王曉峰，王 偉，張?zhí)旆颍?強(qiáng)，袁 琳，劉 聰

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 口腔科,吉林 長(zhǎng)春130033)

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紫景天對(duì)大鼠牙周組織抗氧化作用的影響

王曉峰，王 偉*，張?zhí)旆?，?強(qiáng)，袁 琳，劉 聰

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 口腔科,吉林 長(zhǎng)春130033)

牙周炎(Periodontitis)是牙周較深層組織的慢性破壞性疾病，其特點(diǎn)是牙周支持組織的進(jìn)行性破壞，可造成牙周組織的不可逆性損害[1]。有研究發(fā)現(xiàn)[2],在牙周病的發(fā)生發(fā)展過程中，氧源性自由基在牙周損傷的分子機(jī)制中扮演了重要的角色。本研究通過分析紫景天對(duì)大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量以及谷胱甘肽氧化酶(GSH-Px)活力的影響,以期闡明紫景天在抗氧化作用方面預(yù)防和治療牙周病的作用機(jī)理。

1 材料和方法

1.1 樣品來源及純度 紫景天原位凝膠劑，濃度分別為1.0%、0.5%、0.25%，由吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院制劑室提供，批號(hào)：20120725。陽性對(duì)照藥復(fù)方牙痛酊，貴州同濟(jì)堂制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20120102。

1.2 試劑 南京建成生物工程制品研究所SOD試劑盒，批號(hào)：20120223;MDA試劑盒,批號(hào)：20120213;GSH試劑盒，批號(hào)：20120213。

1.3 儀器 磨牙機(jī),吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院口腔科提供。

1.4 建立大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型[3,4]取Wistar大鼠60只，體重180-280 g,雌雄均等,由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。合格證號(hào): 2003-0001。取10只為正常對(duì)照組，剩余動(dòng)物以3%水合氯醛10 ml/kg腹腔注射麻醉，剝離上頜牙齦，將4號(hào)無菌絲線先加入到0.5個(gè)麥?zhǔn)蠁挝谎例l卟啉單胞菌的菌液中2 h，雙股穿過大鼠第一和第二磨牙間隙，在頰側(cè)打結(jié)3次，再繞過第一磨牙，于腭側(cè)第一磨牙和第二磨牙間結(jié)扎并打結(jié)3次，以持續(xù)刺激牙齦。從第3周開始觀察牙齦紅腫、糜爛、溢膿、探診出血等癥狀，并按國(guó)際通用標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)牙齦指數(shù)及齦溝出血指數(shù)。于給藥后第15天，以3%水合氯醛10 ml/kg腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血，測(cè)量血清中的SOD、GSH-Px、MDA。

1.5 檢測(cè)方法 (1)血清SOD活力測(cè)定:采用亞硝酸鹽法;(2)血清MDA的測(cè)定:采用硫代巴比妥酸法; (3)血清GSH-Px活力測(cè)定:采用硫代二硝基苯甲酸直接法。

2 結(jié)果

由表1結(jié)果可見，模型組血清中SOD、GSH-Px含量比對(duì)照組明顯降低，MDA含量明顯升高，紫景天總黃酮1.0%、0.5%和復(fù)方牙痛酊均可明顯升高大鼠血清中SOD、GSH-Px含量，降低MDA含量。表明紫景天總黃酮及復(fù)方牙痛酊均可明顯減輕對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性牙周炎的損傷程度，對(duì)實(shí)驗(yàn)性牙周炎具有一定的治療作用。

表1 紫景天總黃酮給藥對(duì)實(shí)驗(yàn)性牙周炎大鼠血清中SOD、GSH-Px、MDA的影響

注：與模型對(duì)照組比較*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001。

3 討論

牙周炎的主要病理變化之一是牙槽骨吸收。目前牙周炎的治療手段主要為控制或消除炎癥并促進(jìn)牙周組織再生。臨床上牙周炎的藥物治療主要是針對(duì)菌斑細(xì)菌使用抗生素治療，如甲硝哇、替硝哇等。這類藥物雖然有較好的療效，但長(zhǎng)期應(yīng)用易導(dǎo)致菌群失調(diào)，細(xì)菌耐藥性增加，以及胃腸道刺激性等毒副作用[5]。因此，針對(duì)牙周炎病變過程中牙周組織的破壞和牙槽骨的吸收，阻斷炎癥因子的作用，研究開發(fā)高效低毒的牙周炎治療藥物為臨床治療牙周炎所亟需。中藥具有毒副作用少、價(jià)格便宜、標(biāo)本兼治的優(yōu)勢(shì)，廣受關(guān)注。

我們前期實(shí)驗(yàn)成功建立了實(shí)驗(yàn)性牙周炎動(dòng)物模型，已經(jīng)證明紫景天治療性給藥可明顯減輕“實(shí)驗(yàn)性牙周炎”大鼠牙齦指數(shù)、齦溝出血指數(shù)。體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，紫景天對(duì)牙齦卟啉菌、放線共生放線桿菌、產(chǎn)黑色素?cái)M桿菌均有較好的抑菌作用，即對(duì)牙周炎易感菌有明顯的抑制作用?？梢?，紫景天原位凝膠劑對(duì)牙周炎具有“標(biāo)本兼治”的治療作用，同時(shí)未見明顯的毒副作用。

有研究證明，在牙周病的發(fā)生發(fā)展過程中，正是氧化應(yīng)激反應(yīng)參與了牙周炎的致病機(jī)制[6]。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，紫景天原位凝膠劑可顯著提高SOD、GSH-Px的活性，降低可間接反應(yīng)細(xì)胞損傷程度的脂質(zhì)過氧化物分解產(chǎn)物MDA的含量。證明紫景天黃酮具有清除氧自由基的抗氧化作用，對(duì)牙周組織可以起到保護(hù)作用。

[1]Otom-Corgel J，Pucher JJ，Rethman MP，et al.State of the science: chronic periodontitis and systemic health[J].J Evid Based Dent Pract ，2012，12(3): 20．

[2]Waddington RJ,Moseley R,Embery G.Reactive oxygen species:a potential role in the pathogenesis of periodontal diseases[J].Oral Dis,2000,6(3):138.

[3]車彥海，李桂英,趙令君，等.綜合方法建立牙周炎動(dòng)物模型的效果評(píng)價(jià)[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào)，2006,32(6):1119.

[4]Xie R，Kuijpers -Jagtman AM，Maltha JC.Inflammatory responses in two commonly used rat models for c tooth movement:comparison with ligature-induced petiodontitis[J].Arch Oral Biol，2011,56：159.

[5]Cuesta AI,Jewtuchowicz VM,Brusca MI,et al.Antibiotic susceptibility of Staphylococcus aureus isolates in oral mucosa and pockets of patients with gingivitis-periodontitis[J].Acta Odontol Latinoam,2011,24: 35.

[6]Nibali L,Donos N.Periodontitis and redox status: a review[J].Curr Pharm Des,2013,19(15):2687.

吉林省科技廳專項(xiàng)項(xiàng)目(20160101080JC)；吉林省直衛(wèi)生專項(xiàng)項(xiàng)目(CZZR2014010)

1007-4287(2016)10-1629-02

2015-06-16)

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