的發(fā)病、病情轉(zhuǎn)歸、預(yù)后有關(guān)，這些指標的變化可作為患病風險及評價療效的參考指標。

【關(guān)鍵詞】 T淋巴細胞亞群； 微量元素； 反復(fù)呼吸道感染

Correction between the T Lymphocyte Subsets， Trace Elements and Children with Recurrent Respiratory Tract Infection/JIAN Min， LI Jun-xin， LIU Chao.//Medical Innovation of China，2016，13（04）：061-064

【Abstract】 Objective： To explore the relationship between the trace elements， blood T lymphocyte subsets， and children with recurrent respiratory tract infection. Method： 68 children with recurrent respiratory tract infection from December 2013 to January 2015 in the hospital were chosen as observation group， and 68 healthy children at the same period were selected as control group. The level of blood trace elements and blood T lymphocyte subsets was detected and compared by atomic absorption spectrometry and flow cytometry between the two groups. Result： The zinc， ferrum， calcium， and CD3+， CD4+， CD4+/CD8+ of the observation group was significantly lower than that of the control group， while CD8+ was higher， with significant difference （P<0.05）. Detection result of the observation group at the stage of attack was lower than that of the children at the stage of catabasis （P<0.05）. There was no significant difference in the contents of copper and magnesium in blood between the two groups （P>0.05）. Conclusion： Immune dysfunction can be observed in children with RRTI， trace elements such as calcium， ferrum， zinc decrease in varying degrees， which can be correlated with onset， outcome， and prognosis of children with RRTI， the changes of indexes can be used as reference indexes to evaluate curative effect.

【Key words】 T lymphocyte subsets； Trace elements； Recurrent respiratory tract infection

First-authors address： Qingdao Women and Childrens Hospital， Qingdao 266034， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.04.018

反復(fù)呼吸道感染（Recurrent respiratory tract infection， RRTI）是兒科常見病、多發(fā)病，其病程長、病情反復(fù)難愈，易導(dǎo)致許多并發(fā)癥，對患兒的生長發(fā)育和智力發(fā)育極為不利。其病因及發(fā)病機制尚未完全明確，除與先天性免疫缺陷和遺傳因素有關(guān)外，目前認為與微量元素的缺乏及人體的免疫功能紊亂有關(guān)[1-2]。本文通過比較RRTI患兒和健康兒童外周血T淋巴細胞亞群及全血微量元素水平，探討兒童RRTI與微量元素的關(guān)系及了解RRTI患兒免疫功能的變化狀態(tài)，為本病的預(yù)防及治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年12月-2015年2月本院收治的0～7歲RRTI患兒68例為病例組，男32例，女36例，平均年齡（3.2±1.2）歲；其中緩解期患兒33例，發(fā)作期患兒35例。所有入選病例均符合中華醫(yī)學(xué)會兒科分會制訂的RRTI診斷標準[3]。同時選取在本院門診查體的健康兒童68例為對照組，男34例，女34例，平均年齡（3.0±1.5）歲。兩組兒童均排除先天性心臟病、佝僂病、貧血、肺及氣管等疾病，采血前3個月內(nèi)均未使用過免疫調(diào)節(jié)劑。兩組研究對象性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 儀器與方法 微量元素的檢測應(yīng)用原子吸收光譜儀及其配套試劑（北京博暉公司生產(chǎn)，BH5100S）進行檢測。外周血T淋巴細胞亞群檢測應(yīng)用流式細胞儀（美國BD公司生產(chǎn)，BD FACSCANTO TM Ⅱ）收獲細胞，由multiSET軟件自動分析得出CD3+、CD4+、CD8+細胞在外周血中的百分率及CD4+/CD8+比值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 使用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 RRTI組與對照組T淋巴細胞亞群水平比較 RRTI組CD3+、CD4+及CD4+/CD8+均低于對照組，CD8+高于對照組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。RRTI發(fā)作期CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+與緩解期比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 RRTI組與對照組微量元素比較 RRTI組血鋅、鐵、鈣濃度均低于對照組，比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；RRTI組銅濃度高于對照組，鎂濃度低于對照組，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。RRTI發(fā)作期血鋅、鐵、鈣濃度與緩解期比較均降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3 討論

RRTI是指1年以內(nèi)發(fā)生上、下呼吸道感染的次數(shù)頻繁，超出了正常范圍。RRTI患兒大多存在呼吸道解剖異常、呼吸道吸入、免疫缺陷病、先天性心臟病等基礎(chǔ)疾病。研究[4-5]表明，小兒免疫系統(tǒng)發(fā)育不成熟，免疫功能紊亂是RRTI的主要原因之一。目前，判斷細胞免疫功能常用的方法是T淋巴細胞亞群檢測[6]。人體內(nèi)有兩種主要的T細胞，分為CD4+T細胞和CD8+T細胞。CD4+T細胞是輔助誘導(dǎo)性T細胞亞群（Th細胞），輔助B細胞、其他T細胞及巨噬細胞的免疫應(yīng)答，產(chǎn)生抗體并且促進抑制性T細胞、細胞毒性T細胞的增殖與成熟及激活巨噬細胞清除細胞內(nèi)病原體。CD4+細胞減少說明B細胞產(chǎn)生免疫球蛋白減少以及細胞免疫功能低下；CD8+是抑制性細胞（Ts）或細胞毒性細胞（Tc）亞群，在免疫調(diào)節(jié)方面起負反饋作用，可抑制過度的免疫反應(yīng)，在維持免疫耐受方面有重要作用，其數(shù)量增多表示免疫受到抑制；CD4+/CD8+比值表示Th與Ts之間功能平衡的狀態(tài)，是人體免疫系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定最重要的指標，其降低提示Th細胞功能相對不足，Ts細胞功能亢進，人體細胞免疫功能降低[7-8]。T淋巴細胞亞群CD4+和CD8+通過直接作用和分泌細胞因子相互誘導(dǎo)、相互抑制形成T細胞網(wǎng)絡(luò)，在維持免疫穩(wěn)定和人體免疫應(yīng)答的調(diào)控方面具有重要作用。研究表明，各種致病因子侵入人體后，既能使患兒體內(nèi)的T淋巴細胞大量凋亡，使其數(shù)量減少，又能誘發(fā)T淋巴細胞亞群分化異常，引起人體細胞免疫功能的紊亂，使病情很難控制，甚至出現(xiàn)惡化[9-10]。?？似糩11]研究發(fā)現(xiàn)，CD4+細胞降低是RRTI發(fā)病機制的重要環(huán)節(jié)。易著文[12]研究發(fā)現(xiàn)，RRTI患兒免疫異常者占20.9%～36.0%。張志剛等[13]還報道CD4+/CD8+每降低1個單位，RRTI風險增加16.1。本研究發(fā)現(xiàn)，RRTI組CD3+、CD4+細胞百分率、CD4+/CD8+比值均明顯低于對照組，而CD8+細胞百分率則高于對照組，提示RRTI患兒免疫功能異常和紊亂，細胞免疫功能低下。RRTI緩解期和發(fā)作期之間比較，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD8+存在明顯差異說明RRTI患兒細胞免疫狀態(tài)有明顯的變化規(guī)律，且與其所處分期相關(guān)，因此可作為疾病發(fā)展轉(zhuǎn)歸的有效判斷因子。其可能的機制是受病毒感染的RRTI患兒，其Th細胞遭到侵犯，CD4+細胞分化受阻，破壞增加，而Ts細胞活化，CD8+數(shù)量增多，造成免疫功能紊亂；同時免疫器官受到病毒侵犯，造成總T淋巴細胞減少，功能障礙，免疫功能降低甚至受到抑制，從而繼發(fā)細菌感染，免疫功能進一步減低，使呼吸道感染反復(fù)發(fā)生。值得關(guān)注的是，本研究發(fā)現(xiàn)RRTI患兒發(fā)作期及緩解期均存在CD3+、CD4+、CD8+、CD4+CD8+異常，而非RRTI的呼吸道感染恢復(fù)期T淋巴細胞亞群已恢復(fù)正常[14]。這說明非RRTI的急性呼吸道感染的患兒，其細胞免疫功能低下與失調(diào)是暫時性的；而RRTI患兒不僅存在細胞免疫功能異常，且該異常為一持續(xù)過程。

微量元素作為人體內(nèi)酶、維生素、激素等活性物質(zhì)的重要組成成分，在維護人體的正常代謝和生命體征中起著至關(guān)重要的作用，尤其對于正處于發(fā)育期的兒童更是必不可少的。微量元素在體內(nèi)含量較少，卻具有很大的生物活性，其缺乏或過量都將嚴重影響兒童的生長發(fā)育、智力水平及免疫功能[15]。銅、鋅、鈣、鎂、鐵是人體必需的微量元素，也是人體最容易出現(xiàn)失衡的微量元素[16]。鐵參與核酸和蛋白質(zhì)合成，其缺乏將引起整個人體的生理紊亂。缺鐵或隱性缺鐵可抑制抗體產(chǎn)生，干擾溶菌酶的活性，使白細胞殺菌功能減弱，降低對感染的應(yīng)答效能，易發(fā)生RRTI[17-18]。文獻[19]證實，缺鐵會直接損傷淋巴細胞的生成，造成外周血淋巴細胞絕對數(shù)降低，Th細胞和Ts細胞比值減少。淋巴細胞在隱性缺鐵階段已有下降，其中以CD4+下降最為顯著；淋巴細胞增殖反應(yīng)低下，CD4+分泌IL-2、IL-6減少，從而減弱了遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，降低了淋巴細胞轉(zhuǎn)化率。缺鐵還可使RBC-C3b數(shù)目和/或活性降低，導(dǎo)致紅細胞對外源性致病原的黏附清除能力減弱。缺鋅主要損傷細胞免疫，也可同時伴較嚴重的體液免疫損傷。鋅參與核酸、蛋白質(zhì)和能量的代謝及氧化還原過程，有利于免疫細胞的分裂和增殖。缺鋅時，胸腺、淋巴結(jié)萎縮，使淋巴細胞功能減弱，免疫細胞發(fā)育受到障礙，從而降低人體免疫功能和白細胞殺菌作用。研究證實，鋅缺乏與兒童腹瀉、肺炎等感染性疾病密切相關(guān)，因此合理補鋅可促進兒童免疫細胞的發(fā)育和分化增殖，提高人體的免疫應(yīng)答[20]。鈣能增加氣管、支氣管的纖毛運動，促進吞噬細胞的游走、吞噬，增強呼吸道清除功能。免疫球蛋白的生成及細胞因子的釋放都離不開鈣離子。鈣能增加血管的致密度，降低其通透性，在肌肉應(yīng)激、細胞粘著等生理過程中都起著非常重要的作用。缺鈣不僅引起兒童佝僂病，還可使細胞因子的活性降低（如IL-1、IL-5、IL-6、TNF-α），從而破壞淋巴細胞的功能，導(dǎo)致人體免疫功能降低，機體易感染性增大而發(fā)生RRRI[21-22]。本研究結(jié)果顯示，RRTI組鋅、鐵、鈣均低于對照組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義；RRTI組銅略高于對照組，鎂低于對照組，但差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，說明微量元素的變化與RRTI的發(fā)生有一定關(guān)系，尤其是鋅、鐵含量明顯低于對照組，提示鋅、鐵缺乏可導(dǎo)致患兒身體防御功能下降而易患感染，積極補充鋅、鐵可使人體免疫狀態(tài)得到一定的改善。RRTI組發(fā)作期鋅、鐵、鈣均低于緩解期，說明微量元素與病情嚴重程度密切相關(guān)，可將其作為監(jiān)測疾病、干預(yù)治療效果的重要參考指標。

綜上所述，外周血T淋巴細胞亞群和全血微量元素與RRTI的發(fā)病和治療密切相關(guān)。RRTI患兒抵抗力降低，消耗增加，吸收和利用微量元素的功能受到障礙，而微量元素的缺乏又引起T淋巴細胞亞群比例失衡，機體免疫功能降低，導(dǎo)致機體對外界抗感染能力的減弱，以至反復(fù)感染。因此，對RRTI患兒進行抗感染治療同時，應(yīng)積極改善和提高患兒免疫功能并建議檢測微量元素，及時補充缺乏的微量元素，對RRTI的治療和預(yù)防可起到積極的作用。

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（收稿日期：2015-10-01） （本文編輯：王宇）