黃金長，王 志，彭海英，戴素娟，張功亮，郭廣秀

（1、贛州市人民醫(yī)院病理科，江西贛州341000；2、贛州市第五人民醫(yī)院病理科，江西贛州341000）

SOX-2在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其意義

黃金長1，王 志1，彭海英2，戴素娟1，張功亮1，郭廣秀1

（1、贛州市人民醫(yī)院病理科，江西贛州341000；2、贛州市第五人民醫(yī)院病理科，江西贛州341000）

目的觀察SOX-2在結(jié)直腸癌中的表達(dá)，探討其在結(jié)直腸癌中表達(dá)的臨床意義。方法收集外科結(jié)直腸癌手術(shù)標(biāo)本100例，應(yīng)用免疫組織化學(xué)的方法檢測SOX-2蛋白在癌組織及癌旁組織的表達(dá)情況。結(jié)果SOX-2在正常腸粘膜中不表達(dá)或低表達(dá)，在結(jié)直腸癌中高表達(dá)，并且SOX-2的表達(dá)水平跟腫瘤的浸潤深度、分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均正相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論SOX-2可作為結(jié)直腸癌的診斷以及判斷其侵襲能力的生物學(xué)指標(biāo)。

結(jié)直腸癌；SOX-2蛋白；診斷

結(jié)直腸癌是常見的惡性腫瘤之一，中國結(jié)直腸癌的發(fā)病率每年以4%的速度遞增，年均增長速度高出世界平均水平近2%［1］。2015年中國衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)資料顯示結(jié)直腸癌的發(fā)病率和死亡率位居第三［2，3］。SOX-2基因是最基本的干細(xì)胞基因之一，其編碼的蛋白SOX-2對于未分化胚胎干細(xì)胞的早期發(fā)育和維持十分關(guān)鍵，在不同的腫瘤中參與多種信號通路調(diào)節(jié)，發(fā)揮不同的作用，因此對于不同腫瘤的生長、增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移的影響各不相同，最終表現(xiàn)為不同的臨床結(jié)局［4］。本研究通過檢測SOX-2在人結(jié)直腸癌及癌旁組織中的表達(dá)情況，探討其在結(jié)直腸癌診斷方面的意義，為指導(dǎo)臨床治療提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料收集贛州市人民醫(yī)院2012年1月-2014年6月期間手術(shù)切除的結(jié)直腸癌組織標(biāo)本100例，同時收集相應(yīng)的癌旁組織，癌旁結(jié)直腸組織均取自距腫瘤原發(fā)病灶2厘米的切除腸管。所有標(biāo)本資料完整，均經(jīng)我院病理組織學(xué)確診。

1.2 試劑與方法免疫組織化學(xué)染色采用Max Vision二步法，SOX-2兔抗人單克隆抗體、即用型Max Vision TM檢測試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，按照免疫組化試劑盒的操作說明進(jìn)行免疫組化染色，用已知SOX-2陽性的組織做為陽性對照。

1.3 結(jié)果判定SOX-2陽性表達(dá)部位為細(xì)胞核，胞質(zhì)和背景不著色。根據(jù)細(xì)胞核的陽性染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞表達(dá)的數(shù)量綜合進(jìn)行評分：⑴依據(jù)細(xì)胞核陽性強(qiáng)度計(jì)分：細(xì)胞核無染色，記0分；細(xì)胞核淺棕色為弱陽性，記1分；細(xì)胞核棕色為陽性，記2分；細(xì)胞核棕褐色為強(qiáng)陽性，記3分。⑵依據(jù)陽性細(xì)胞表達(dá)的數(shù)量計(jì)分：每張切片鏡下隨機(jī)選擇10個高倍視野（×200），以陽性細(xì)胞比例進(jìn)行計(jì)分：無陽性染色，記0分；陽性細(xì)胞數(shù)≤25%，記1分；25%＜陽性細(xì)胞數(shù)＜50%，記2分；陽性細(xì)胞數(shù)≥50%，記3分。⑶將上述兩項(xiàng)評分相加，結(jié)果≤2分定為低表達(dá)，＞3分定為高表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，采用卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有顯著意義。

2 結(jié)果

2.1 SOX-2蛋白在結(jié)直腸癌及其相應(yīng)的癌旁組織中的表達(dá)免疫組化結(jié)果顯示，SOX-2陽性表達(dá)主要位于結(jié)直腸癌腫瘤細(xì)胞以及癌旁黏膜上皮細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)（見圖1）。在本次收集的100例結(jié)直腸癌手術(shù)標(biāo)本及其相應(yīng)的癌旁腸黏膜組織中，有68例結(jié)直腸癌標(biāo)本呈陽性表達(dá)，僅2例癌旁結(jié)直腸粘膜呈SOX-2陽性表達(dá)，癌組織中的陽性表達(dá)率（68%）顯著高于癌旁黏膜組織（2%），具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）見表1。

圖1 SOX-2在結(jié)直腸癌、癌旁腸黏膜組織中的表達(dá)

表1 SOX-2在結(jié)直腸癌、癌旁腸粘膜組織中的表達(dá)情況

2.2 結(jié)直腸癌中SOX-2的表達(dá)情況與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，SOX-2的表達(dá)與結(jié)直腸癌患者的性別、年齡以及腫瘤部位無明顯相關(guān)性（P＞0.05），而與腫瘤的浸潤深度、分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均正相關(guān)（P＜0.05），見表2。

表2 結(jié)直腸癌中SOX-2的表達(dá)情況與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系

3 討論

結(jié)直腸癌是人類常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率也在逐年增高。結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展與環(huán)境、飲食結(jié)構(gòu)、遺傳突變、慢性炎癥以及亞硝胺類致癌物質(zhì)等因素密切相關(guān)，是多種基因協(xié)同相互作用的結(jié)果，包括腺瘤性息肉病基因（APC）、結(jié)直腸癌突變基因（MMC）的突變，錯配修復(fù)基因（MMR）的失活，p53基因的突變與缺失，K-ras基因的改變，以及結(jié)直腸癌缺失基因（DCC）的缺失等［5-8］。因此對結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的研究已經(jīng)越來越受到更多人的關(guān)注，通過對其相關(guān)基因的研究，可以為臨床預(yù)測結(jié)直腸的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后判斷提供一定的指導(dǎo)意義。有研究表明，SOX2在結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展中起了很重要的作用［9，10］。

SOX基因家族參與了調(diào)控早期胚胎發(fā)育、神經(jīng)分化、性別導(dǎo)向、細(xì)胞生長等重要生命事件，目前國際上已發(fā)現(xiàn)并命名了20余個SOX家族成員，其中SOX-2屬于SOX家族B組B1亞組，定位于3q36.3-27，為單外顯子結(jié)構(gòu)，編碼表達(dá)317個氨基酸殘基構(gòu)成的蛋白SOX-2［5，11］。研究表明，SOX-2基因編碼的蛋白是維持胚胎干細(xì)胞及多種組織干細(xì)胞的自我更新能力和增殖能力的重要轉(zhuǎn)錄因子，參與了復(fù)雜的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路網(wǎng)絡(luò)，調(diào)控細(xì)胞的生物學(xué)行為［5，11］；越來越多的研究結(jié)果表明，SOX-2在腫瘤的發(fā)生、生長、增殖及侵襲過程中起了重要作用，在食管癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌、前列腺癌、肺癌、宮頸癌等腫瘤組織均發(fā)現(xiàn)SOX-2呈異常表達(dá)［12-16］。我們的研究結(jié)果顯示，SOX-2在結(jié)直腸癌中的陽性表達(dá)率（68%）顯著高于癌旁粘膜組織（2%），這表明了SOX-2基因的異常高表達(dá)可能在腫瘤的發(fā)生過程中起了癌基因的作用。通過對68例SOX-2呈陽性表達(dá)的病例進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)SOX-2在結(jié)直腸癌患者中的表達(dá)與性別、年齡以及腫瘤部位無明顯相關(guān)性，而與腫瘤的浸潤深度、分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理特征密切相關(guān)。

綜上所述，SOX-2參與了結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移，因此其表達(dá)可作為結(jié)直腸癌診斷與判斷其侵襲能力的一項(xiàng)生物學(xué)指標(biāo)，也為結(jié)直腸癌的生物靶向治療提供新的靶點(diǎn)和思路。然而SOX-2與結(jié)直腸癌的早期診斷和預(yù)后之間的關(guān)系還有待研究，其與腫瘤的發(fā)生機(jī)制及與其它已知的促癌基因、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之間的關(guān)系仍有待于進(jìn)一步研究，以期能更好的指導(dǎo)臨床的預(yù)后與用藥。

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A

1674-1129（2016）05-0564-02

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2016-01-25；

2016-08-19）

贛州市科技局科研項(xiàng)目（20122208）

黃金長，男，1981年11月出生，學(xué)士學(xué)位，主治醫(yī)師，主要研究方向：腫瘤的病理診斷。E-mail：huangjinchang8228@163.com