◎吳平平
(通標標準技術服務有限公司武漢分公司,湖北 武漢 430064)
PCR技術在國內(nèi)農(nóng)產(chǎn)品及食品檢測標準中的應用
◎吳平平
(通標標準技術服務有限公司武漢分公司,湖北 武漢 430064)
隨著PCR技術在農(nóng)產(chǎn)品及食品檢測方面的應用越來越廣泛,其標準化程度也日益增加。本文綜述了PCR技術在農(nóng)產(chǎn)品食品致病菌檢測、轉基因成分檢測、過敏源成分檢測、病毒毒素檢測等方面的貢獻,旨在為PCR技術在多領域的發(fā)展提供新的思路。
PCR技術;農(nóng)產(chǎn)品;食品
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一種利用實驗設備模擬細胞內(nèi)DNA復制的條件,實現(xiàn)目標DNA大量復制的擴增技術。Real-Time PCR技術即實時熒光定量PCR,它的不同之處在于在反應體系里加入熒光染料(如Sybr green等)或熒光探針(如Taqman probe等)等熒光信號以監(jiān)測整個PCR反應產(chǎn)物的量,可進行定量分析。RT-PCR即逆轉錄PCR,整個反應首先需在反轉錄酶的作用下將目的RNA合成cDNA,再以cDNA為模板,通過聚合酶鏈式擴增反應擴增合成目的片段的技術。實時熒光RTPCR則是將mRNA逆轉錄為cDNA后作為模板,再通過實時熒光PCR進行定量分析。
2.1 致病微生物檢測[1]
1992年PCR技術開始應用于農(nóng)產(chǎn)品食品中的有害微生物檢測,2007年我國發(fā)行了第一部基于PCR技術的致病菌檢測標準,可實現(xiàn)對金黃色葡萄球菌、沙門菌、霍亂弧菌、大腸埃希菌O157:H7、志賀菌、副溶血性弧菌和單核細胞李斯特菌等致病菌進行快速檢測[2]。
2.2 轉基因成分檢測
PCR技術在農(nóng)產(chǎn)品食品轉基因成分檢測中起著無可替代的作用。截至2016年,我國已發(fā)行多部針對轉基因農(nóng)產(chǎn)品和食品檢測的標準,PCR技術成為農(nóng)產(chǎn)品食品轉基因成分檢測的主要手段,涵蓋大豆、油菜、水稻、玉米和小麥等多種農(nóng)產(chǎn)品食品生產(chǎn)原料的多個轉基因測試位點,見表1[3]。
表1 轉基因作物的PCR測試基因位點表
2.3 過敏源檢測[4]
農(nóng)產(chǎn)品食品中的過敏源成分(如花生、大豆、芝麻、腰果、雞蛋、杏仁和胡桃等)的有無也可以通過PCR技術來檢測。無論是植物過敏源成分還是動物過敏源成分都可以通過PCR技術進行快速分析,見表2。
表2 PCR檢測過敏源成分表
2.4 病毒及毒素檢測
RT-PCR、實時熒光RT-PCR技術還可用于農(nóng)產(chǎn)品食品中病毒的檢測。目前國內(nèi)發(fā)行的檢測標準主要是針對海鮮類產(chǎn)品中病毒的檢測,如貝類中的諾如(諾沃克)病毒[5]和甲肝病毒[6]等檢測。
PCR檢測技術因其高靈敏度、高通量、自動化程度高、低能耗等優(yōu)點廣泛地應用于生物、醫(yī)藥、食品、農(nóng)業(yè)等多個領域,為各行各業(yè)帶來了新的研究方法和發(fā)展方向。
[1]遇曉杰,薛成玉,呂 琦,等.食品中5種致病菌多重PCR快速檢測技術的建立與應用[J].中國食品衛(wèi)生雜志, 2009,21(5):398-402.
[2]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局.SN/T 1869-2007 食品中多種致病菌快速檢測方法 PCR法[S].北京:中國標準出版社,2007.
[3]李 娜,周艷明,李彩衛(wèi),等.PCR技術在轉基因農(nóng)產(chǎn)品檢測中的應用[J].糧油加工,2006(10):81-83.
[4]曹際娟,趙彤彤,劉 冉,等.PCR檢測食品中致敏原蝦源性成分[J].食品安全質(zhì)量檢測學報,2012,3 (2):274-278.
[5]張 穎,吳風亮.RT-PCR方法檢測貝類中諾沃克樣病毒的研究[J].食品科學,2008,29(5):347-351.
[6]國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局.GB/T 22287-2008 貝類中甲型肝炎病毒檢測方法普通 RT-PCR方法和實時熒光 RT-PCR方法[S].北京:中國標準出版社,2008.
The Application of PCR Technology in the Domestic Agricultural Products and Food Testing Standards
Wu Pingping
(Standard Technology Service Co. Ltd. Wuhan Branch, Wuhan 430064, China)
With the widely application of PCR technology in the field of agricultural products and food testing, it's degree of standardization is also increasing. This paper summarizes the application of PCR technology in the detection of agricultural products. For example, the contribution of pathogenic bacteria detection, genetically modified components detection, allergen detection, virus detection, etc. It aims to provide new ideas for the development of polymerase chain reaction (PCR) technique in many fields.
PCR technology; Agricultural products; Food
TS207
10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.14.023