羅　軼　唐秀玲　黃莉莉　龍慧端　黃卓謙　谷立勍　黃清泉

（廣西食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 南寧 530021）

辛夷鼻炎丸質(zhì)量分析概述

羅軼唐秀玲黃莉莉龍慧端黃卓謙谷立勍黃清泉

（廣西食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 南寧 530021）

目的：通過(guò)對(duì)3家生產(chǎn)企業(yè)52批次辛夷鼻炎丸的抽驗(yàn)，評(píng)價(jià)辛夷鼻炎丸的質(zhì)量狀況和現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的可行性。方法：通過(guò)對(duì)辛夷鼻炎丸的現(xiàn)行法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)和探索性研究檢驗(yàn)綜合評(píng)價(jià)其質(zhì)量狀況。結(jié)果：52批次辛夷鼻炎丸按現(xiàn)行法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，合格率為100%，探索性研究檢驗(yàn)合格率為26.9%。結(jié)論：現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)基本可行，但各生產(chǎn)企業(yè)辛夷鼻炎丸的質(zhì)量參差不齊，一些企業(yè)在原料、輔料及生產(chǎn)工藝方面存在著不同程度的問(wèn)題。探索性研究增加了標(biāo)準(zhǔn)的專(zhuān)屬性、可控性及安全性，為進(jìn)一步修訂藥品標(biāo)準(zhǔn)、控制藥品質(zhì)量提供參考。

辛夷鼻炎丸；國(guó)家評(píng)價(jià)抽驗(yàn)；質(zhì)量分析

辛夷鼻炎丸由蒼耳子、山白芷、菊花、三叉苦、薄荷、板藍(lán)根、廣藿香、鵝不食草、防風(fēng)、魚(yú)腥草、辛夷、甘草、紫蘇葉等十三味中藥組成，具有祛風(fēng)宣竅，清熱解毒的功效。主要用于風(fēng)熱上攻、熱毒蘊(yùn)肺所致的鼻塞、鼻流清涕或濁涕、發(fā)熱、頭痛；慢性鼻炎、過(guò)敏性鼻炎、神經(jīng)性頭痛見(jiàn)上述證候者。其方劑是在研究民間驗(yàn)方的基礎(chǔ)上，由廣州白云山中一藥業(yè)有限公司自主研制開(kāi)發(fā)而成，目前我國(guó)共有辛夷鼻炎丸生產(chǎn)企業(yè)5家，涉及5個(gè)批準(zhǔn)文號(hào)。

2015年全國(guó)抽取52批次樣品，3家正在生產(chǎn)的企業(yè)均涉及，執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)共3個(gè)，分別為中國(guó)藥典2010年版一部第一、第二、第三增補(bǔ)本［1-3］。為深入評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量，在對(duì)全部樣品按法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)的基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)圍繞藥品的真實(shí)性、安全性及有效性進(jìn)行了多項(xiàng)探索性研究，結(jié)果表明，辛夷鼻炎丸質(zhì)量狀況一般。

1　法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)情況分析

全部52批次樣品按法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，合格率為100%。直觀分析顯示各企業(yè)間樣品在性狀、薄層鑒別色譜斑點(diǎn)大小和顏色深淺等方面存在差異。經(jīng)采用SPSS軟件對(duì)水分、溶散時(shí)限、含量等數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，表明不同企業(yè)間、同一企業(yè)批間數(shù)據(jù)均存在一定差異，提示企業(yè)內(nèi)、企業(yè)間在生產(chǎn)原輔料、工藝參數(shù)等質(zhì)量控制方面存在差異。

2　探索性研究方法與結(jié)果分析

2.1有效性研究

2.1.1薄層色譜鑒別

（1）辛夷的薄層色譜鑒別。經(jīng)研究建立了本品君藥辛夷的薄層色譜鑒別方法。供試品溶液的制備：同現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)甘草薄層鑒別項(xiàng)下。對(duì)照品溶液的制備：取木蘭脂素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液。對(duì)照藥材溶液的制備：取辛夷對(duì)照藥材0.1g，加甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解即得。陰性對(duì)照溶液的制備：取藥材，按處方制得缺辛夷的陰性樣品，照供試品制備方法制得陰性對(duì)照溶液。測(cè)定法：照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B）實(shí)驗(yàn)，吸取上述四種溶液各10～15μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙醚（5:1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以2%香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視，鑒別辛夷。方法靈敏度高，專(zhuān)屬性強(qiáng)，陰性樣品無(wú)干擾（圖1），填補(bǔ)了辛夷鼻炎丸質(zhì)控項(xiàng)目的缺失。結(jié)果52批樣品均檢出辛夷。

圖1　辛夷鼻炎丸中辛夷的鑒別

（2）廣藿香的薄層色譜鑒別

經(jīng)研究建立了廣藿香的薄層色譜鑒別方法。供試品溶液的制備：取本品3g，加石油醚（60～90℃）30ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。對(duì)照品溶液的制備：取百秋李醇對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液。陰性對(duì)照溶液的制備：取藥材，按處方制得缺廣藿香的陰性樣品，照供試品制備方法制得陰性對(duì)照溶液。測(cè)定法：照薄層色譜法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄Ⅵ B）實(shí)驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5～10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯-環(huán)己烷-甲酸（10:1:1:0.05）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以2%香草醛硫酸溶液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光下檢視，鑒別廣藿香。方法簡(jiǎn)便、靈敏度高，專(zhuān)屬性強(qiáng)，陰性樣品無(wú)干擾（圖2），填補(bǔ)了辛夷鼻炎丸質(zhì)控項(xiàng)目的缺失。結(jié)果40批樣品檢出廣藿香，有12批未檢出。

圖2　辛夷鼻炎丸中廣藿香的鑒別

（3）甘草和防風(fēng)的薄層鑒別。針對(duì)辛夷鼻炎丸標(biāo)準(zhǔn)防風(fēng)鑒別項(xiàng)下供試品薄層色譜斑點(diǎn)弱，為提高檢測(cè)靈敏度、同時(shí)避免檢驗(yàn)方法重復(fù)操作的現(xiàn)狀，以現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中甘草薄層鑒別項(xiàng)的供試液點(diǎn)樣，能得到清晰明顯的斑點(diǎn)，達(dá)到同時(shí)鑒別甘草和防風(fēng)的目的。該方法一測(cè)多評(píng)，簡(jiǎn)便、靈敏，專(zhuān)屬性強(qiáng)，陰性樣品無(wú)干擾（圖3），提高了檢驗(yàn)效率。結(jié)果52批樣品均檢出甘草和防風(fēng)。

圖3　辛夷鼻炎丸中甘草和防風(fēng)的鑒別

2.1.2氣相特征圖譜檢查

本制劑中辛夷、廣藿香、紫蘇葉和薄荷含有揮發(fā)性成分，為保證藥效，制法規(guī)定以上四味藥材先提取揮發(fā)性成分后殘?jiān)偌铀逯螅虼搜芯恐羞\(yùn)用GC技術(shù)建立了以上四味藥材的特征圖譜，以同時(shí)控制辛夷、廣藿香、紫蘇葉和薄荷的質(zhì)量，達(dá)到“一測(cè)多評(píng)”的目的。

色譜條件 DB-5毛細(xì)管柱（柱長(zhǎng)60m，內(nèi)徑0.25mm，膜厚度0.25μm）；柱溫為程序升溫，初始溫度50℃，以1.5℃/min的速率升至130℃，保持5min，再以1.5℃/min的速率升至150℃，保持5min，再以1.5℃/min的速率升至240℃，保持5min。進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度280℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。載氣：氦氣；流速：1.2mL·min-1。

分別取薄荷腦、薄荷酮、廣藿香酮、百秋李醇對(duì)照品，精密稱(chēng)定，分別加甲醇制成1mg·ml-1的參照物溶液。另分別按處方折算、取薄荷、辛夷、廣藿香和紫蘇葉對(duì)照藥材適量，置揮發(fā)油提取器中，加乙酸乙酯2ml，照揮發(fā)油測(cè)定法提取3小時(shí)，分取乙酸乙酯層，作為對(duì)照藥材溶液。取本品適量，研細(xì)，取約10g，精密稱(chēng)定，置揮發(fā)油提取器中，加乙酸乙酯2ml，照揮發(fā)油測(cè)定法提取3小時(shí)，分取乙酸乙酯層，作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液、對(duì)照藥材溶液、與供試品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。供試品特征圖譜中應(yīng)呈現(xiàn)19個(gè)與對(duì)照特征圖譜相對(duì)應(yīng)的色譜峰，其中4個(gè)峰應(yīng)分別與相應(yīng)的參照物峰保留時(shí)間相同，見(jiàn)圖4。

圖4　氣相對(duì)照特征圖譜

對(duì)52批辛夷鼻炎丸樣品進(jìn)行氣相特征圖譜檢查，其中B企業(yè)和C企業(yè)14批樣品不符合規(guī)定，占26.9%，薄荷、辛夷、紫蘇葉和廣藿香的特征峰缺失嚴(yán)重，提示以上四味藥材存在少投料、偷工減料或者生產(chǎn)工藝失控的嚴(yán)重現(xiàn)象。

2.1.3高效液相特征圖譜檢查

為對(duì)辛夷鼻炎丸質(zhì)量進(jìn)行整體、綜合性控制，根據(jù)研究情況建立了蒼耳子、鵝不食草、防風(fēng)、魚(yú)腥草、甘草、板藍(lán)根等7味藥材的特征圖譜檢查。

色譜條件 色譜柱：Kromasil 5-C100（250*4.6mm，5μm）；以乙腈為流動(dòng)相A、0.1%磷酸為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫；升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、甘草苷檢測(cè)波長(zhǎng)為220nm；甘草酸檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。

取升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、甘草苷、甘草酸銨、綠原酸、木犀草苷適量，分別加50%甲醇配制成50μg·ml-1的參照物溶液。另分別按處方折算、取甘草、蒼耳子、菊花、板藍(lán)根對(duì)照藥材適量，加水150ml，煎煮約3小時(shí)（菊花煎煮1.5小時(shí)），濾過(guò)，濾液蒸干，精密加50%甲醇20ml使殘?jiān)芙獠⑥D(zhuǎn)移至三角瓶中，超聲處理（功率320W，頻率40kHz）30分鐘，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為對(duì)照藥材溶液；再取鵝不食草、魚(yú)腥草、防風(fēng)對(duì)照藥材適量，分別精密加入50%甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，作為對(duì)照藥材溶液。取本品適量，研細(xì)，取約1g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇20ml，稱(chēng)定重量，超聲處理30分鐘（功率320W，頻率40kHz），放冷，再稱(chēng)定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液、對(duì)照藥材溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品特征圖譜中應(yīng)呈現(xiàn)19個(gè)與對(duì)照特征圖譜相對(duì)應(yīng)的色譜峰，其中6個(gè)峰應(yīng)分別與相應(yīng)的參照物峰保留時(shí)間相同，見(jiàn)圖5。

圖5　高效液相對(duì)照特征圖譜

對(duì)52批辛夷鼻炎丸樣品進(jìn)行氣相特征圖譜檢查，其中B企業(yè)和C企業(yè)14批樣品不符合規(guī)定，占26.9%，不合格項(xiàng)目為未檢出木犀草苷且其他藥味特征峰較小，表明以上2家生產(chǎn)企業(yè)未按處方規(guī)定投入菊花藥材，反映投料藥材的質(zhì)量差。

2.1.4HPLC測(cè)定甘草和防風(fēng)含量

在進(jìn)行高效液相特征圖譜檢查的同時(shí)，以升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、甘草苷、甘草酸為指標(biāo)，采用波長(zhǎng)切換方式，建立了制劑中防風(fēng)和甘草的含量測(cè)定方法。測(cè)定了52批樣品，結(jié)果現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)置的含量指標(biāo)升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷的總量均符合規(guī)定，而新增的甘草苷含量范圍為0.04～0.45mg·g、甘草酸含量范圍為0.48～1.28mg·g，以本品原研單位A企業(yè)的38批次樣品平均值的80%為限度，合格率僅為59.6%，B企業(yè)的12批次甘草苷含量均不合格，表明不同企業(yè)所用甘草藥材差異較大，同時(shí)不排除部分企業(yè)存在劣質(zhì)藥材投料或少投料行為。

2.2安全性研究

2.2.1留蘭香的檢查

本品處方中含有薄荷，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道［4］，薄荷有留蘭香代用或混用的問(wèn)題，兩者雖為同科同屬植物，但其主要成分、功能主治等存在差異。而薄荷、留蘭香的性狀、顯微相近，易發(fā)生摻偽、摻雜問(wèn)題，為控制本品中薄荷的投料質(zhì)量，結(jié)合氣相特征圖譜檢查方法，根據(jù)留蘭香含香芹酮、薄荷含薄荷腦不含香芹酮的特性，對(duì)本品是否使用摻偽薄荷進(jìn)行了考察。結(jié)果C企業(yè)的2批樣品在檢出薄荷腦的同時(shí)，還檢出香芹酮，表明該企業(yè)薄荷藥材摻有偽品留蘭香投料。

圖6　留蘭香的檢查GC圖

2.2.2蒼耳子毒性成分的檢查

蒼術(shù)苷和羧基蒼術(shù)苷是蒼耳子的主要毒性成分［5］，為考察這2種成分是否會(huì)帶入制劑，帶來(lái)安全隱患，采用高效液相色譜法對(duì)蒼術(shù)苷和羧基蒼術(shù)苷進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果52批樣品均未檢出。

2.2.3重金屬及有害元素檢查

中藥中重金屬及有害元素的殘留不容忽視，本品為鼻炎患者的常用藥，故對(duì)其的控制顯得尤為重要。研究中采用高靈敏度的ICP-MS法測(cè)定樣品鉛、鎘、砷、汞、銅的含量，并根據(jù)《中國(guó)藥典》2010年版一部部分藥材品種項(xiàng)下限度進(jìn)行評(píng)價(jià)，結(jié)果鎘、鉛、砷等三種元素超標(biāo)，超標(biāo)率為57.7%，A、B、C三家生產(chǎn)企業(yè)均存在重金屬超標(biāo)現(xiàn)象，提示生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)密切關(guān)注包衣輔料-黑氧化鐵和滑石粉的質(zhì)量。

2.2.4功能性化學(xué)藥品的非法添加

針對(duì)本品祛風(fēng)宣竅，清熱解毒的功效并結(jié)合適應(yīng)癥，對(duì)可能添加的抗組胺、抗炎、抗鼻塞、抗生素、抗病毒、糖皮質(zhì)激素類(lèi)等84種藥物，經(jīng)過(guò)充分研究及驗(yàn)證，建立了高通量、高靈敏性的篩查檢驗(yàn)平臺(tái)，對(duì)全部52批樣品進(jìn)行檢測(cè)，研究結(jié)果表明企業(yè)在生產(chǎn)時(shí)未非法加入上述功能性化學(xué)藥品。

3　討論

3.1對(duì)該品種現(xiàn)行檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的評(píng)價(jià)

現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)包括了防風(fēng)、鵝不食草的顯微鑒別項(xiàng)，甘草、防風(fēng)、蒼耳子、魚(yú)腥草、鵝不食草和菊花的薄層鑒別項(xiàng)，防風(fēng)的含量測(cè)定項(xiàng)。從標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)結(jié)果分析，該標(biāo)準(zhǔn)雖然對(duì)本品起到一定的質(zhì)量控制作用，但項(xiàng)目設(shè)置不夠完善，如未對(duì)提取揮發(fā)油的辛夷、廣藿香、紫蘇葉和薄荷等四味藥材予以控制，難以發(fā)現(xiàn)以次充好、偷工減料等問(wèn)題；部分藥味檢測(cè)方法不合理，如魚(yú)腥草薄層鑒別的重現(xiàn)性較差，菊花的薄層鑒別陰性有干擾、專(zhuān)屬性差；防風(fēng)含量測(cè)定的限度偏低，不能控制產(chǎn)品的質(zhì)量。故現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)還有待于進(jìn)一步完善和提高，因此，總體評(píng)價(jià)為“基本可行”。

3.2該品種的質(zhì)量評(píng)價(jià)

本次辛夷鼻炎丸評(píng)價(jià)抽驗(yàn)共收到全國(guó)23個(gè)?。▍^(qū)）、市抽取的52批樣品，涵蓋了本品在生產(chǎn)的全部3家企業(yè)，在生產(chǎn)企業(yè)、經(jīng)營(yíng)企業(yè)、使用單位抽樣比例為3:43:6，抽樣覆蓋面較廣，代表性較強(qiáng)，樣品情況基本反映了辛夷鼻炎丸的總體水平。樣品法定標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)合格率為100%，依探索性研究試驗(yàn)方法檢驗(yàn)合格率為26.9%，表明現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)在安全性和有效性方面尚存在檢驗(yàn)項(xiàng)目的缺失，難以全面控制藥品的質(zhì)量。

4　建議

針對(duì)辛夷鼻炎丸在探索性研究中發(fā)現(xiàn)部分生產(chǎn)企業(yè)存在偷工減料、不投或少投料和藥材摻偽投料，重金屬殘留量較高等方面的問(wèn)題，筆者提出以下建議：

4.1加強(qiáng)生產(chǎn)監(jiān)管

建議生產(chǎn)企業(yè)嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)原藥材及輔料，控制原輔料的質(zhì)量，關(guān)注重金屬殘留，采取措施保證揮發(fā)性成分的有效提取，從源頭上保證藥品質(zhì)量和降低安全風(fēng)險(xiǎn)。

4.2加強(qiáng)質(zhì)量監(jiān)督

建議盡快完善辛夷鼻炎丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)針對(duì)本品重金屬超標(biāo)較嚴(yán)重的問(wèn)題，建議對(duì)包衣輔料——黑氧化鐵和滑石粉開(kāi)展研究，以確認(rèn)是否為輔料帶入及為進(jìn)一步制定限度提供合理的依據(jù)。

［1］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:2010年版［M］.第一增補(bǔ)本.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2012:29-30.

［2］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:2010年版［M］.第二增補(bǔ)本.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2013:128-129.

［3］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:2010年版［M］.第三增補(bǔ)本.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2014:79-80.

［4］ 崔宇宏，高天愛(ài)，安志強(qiáng).薄荷及其偽品留蘭香的鑒別［J］.光明醫(yī)藥，2011，26（8）:1712.

［5］ 汪洋.中藥蒼耳子的毒性物質(zhì)基礎(chǔ)及中毒機(jī)制研究［D］.上海:第二軍醫(yī)大學(xué)，2010.

Quality analysis for the Xinyibiyan Wan

Objective: To evaluate the quality of Xinyibiyan Wan and the feasibility of the current legal quality standards through 52 batches of samples from three factories.Method: Through the test with current standards and the exploratory research to evaluate its quality. Results: The qualified rate of the 52 batches of samples of Xinyibiyan Wan was 100% according to the current legal quality standards； The qualified rate by exploratory examination was 26.9%. Conclusion: The current standards of Xinyibiyan Wan are feasible，but Experimental results show that the quality of this drug in each enterprise is uneven. For some enterprises， there have been different problems in raw materials， auxiliary materials and production process. The results of the test indicate that exploratory research could increase the specificity， controllability， and safety of the standard. It would provide the reference for further revising the drug standard and monitoring the drug quality.

Xinyibiyan Wan； national assessment program； quality analysis

R285

A

1008-1151（2016）04-0081-04

2016-03-12

羅軼（1972－），女，廣西食品藥品檢驗(yàn)所副主任藥師，從事中藥質(zhì)量控制及安全性研究。