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        多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合前列腺特異性抗原檢測在前列腺癌診斷中的價值

        2016-11-09 06:25:38翟玉普閆成全
        中國性科學(xué) 2016年8期
        關(guān)鍵詞:腫瘤標(biāo)志物前列腺癌

        翟玉普 閆成全

        【摘要】目的:探討多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合前列腺特異性抗原檢測在前列腺癌診斷中的臨床價值。方法:選取我院2013年4月到2014年9月的400例血清標(biāo)本。采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測所有患者的血清前列腺特異性抗原水平,檢測抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因2的水平。對各個腫瘤標(biāo)志物在前列腺癌患者的血清特異性、敏感性、陽性表達(dá)率進(jìn)行計算。隨機(jī)選取抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因的陽性表達(dá)血清,采用蛋白質(zhì)印跡方法驗證。采用Luminex液相芯片法聯(lián)合前列腺特異性抗原檢測和抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因進(jìn)行檢測所有的血清標(biāo)本。結(jié)果:400例測試者的血清前列腺特異性抗原檢測水平:256例<4μg/L,91例4~10μg/L,53例>10μg/L。4種腫瘤標(biāo)志物在150例前列腺癌患者血清中表達(dá)陽性,抗原家族成員1b為69例(46.0%)、滑膜肉瘤x斷裂點基因2 52例(34.7%)、α甲基?;o酶A消旋酶41例(27.3%)、蛋白激酶A錨定蛋白4 65例(43.3%)。4種標(biāo)志物聯(lián)合前列腺特異性抗原檢測的曲線下面積為0.878;單一前列腺特異性抗原檢測的敏感性為61.0%、特異性分別為45.1%,聯(lián)合檢測的敏感性為81.0%、特異性分別為83.1%。結(jié)論:相對于較為單一的前列腺特異性抗原檢測,抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因2聯(lián)合前列腺特異性抗原檢測,可以顯著增強(qiáng)前列腺癌診斷的特異性和敏感性,聯(lián)合檢測的診斷價值非常高,具有臨床價值意義,可以大力推廣。

        【關(guān)鍵詞】腫瘤標(biāo)志物;前列腺特異性抗原;前列腺癌

        Multiple tumor markers and prostate specific antigen detection in the diagnosis of prostate cancerZHAI Yupu1, YAN Chengquan2△. 1. Surgery Department, Fengnan District Traditional Chinese Medicine Hospital, Tangshan 063000, Hebei, China; 2. Urology Department, Tangshan Gongren Hospital, Tangshan 063000, Hebei, China

        【Abstract】Objectives: To discuss the clinical value of joint prostate specific antigen detection and multiple tumor markers in the diagnosis of prostate cancer. Methods:400 cases of serum specimens in our hospital from April 2013 to September 2014 were chosen, and enzyme-linked immunosorbent assay was used to detect the serum prostate specific antigen levels, levels of four kinds of tumor markers i.e. antigen 1b, protein kinase A anchor protein 4, alpha methyl acyl coenzyme A racemase and synovial sarcoma breaking point x gene level 2. The specificity, sensitivity and positive expression rate of each tumor marker in the serum of patients with prostate cancer was calculated and the positive expressed serum was randomly chosen to validate through protein imprinting method. Luminex liquid chip method combined column gland specific antigen detection and members of the family of antigen 1 b, protein kinase A anchor protein 4, alpha methyl acyl coenzyme A racemase, synovial sarcoma breaking point x gene testing was adopted to test all serum samples. Results:In terms of serum prostate specific antigen levels: 256 cases < 4 mug/L, 91 cases between 4-10 mu g/L and 53 cases > 10 mu g/L. Four kinds of tumor markers had positively expression in serum of 150 patients, members of the family of antigen 1 b in 69 cases (46.0%), synovial sarcoma breaking point x gene 2 in 52 cases (34.7%), alpha methyl acyl coenzyme A racemase in 41 cases (27.3%) and protein kinase A anchor protein 4 in 65 cases (43.3%). Area under the curve of four markers joint prostate specific antigen detection was 0.878. The sensitivity and specificity of single prostate specific antigen detection was 61.0% and 45.1%, while that of joint detection was 81.0% and 83.1% respectively. Conclusions: Relative to the prostate specific antigen detection, joint detection can significantly enhance the specificity and sensitivity of the diagnosis of prostate cancer, which should be promoted.

        【Key words】Multiple tumor markers; Prostate specific antigen; Prostate cancer

        【中圖分類號】R737.25【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

        在現(xiàn)代臨床研究治療中,只是在前列腺癌患者血清中表達(dá)的腫瘤相關(guān)抗原就是前列腺癌相關(guān)抗原,前列腺癌相關(guān)抗原一般不在健康人群或者是良性前列腺疾病患者的血清中進(jìn)行表達(dá)[1]。權(quán)威資料顯示,美國學(xué)者采用美國人群血清得以篩選出食管鱗狀細(xì)胞癌抗原、X抗原家族成員1b、晶狀體上皮源性生長因子、α甲基?;o酶A消旋酶、蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子、滑膜肉瘤x斷裂點基因2等前列腺癌相關(guān)抗原在前列腺癌患者的血清中具有高表達(dá),采用實驗證明和單一的前列腺特異性抗原檢測相比較,前列腺特異性抗原檢測聯(lián)合以上食管鱗狀細(xì)胞癌抗原、X抗原家族成員1b、晶狀體上皮源性生長因子、α甲基?;o酶A消旋酶、蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子、滑膜肉瘤x斷裂點基因2等等前列腺癌相關(guān)抗原可以顯著增強(qiáng)美國人群前列腺癌檢測的特異性和敏感性[2-4]。我院依據(jù)國外的研究資料[5]結(jié)合前期的研究,在上述的6種前列腺癌相關(guān)抗原以及蛋白激酶A錨定蛋白4、高遷移率族蛋白B1、癌胚抗原等人群的血清表達(dá)的基礎(chǔ)之上,更加一步的篩選出抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因2等4種腫瘤標(biāo)志物來作為前列腺癌相關(guān)抗原的新組合,探討抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因2和前列腺特異性抗原檢測前列腺癌診斷特異性和敏感性等方面的臨床價值。

        1對象和方法

        1.1研究對象

        選取我院2013年4月到2014年9月的400例血清標(biāo)本。本次實驗研究已經(jīng)經(jīng)過我院倫理委員會批準(zhǔn),所有人都已經(jīng)簽署知情同意書,通過肛門指診、影像學(xué)檢查(經(jīng)直腸超聲、CT、MRI)、血清學(xué)檢查(前列腺特異性抗原,PSA)和組織病理學(xué)檢查等方法,對400例血清標(biāo)本進(jìn)行診斷,根據(jù)分為三組,即前列腺癌組、前列腺增生組、健康組。其中,在我院接受治療的150例前列腺癌患者,年齡為45~83歲,平均年齡為(69±2.3)歲,本組患者都經(jīng)過前列腺穿刺活檢得以確診,并且沒有進(jìn)行手術(shù)治療。前列腺增生患者108例,年齡為55~87歲,平均年齡為(70±2.4)歲,本組患者都經(jīng)過臨床診斷得以確診,并且沒有進(jìn)行手術(shù)治療。健康男性患者142例,年齡為24~51歲,平均年齡為(39±1.6)歲,本組患者都經(jīng)過臨床診斷,沒有前列腺相關(guān)疾病且都沒有腫瘤。所有患者年齡和病程以及病理無明顯差異,不具備統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),因此具有可比性。

        1.2檢測儀器和試劑

        抗原家族成員1b(FS-Kb-0312)、蛋白激酶A錨定蛋白4(Anti-AKAP6)、α甲基?;o酶A消旋酶(Ab-00754)、滑膜肉瘤x斷裂點基因2的試劑都購買自美國三塔古馳公司,前列腺特異性抗原檢測試劑盒(美國Anogen公司,Human prostate specific antigen, PSA ELISA Kit,96T/48T),少部分的Luminex液相芯片微球(中國無錫伊琳生物技術(shù)公司,Luminex 200),還有一部分的Luminex液相芯片微球以及Luminex液相芯片試劑盒(美國三塔古馳公司,Luminex 100)[6,7]。

        酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因2和前列腺特異性抗原檢測400例血清標(biāo)本中的表達(dá)水平。以96孔板采用1:1000濃度包被抗體。進(jìn)行洗版后加入酶標(biāo)板穩(wěn)定液200μg,放置37℃溫度下60min。將孔內(nèi)的液體丟棄,每個孔內(nèi)注入1:5稀釋的血清樣本,放置37℃溫度下90min。洗板后加入羊抗兔lgG抗體,放置37℃溫度下60min。洗板后加入終止液和顯色液,最后于酶標(biāo)儀器上進(jìn)行讀數(shù),以健康人群95%的數(shù)據(jù)來確定抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因2的正常值的范圍,血清特異性、敏感性、陽性表達(dá)率進(jìn)行計算[8]。

        隨機(jī)選取抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因的陽性表達(dá)血清,采用蛋白質(zhì)印跡方法驗證[9]。對陽性血清標(biāo)本采用1:5的濃度進(jìn)行稀釋,采用電泳進(jìn)行分離和轉(zhuǎn)膜,羊抗兔lgG抗體進(jìn)行單克隆抗體孵育,對帶辣根的過氧化物酶的羊抗兔lgG抗體進(jìn)行再次孵育,采用陰性表達(dá)血清來作為參照[10,11]。采用Luminex液相芯片法聯(lián)合列腺特異性抗原檢測和抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因2進(jìn)行檢測所有的血清標(biāo)本[11]。并對三組癌胚抗原(CEA)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、細(xì)胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)水平進(jìn)行檢測和比較。

        1.3統(tǒng)計學(xué)分析

        本次研究的400例血清標(biāo)本的所有數(shù)據(jù)以及研究所得資料均采用SPSS18.0數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行處理分析,其中計量數(shù)據(jù)資料采用t進(jìn)行檢驗,記錄方式為(±s),計數(shù)數(shù)據(jù)資料采用卡方進(jìn)行檢驗,若P<0.05,數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2結(jié)果

        2.1400例測試者的血清前列腺特異性抗原檢測水平分析

        經(jīng)過檢測,256例<4μg/L,91例處于4~10μg/L,53例>10μg/L。4種腫瘤標(biāo)志物在150例前列腺癌患者血清中表達(dá)陽性,抗原家族成員1b為69例(46.0%)、滑膜肉瘤x斷裂點基因2 52例(34.7%)、α甲基?;o酶A消旋酶41例(27.3%)、蛋白激酶A錨定蛋白4 65例(43.3%)。4種標(biāo)志物聯(lián)合前列腺特異性抗原檢測的曲線下面積為0.878;單一前列腺特異性抗原檢測的敏感性為61.0%、特異性分別為45.1%,聯(lián)合檢測的敏感性為81.0%、特異性分別為83.1%。

        2.2三組患者血清腫瘤標(biāo)志物水平的比較

        經(jīng)過方差分析,前列腺癌組、前列腺增生組、健康組三組之間血清腫瘤標(biāo)志物水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

        3討論

        前列腺癌作為男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤,嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量,在全球癌癥發(fā)病率中居第5位,根據(jù)WHO流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示,前列腺癌在男性惡性腫瘤中占男性全部癌癥發(fā)病例數(shù)的14%,在世界范圍內(nèi)分布具有顯著性差異,其發(fā)病率高地區(qū)約為低發(fā)病地區(qū)的20倍。我國是前列腺癌的發(fā)病率和死亡率較低的國家之一,但前列腺癌在我國男性癌癥發(fā)病率呈逐漸上升趨勢,近十年來,我國年均增加12%左右患者,這種趨勢持續(xù)10年下去會超過膀胱癌發(fā)病率,成為嚴(yán)重影響我國男性泌尿系統(tǒng)的重要疾病,應(yīng)引起充分重視,提高治療療效。雖然我國現(xiàn)在前列腺癌發(fā)病率和西方歐美國家比起來尚具有一定差距,但應(yīng)在有效范圍內(nèi)引起足夠重視,盡量做到二級預(yù)防水平,即早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療。臨床研究治療中,被大范圍接受的前列腺癌常規(guī)的檢測項目就是前列腺特異性抗原檢測[12]。對男性人群進(jìn)行前列腺特異性抗原檢測的目的是為了可以早發(fā)現(xiàn)患者是否為前列腺癌,增強(qiáng)前列腺癌的診斷率,達(dá)到降低病死率的作用[13]。前列腺相關(guān)抗原是當(dāng)下研究前列腺的重點項目[14]。和傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附測定方法對比,Luminex檢測技術(shù)敏感性高、穩(wěn)定性強(qiáng)、具有重復(fù)性,并且檢測的血清也比較少[15]。

        總的來說,相對于較為單一的前列腺特異性抗原檢測,抗原家族成員1b、蛋白激酶A錨定蛋白4、α甲基?;o酶A消旋酶、滑膜肉瘤x斷裂點基因聯(lián)合前列腺特異性抗原檢測,可以顯著增強(qiáng)前列腺癌診斷的特異性和敏感性,聯(lián)合檢測的診斷價值非常高,且同時檢測血清CEA、NSE、CYFRA21-1 具有較高的敏感性和特異性,具有臨床價值意義,可以大力推廣。

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