周國江,趙子龍,楊 勇,任玉峰,程 肇,王 娟

(安康市中心醫(yī)院 病理科，陜西 安康725000)

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*通訊作者

環(huán)氧合酶2和血管內(nèi)皮生長因子C在直腸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義

周國江,趙子龍*,楊 勇,任玉峰,程 肇,王 娟

(安康市中心醫(yī)院 病理科，陜西 安康725000)

目的 研究環(huán)氧合酶2(COX-2)和血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)在直腸癌中的表達(dá)及臨床意義。方法 選取93例直腸癌組織標(biāo)本及其癌旁正常組織標(biāo)本切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，測定組織中COX-2、VEGF-C的表達(dá)水平，并分析其與直腸癌臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 直腸癌組織標(biāo)本中COX-2、VEGF-C表達(dá)的陽性率均顯著高于癌旁正常組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。COX-2、VEGF-C的表達(dá)與性別、年齡均無關(guān)(P>0.05)；與分化程度、Duke＇s分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。Spearman相關(guān)分析結(jié)果表明，直腸癌組織中COX-2、VEGF-C表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.489，P=0.000)。結(jié)論 COX-2和VEGF-C在直腸癌組織中的表達(dá)明顯升高，且與疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，可作為直腸癌的診斷、治療以及預(yù)后判斷重要的輔助指標(biāo)。

環(huán)氧合酶2；血管內(nèi)皮生長因子C；直腸癌；表達(dá)

(ChinJLabDiagn,2016,20:1649)

直腸癌是臨床上常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。直腸癌的惡性程度比較高、侵襲力較強(qiáng)、容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，患者的預(yù)后差，目前該病的發(fā)生機(jī)制尚不完全清楚[1,2]。環(huán)氧合酶 2(cyclooxygenase-2，COX-2)是前列腺素合成過程中的一個(gè)限速酶，有研究證實(shí)，COX-2參與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程[3]。血管內(nèi)皮生長因子C(vascular endothelial growth factor-C，VEGF-C)是一種與血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)同源的內(nèi)皮細(xì)胞生長因子，可以誘導(dǎo)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，并可以使淋巴管的通透性明顯增加[4]。相關(guān)研究表明，COX-2、VEGF-C的表達(dá)與直腸癌的發(fā)生、發(fā)展有著十分密切的關(guān)系[5,6]。本研究使用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測了93例直腸癌組織COX-2和VEGF-C的表達(dá)，初步探討其表達(dá)在直腸癌發(fā)生、發(fā)展中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 病理標(biāo)本來自2013年6月至2015年8月我院病理科保存的術(shù)中病理切片診斷明確的直腸癌標(biāo)本93例，另取93例癌旁正常組織標(biāo)本(距離癌組織6 cm以上)?；颊咝g(shù)前均未接受任何化療、放療以及內(nèi)分泌治療。其中男性62例，女性31例；年齡38-79歲，平均年齡(53.6±9.2)歲；低分化53例，中高分化40例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移58例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35例；Duke＇s分期：A期+B期51例，C期+D期42例。

1.2 主要試劑 鼠抗人COX-2即用型單克隆抗體(購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司)，山羊抗人VEGF-C多克隆抗體(稀釋濃度1∶100)、兔超敏二步法免疫組織化學(xué)檢測試劑盒以及DAB顯色試劑盒(均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司)。

1.3 檢測方法 按試劑盒說明書操作。陽性對(duì)照采用已知COX-2、VEGF-C陽性表達(dá)的直腸癌組織切片；陰性空白對(duì)照采用PBS緩沖液代替一抗。

1.4 結(jié)果判斷 對(duì)COX-2、VEGF-C的表達(dá)水平進(jìn)行半定量評(píng)估。顯微鏡下計(jì)算陽性表達(dá)細(xì)胞所占的百分?jǐn)?shù)，對(duì)出現(xiàn)染色的細(xì)胞進(jìn)行染色程度評(píng)判，最后將兩個(gè)得分相加。①陽性細(xì)胞的染色強(qiáng)度：分別按照無著色、淡黃色、棕黃色以及棕褐色程度計(jì)分為0、1、2、3分；②陽性細(xì)胞數(shù)不足5%為0分；陽性細(xì)胞數(shù)在5%-25%之間為1分，陽性細(xì)胞數(shù)在26%-50%之間為2分，陽性細(xì)胞數(shù)在51%-75%之間為3分，陽性細(xì)胞數(shù)超過75%為4分。得分結(jié)果判斷：0分為陰性(-)，1-2分為陽性(+)，3-6分為中度陽性(++)，7分及以上為強(qiáng)陽性(+++)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)資料的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用SPSS17.0軟件系統(tǒng)進(jìn)行，數(shù)值變量類資料使用獨(dú)立樣本資料的t檢驗(yàn)或配對(duì)t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料使用R×C列聯(lián)表的χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)。若P<0.05，則判斷差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組及對(duì)照組陽性率

如表1所示，直腸癌組織標(biāo)本中COX-2、VEGF-C表達(dá)的陽性率均顯著高于癌旁正常組織，差異經(jīng)χ2檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 兩組COX-2、VEGF-C陽性率比較(n，%)

注：與對(duì)照組比較，aP<0.05。

2.2 COX-2、VEGF-C表達(dá)與食管癌臨床病理特征的關(guān)系

如表2所示，COX-2、VEGF-C的表達(dá)與性別、年齡均無關(guān)(P>0.05)；與分化程度、Duke＇s分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。

2.3 直腸癌組織中COX-2、VEGF-C表達(dá)的相關(guān)性

如表3所示，Spearman相關(guān)分析結(jié)果表明，直腸癌組織中COX-2、VEGF-C表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.489，P=0.000)。

表2 COX-2、VEGF-C表達(dá)與直腸癌臨床病理特征的關(guān)系

表3 直腸癌組織中COX-2、VEGF-C表達(dá)的相關(guān)性

3 討論

COX-2是前列腺素合成過程中的一種限速酶，在正常的組織中幾乎不表達(dá)，但是，在細(xì)胞因子、生長因子和癌基因等具有促癌作用的因子作用下，它的表達(dá)出現(xiàn)不同程度的上調(diào)，并參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程[7,8]。

腫瘤新生血管的形成是實(shí)體腫瘤生長、轉(zhuǎn)移必須的條件。近年來的研究發(fā)現(xiàn)[9]，COX-2可以通過促進(jìn)血管生成，從而對(duì)腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移和浸潤造成影響。VEGF-C是一種重要的促淋巴管生成因子，它對(duì)于血管和淋巴管的生成具有至關(guān)重要的作用，可以與血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2)作用從而影響血管的生成過程，與VEGFR-3作用可以影響淋巴管的生成過程[10-11]。實(shí)驗(yàn)表明[12]，VEGF-C是COX-2的下游效應(yīng)基因，COX-2可以使VEGF-C的表達(dá)上調(diào)，其中，COX-2的催化產(chǎn)物PGE2起著十分重要的介導(dǎo)作用。本研究結(jié)果表明，直腸癌組織標(biāo)本中COX-2、VEGF-C表達(dá)的陽性率均顯著高于癌旁正常組織標(biāo)本(P<0.05)；相關(guān)分析結(jié)果表明，直腸癌組織中COX-2、VEGF-C表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05)。

腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是重要的生物學(xué)特征，也是導(dǎo)致直腸癌患者死亡的主要原因之一[13]。惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移是一個(gè)多因子、多基因共同參與的病理過程。在內(nèi)毒素、生長因子、激素以及腫瘤促進(jìn)因子等的作用下，COX-2可以高表達(dá)，從而可以促進(jìn)VEGF-C的表達(dá)。VEGF-C主要在直腸癌細(xì)胞中表達(dá)，在腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞中并沒有明顯的表達(dá)。因此，可以推測VEGF-C主要是通過旁分泌作用來誘導(dǎo)腫瘤血管及淋巴管的形成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長、轉(zhuǎn)移，同時(shí)可能作為一種自分泌生長調(diào)節(jié)因子直接促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長[14，15]。本研究結(jié)果表明，COX-2、VEGF-C的表達(dá)與分化程度、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。提示COX-2、VEGF-C陽性表達(dá)的直腸癌惡性度較高，比較容易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，患者的預(yù)后較差。因此，COX-2、VEGF-C的高表達(dá)與直腸癌淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān)，從而對(duì)患者的生存造成影響。檢測其表達(dá)水平有助于判斷直腸癌淋巴轉(zhuǎn)移以及患者的預(yù)后[16]。

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Expression and clinical significance of cyclooxygenase 2 and Vascular Endothelial Growth Factor C In Colon cancer

ZHOUGuo-jiang,ZHAOZi-long,YANGYong，etal.

(DepartmentofPathology,AnkangCentralHospital,Ankang725000,China)

Objective To study the expression and clinical significance of cyclooxygenase 2 and Vascular Endothelial Growth Factor C In Colon cancer.Methods 93 cases of Colon cancer tissues and adjacent normal tissue specimens sections by immunohistochemical staining.The expression level of COX-2 and VEGF-C in tissue was determined.Studied its relationship with clinicopathological features of colorectal cancer.Results The positive rates of VEGF-C and COX-2 expression in rectal cancer tissues were significantly higher than that in normal adjacent tissues,and the difference was statistically significant (P<0.05).The expression of VEGF-C and P was not related to sex or age (P>0.05).It was related to the degree of differentiation,Duke's stage and lymph node metastasis (P<0.05).Spearman correlation analysis showed that the expression of COX-2 and VEGF-C in rectal cancer was positively correlated(r=0.489,P=0.000).Conclusion The expression of COX-2 and VEGF-C in colon cancer tissue was significantly increased,and it was closely related to the occurrence and development of colon cancer.It can be used as an important auxiliary index to guide clinical diagnosis,treatment and prognosis of colon cancer.

cyclooxygenase 2;Vascular Endothelial Growth Factor C;Colon cancer;expression

1007-4287(2016)10-1649-03

R735.3+7

A

2015-12-28)