于淼琛，朱 鴻，王 鳳

（大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科，遼寧大連116011）

西門子BNⅡ全自動蛋白分析儀性能驗證報告

于淼琛，朱 鴻，王 鳳

（大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科，遼寧大連116011）

目的對西門子BNⅡ全自動蛋白分析儀主要分析性能進行驗證。方法根據(jù)實驗室認可準則和美國CLIA'88性能驗證文件，對西門子BNⅡ全自動蛋白分析儀上開展的8個常規(guī)項目進行精密度、正確度、臨床可報告范圍和生物參考區(qū)間驗證。結(jié)果西門子BNⅡ全自動蛋白分析儀精密度、正確度、線性范圍、臨床可報告范圍和生物參考區(qū)間驗證等均符合要求。結(jié)論西門子BNⅡ全自動蛋白分析儀檢測性能完全滿足預(yù)期的臨床應(yīng)用要求。

CLIA'88；性能驗證；BNⅡ全自動蛋白分析儀

ISO15189 CNAS-CL02：2012《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準則》［1］中對免疫領(lǐng)域的要求中，檢驗方法和程序的分析性能驗證內(nèi)容至少應(yīng)包括正確度、精密度和可報告范圍。根據(jù)認可要求，本實驗對使用的西門子BNⅡ全自動蛋白分析儀進行精密度、正確度、臨床可報告范圍和參考范圍驗證［1，2］。

1 材料與方法

1.1 標本來源標本來源于大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院、門、急診、體檢合格的健康人標本，且無溶血、乳糜。

1.2 儀器與試劑西門子BNⅡ全自動蛋白分析儀（簡稱BNⅡ）及原裝配套試劑、校準品、質(zhì)控品。

1.3 方法

1.3.1 精密度驗證選取二個水平的質(zhì)控血漿，連續(xù)檢測5d，每天測定四次，得到20個數(shù)據(jù)連續(xù)重復(fù)測定20次，計算批內(nèi)精密度，計算批間精密度，批內(nèi)精密度≤1/4允許總誤差（TEa），批間精密度≤1/3允許總誤差（TEa）。

1.3.2 正確度驗證目前常用的正確度驗證方法為統(tǒng)計實驗室參加室間質(zhì)評活動的成績，比較回報靶值和實驗室檢測結(jié)果，計算偏差及偏倚，絕對值后統(tǒng)計平均值，平均偏倚≤1/2允許總誤差（TEa）。

1.3.3 臨床可報告范圍選擇低濃度（L）和高濃度（H）患者標本各1份，濃度覆蓋儀器說明。H和L按等比關(guān)系配制形成系列濃度血清（如：5L，4L+1H，3L+2H，2L+3H，1L+4H，5H）。每個實驗樣品在檢測系統(tǒng)上重復(fù)測定2次，記錄結(jié)果。將實測值與預(yù)期值作比較。樣品應(yīng)含有的待測物的預(yù)期值為（X），所有樣品重復(fù)測定的均值為實測值（Y），將所有結(jié)果點在X-Y坐標圖上，計算回歸方程：Y=aX+b［3］。要求：a值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975或r2≥0.95。

1.3.4 生物參考區(qū)間驗證參考CLSI C28-A2文件，選擇20份體檢合格的健康人標本（男、女各10例），在檢測系統(tǒng)上進行測定，對結(jié)果進行統(tǒng)計并對參考區(qū)間進行驗證，若20份標本的檢測結(jié)果均在使用的參考區(qū)間內(nèi)或僅有1個標本超出，則驗證通過。若又有2個以上觀察值超過驗證參考區(qū)間，應(yīng)重新檢查分析程序，考慮兩個樣本總體生物學(xué)特征上可能存在差異，需要實驗室自行建立參考區(qū)間。

2 結(jié)果

2.1 精密度驗證IgG、IgA、IgM、C3、C4、ASO、RF、CRP的檢測批內(nèi)精密度和批間精密度結(jié)果均合格，見表1。

2.2 正確度驗證本次實驗采用2015年本實驗室參加國家衛(wèi)計委組織的正確度驗證計劃，成績合格，可利用衛(wèi)計委全國室間質(zhì)評的靶值與本科室的實測值進行比較，計算該項目在醫(yī)學(xué)決定水平時與靶值的相對偏倚，以＜1/2EQA對應(yīng)濃度水平允許誤差為評價標準，見表2。

2.3 臨床可報告范圍IgG136.5～4585mg/dl、I-gA27.7～811mg/dl、IgM18.1～652.5mg/dl、C3230～3179.5mg/L、C459.6～1752.5mg/L、ASO51.6～1587.5 IU/ml、RF12.5～645IU/ml、CRP3.4～200.5mg/L。8項回歸方程a值均在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975，見表3。

2.4 生物參考區(qū)間驗證IgG700～1600mg/dl、IgA70～400mg/dl、IgM40～230mg/dl、C900～1800mg/L、C100～400mg/L、ASO＜200IU/ml、RF＜20IU/ml、CRP＜8mg/ L。生物參考區(qū)間驗證均合格，見表4。

3 討論

為確保臨床實驗室檢驗結(jié)果的準確可靠，本文依據(jù)CL1A'88［4］、EP15-A2［5］、EP9-A2［6］、EP6-A2［7］等對BNⅡ全自動蛋白分析儀進行精密度、正確度、可報告范圍、參考區(qū)間進行驗證。ISO15189 CNAS-CL02：2012《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準則》中規(guī)定，對開展某一新的檢測項目，更換檢測系統(tǒng)或儀器或改變檢測試劑盒產(chǎn)商時，實驗室需對其相關(guān)方法學(xué)分析性能予以驗證，對產(chǎn)商提供的評價資料中的主要性能予以確認，每年并定期對儀器進行性能驗證。

表1 精密度驗證結(jié)果

表2 正確度驗證結(jié)果

表3 線性范圍證結(jié)果

表4 生物參考區(qū)間驗證

檢測系統(tǒng)的良好分析性能是保證檢驗結(jié)果準確性的前提，而檢測系統(tǒng)或方法的性能驗證，是評價檢測系統(tǒng)能否用于常規(guī)工作的前提［8，9］。精密度即多次重復(fù)檢測結(jié)果的一致性，包括批內(nèi)和批間精密度［10］。8項免疫指標兩個水平質(zhì)控批內(nèi)精密度＜1/4Tea，批間精密度＜1/3Tea，表明本儀器檢測結(jié)果重復(fù)性良好［11］。正確度驗證偏倚均小于1/ 2Tea，表明該儀器檢測結(jié)果準確。線性范圍是一種能力，在一定測量區(qū)間，可提供測量結(jié)果與樣本中測量物的量值直接成比例，在此范圍內(nèi)，報告結(jié)果顯示標本中確實含有被檢測物的含量線性范圍驗證［12］。8項回歸方程a值均在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975，表明本儀器線性范圍良好［13］。生物參考區(qū)間驗證均合格，廠商或提供參考區(qū)間的實驗室報告的95%參考區(qū)間可以接受，表明可以引用此參考范圍。

本次BNⅡ全自動蛋白分析儀精密度驗證使用了EP15方案，它比EP5精密度方案、EP9A正確度方案相對簡單、易于實驗室操作且能夠滿足統(tǒng)計學(xué)意義［14］。綜上所述，BNⅡ全自動蛋白分析儀是一部具有良好精密度、準確度、可報告范圍寬的檢測系統(tǒng)［15］，每年定期對該體系進行性能驗證，保證檢測結(jié)果可靠、準確。

［1］中國合格評定國家認可委員會.CNAS-C02醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準則.（ISO15189：02）［S］.北京：中國標準出版社，2012.

［2］醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力的專用要求：GB/T 22576 2008［S］.2008.

［3］NCCLS.EP6-P-2002 Evalution of the linearity of quantitative analytical methods［S］.2002.

［4］Federal Register.CL1A'88 Rules and regulation［S］.1992：57-40.

［5］Clinical and Laboratory Standards Institute.EP15-A2.Evaluation of precision performance of quantitative measurement methods［S］. Wayne，PA，USA：CLSI，2000.

［6］National Committee for Clinieal Laboratory Standards.EP9-A2 Method Comparison and BiasEstimation Using patient Samples［S］. Wayne，PA：NCCLS，2002.

［7］Clinical and Laboratory Standards Institute.Evaluation of the lin-earity of quantitative measurement procedures：CLSI EP6-A2［S］. 2003.

［8］吳宗勇，賈德強，李佳，等.自動生化分析儀的能力驗證［J］.臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志，2011，10（7）：524-525.

［9］ISO 15189.醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準則［S］.2007.

［10］徐江霞，龔淑琪，萬振華，等.新型乙肝定量PCR試劑檢測性能驗證［J］.實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2016，34（2）：149-151.

［11］王治國.臨床檢驗質(zhì)量控制技術(shù)［M］.第2版.北京：人民衛(wèi)生出版，2010：41-46.

［12］李婷婷，寧芬，陸雅春，等.日立7600全自動生化分析儀檢測系統(tǒng)性能驗證［J］.安徽醫(yī)學(xué)，2013，34（11）：1679-1682.

［13］壽爽，徐勝，呂潔，等.邁瑞B(yǎng)C-6900全自動血細胞分析儀血液模式的性能驗證和評價［J］.實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2015，33（3）：310-316.

［14］韓靜，胡梅，楊桂花，等.BNⅡ特種蛋白儀測定IgG、IgA和IgM性能評價［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（10）：1292-1294.

［15］陳麗娟，羅俐鶯，魏權(quán)，等.尿液有形成分全自動分析儀（UF-1000i）性能評價［J］.實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2015，33（4）：435-475.

Performance verification of Siemens BNⅡautomatic protein analyzer

YU Miaochen，ZHU Hong，WANG Feng.
Clinical Labo-ratory，the First Affiliated Hospital of Dalian Medical University，Dalian Liaoning 116011，China.

Objective To verify the performance of Siemens BNⅡautomatic protein analyzer.Methods According to laboratory accreditation criteria and performance verification documents of American CLIA'88，the precision，accuracy，clinical reportable range and biological reference interval were verified for the tests of 8 conventional biochemical indicators performed on Siemens BNⅡautomatic protein analyzer.Results The precision，accuracy，liner range，clinical reportable range and biological reference interval were all acceptable.Conclusion Siemens BNⅡautomatic protein analyzer could fully meet the requirements in clinical application.

CLIA'88；performance verification BNⅡautomatic protein analyzer

R446.62

A

1674-1129（2016）05-0595-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2016.05.018

2016-06-02；

2016-08-25）

于淼琛，女，1982年12月出生，學(xué)位碩士，主管技師。主要從事臨床免疫學(xué)檢測的研究。E-mail：ymc7788999@163.com

王鳳，女，1981年9月出生，學(xué)位碩士，主管技師。主要從事臨床血液學(xué)檢測的研究。E-mail：wangfeng5006@163.com