李紅陽，王志勇，邱　　玙，艾曉林，郭　　利

（1.承德醫(yī)學(xué)院，河北承德　067000； 2.承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科）

肌層浸潤性膀胱癌患者BLCA-1含量的變化和臨床意義

李紅陽1，王志勇2△，邱玙1，艾曉林1，郭利1

（1.承德醫(yī)學(xué)院，河北承德067000； 2.承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科）

目的：探討肌層浸潤性膀胱癌患者尿液和血清膀胱癌特異性核基質(zhì)蛋白-1（bladder cancer specific nuclear matrix proteins-1，BLCA-1）含量的變化和意義。方法：采用競爭性ELISA法檢測22例肌層浸潤性膀胱癌患者、21例健康體檢者和23例前列腺增生（BPH）患者尿液和血清BLCA-1的含量。結(jié)果：膀胱癌患者尿液BLCA-1的含量明顯高于健康體檢者和BPH患者（P＜0.01）； 膀胱癌患者血清BLCA-1含量明顯高于健康體檢者（P＜0.05），與BPH患者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。膀胱癌患者血清BLCA-1含量與年齡和病理分級有關(guān)（P＜0.05）：≥60歲膀胱癌患者血清BLCA-1含量明顯高于＜60歲膀胱癌患者，高級別膀胱癌患者血清BLCA-1含量明顯高于低級別膀胱癌患者。膀胱癌患者檢測尿液、血清BLCA-1敏感度（77.28% vs 56.37%）比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；檢測尿液BLCA-1的特異度明顯高于檢測血清（93.18% vs 59.09%，P＜0.05）。結(jié)論：BLCA-1可能對肌層浸潤性膀胱癌具有一定的診斷價(jià)值。

肌層浸潤性膀胱癌；膀胱癌特異性核基質(zhì)蛋白-1；ELISA；診斷

膀胱癌是我國泌尿系統(tǒng)疾病中最常見的惡性腫瘤之一，且發(fā)病率呈逐年上升趨勢［1］。目前，找到一種方便快捷的膀胱癌腫瘤標(biāo)志物以提高膀胱癌的早期診斷率已成為科研工作者們的首要目標(biāo)。醫(yī)學(xué)發(fā)展至今，膀胱鏡檢查加組織活檢依然是膀胱癌診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但這種有創(chuàng)性操作并不適用于大規(guī)模的人群篩查。而傳統(tǒng)的尿脫落細(xì)胞學(xué)檢查敏感性低，并不是經(jīng)濟(jì)/效果比良好的指標(biāo)，更適用于評估高風(fēng)險(xiǎn)人群［2］。目前研究發(fā)現(xiàn)［3］，膀胱癌特異性核基質(zhì)蛋白-1（BLCA-1）在診斷膀胱癌方面具有較高的敏感性和特異性。本研究應(yīng)用競爭性ELISA法檢測了肌層浸潤性膀胱癌患者、健康體檢者和良性前列腺增生（BPH）患者血清和尿液中BLCA-1的含量，以探討B(tài)LCA-1診斷膀胱癌的臨床價(jià)值。

1　材料與方法

1.1一般資料初發(fā)肌層浸潤性膀胱癌患者22例，男16例、女6例，年齡35-79歲，平均59±12歲；根據(jù)WHO 2004分級法，乳頭狀尿路上皮癌低分級6例、高分級16例；根據(jù)2009 TNM分期標(biāo)準(zhǔn)，T2 16例、T3 5例、T4 1例。 健康體檢者21例，男10例、女11例，年齡21-66歲，平均41±14歲；BPH患者23例，年齡52-81歲，平均64±7歲。三組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法收集三組人群的靜脈血和新鮮中段尿，4℃離心15min，取上清液-80℃保存待測。應(yīng)用競爭性ELISA法檢測樣本BLCA-1的含量（人BLCA-1 ELISA試劑盒購自武漢華美生物工程有限公司）。

1.3統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)，組間BLCA-1含量的比較采用單因素方差分析，血清、尿液BLCA-1特異度和敏感度的比較采用卡方檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1三組受試人群血清和尿液BLCA-1的含量膀胱癌患者尿液BLCA-1的含量明顯高于健康體檢者和BPH患者（P＜0.01）。膀胱癌患者血清BLCA-1含量明顯高于健康體檢者（P＜0.05），與BPH患者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1：

表1　三組受試人群尿液、血清BLCA-1的含量（n=6±s ，單位：ng/ml）

表1　三組受試人群尿液、血清BLCA-1的含量（n=6±s ，單位：ng/ml）

與肌層浸潤性膀胱癌患者比較：*P＜0.01，**P＜0.05

組別　n　　尿液　　血清肌層浸潤性膀胱癌患者　22　1.48±1.71　6.62±3.42健康體檢者　21　0.44±0.20*　3.52±1.03**BPH患者　23　0.71±0.36*　5.61±1.91

2.2肌層浸潤性膀胱癌患者尿液、血清BLCA-1含量與膀胱癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系膀胱癌患者尿液BLCA-1含量與年齡、性別、臨床分期、膀胱癌病理分級無關(guān)（P＞0.05）。膀胱癌患者血清BLCA-1含量與性別、臨床分期無關(guān)（P＞0.05）；與年齡和病理分級有關(guān)（P＜0.05）：≥60歲膀胱癌患者血清BLCA-1含量明顯高于＜60歲膀胱癌患者，高級別膀胱癌患者血清BLCA-1含量明顯高于低級別膀胱癌患者。見表2：

表2　血清、尿液BLCA-1含量與膀胱癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系（n=6±s ，單位：ng/ml）

表2　血清、尿液BLCA-1含量與膀胱癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系（n=6±s ，單位：ng/ml）

參數(shù)　　例數(shù)　　尿液　　血清性別　　男　16　1.01±1.82　5.49±3.93女　6　1.53±1.00　7.94±2.85 P＞0.05　?。?.05年齡（歲）?。?0　8　0.80±1.73　4.95±3.15≥60　14　1.50±1.68　7.94±3.63 P＞0.05　?。?.05分期T2a T2b T3 T4 4 1 251 0.55±0.39 1.67±1.91 1.48±15.48 1.53±0.00 5.59±2.79 6.43±4.12 8.62±3.53 10.96±0.00 P＞0.05　?。?.05分級低級別　6　0.73±0.14　4.50±3.08高級別　16　0.91±1.16　7.47±3.51 P＞0.05　　＜0.05

2.3肌層浸潤性膀胱癌患者檢測尿液、血清BLCA-1含量的特異性和敏感性cut-off值取0.921ng/ml時(shí)，檢測尿液BLCA-1的敏感度和特異度分別為77.28%（17/22）和93.18%（41/44）；cut-off值取4.537ng/ml時(shí)，檢測血清BLCA-1的靈敏度和特異度分別為86.37%（19/22）和59.09%（26/44）。膀胱癌患者檢測尿液、血清BLCA-1敏感度比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；檢測尿液BLCA-1的特異度明顯高于檢測血清（P＜0.05）。

3　討論

膀胱癌作為泌尿系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，不斷危害著人們的生命健康。中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院的統(tǒng)計(jì)顯示，膀胱癌占中國惡性腫瘤的2.5%，且以4.6%的增長率逐年增長［4］。因此，早期診斷膀胱癌并采取及時(shí)、合理的治療措施，動(dòng)態(tài)監(jiān)測復(fù)發(fā)，有效評估預(yù)后，一直是泌尿外科領(lǐng)域重要的研究方向。

核基質(zhì)蛋白維持著細(xì)胞核的形態(tài)結(jié)構(gòu)，其異常表達(dá)與腫瘤分化密切相關(guān)，具有顯著的組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)特異性，預(yù)示了其在診斷膀胱癌中的潛在價(jià)值［5］。1996年，Getzenberg等［6］成功提取了6種特異性表達(dá)于膀胱癌組織中的核基質(zhì)蛋白，即BLCA-1-BLCA-6。2005年Myers-Irvin等［7］采用ELISA法檢測了25例膀胱癌患者和46例對照者尿液BLCA-1的含量，結(jié)果顯示其診斷膀胱癌的敏感度和特異度分別為80%和87%。

本研究發(fā)現(xiàn)，肌層浸潤性膀胱癌患者尿液BLCA-1的含量明顯高于健康體檢者和BPH患者；22例膀胱癌患者中，17例患者尿液BLCA-1含量高于cut-off值，44例對照者（健康體檢者和BPH患者）尿液BLCA-1含量有41例低于cut-off值，與國內(nèi)外研究結(jié)果一致［3，6-7］。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)，膀胱癌患者血清BLCA-1的含量明顯高于健康體檢者，與BPH患者比較無明顯差異；雖然敏感度高達(dá)86.37%，但44例對照者中僅26例血清BLCA-1含量低于cut-off值，說明檢測血清中BLCA-1的含量受到了泌尿系統(tǒng)良性疾病的影響。

BLCA-1基因序列類似于TI-227H［3］。TI-227H是由Ishiguro等［8-9］從小鼠黑色素瘤B16-F10亞系中分離出來的一種癌癥轉(zhuǎn)移相關(guān)基因，說明BLCA-1的表達(dá)可能與腫瘤的進(jìn)展或轉(zhuǎn)移有關(guān)，但本研究僅血清BLCA-1的含量支持此結(jié)果。膀胱癌是一種多基因參與、多分子協(xié)調(diào)、多階段的復(fù)雜疾病，目前對于BLCA-1的研究尚處于初步階段，BLCA-1用于臨床的有效性仍需多中心臨床研究佐證。

［1］許斌，華立新.膀胱癌流行病學(xué)進(jìn)展［J］.國際泌尿系統(tǒng)雜志，2007，27（4）：469-476.

［2］Hosseini J， Golshan AR， Mazloomfard MM， et al. Detection of recurrent bladder cancer： NMP22 test or urine cytology？［J］. Urol J，2012，9（1）：367-372.

［3］Santoni M， Catanzariti F， Minardi D， et al. Pathogenic and Diagnostic Potential of BLCA-1 and BLCA-4 Nuclear Proteins in Urothelial Cell Carcinoma of Human Bladder［J］. Adv Urol， 2012，2012：397412.

［4］韓蘇軍，張思維，陳萬青，等.中國膀胱癌發(fā)病現(xiàn)狀及流行趨勢分析［J］.癌癥進(jìn)展，2013，11（1）：89-95.

［5］Konety BR， Getzenberg RH. Nuclear structural proteins as biomarkers of cancer［J］. J Cell Biochem， 1999， Suppl 32-33：183-191.

［6］Getzenberg RH， Konety BR， Oeler TA， et al. Bladder cancer-associated nuclear matrix proteins［J］. Cancer Res， 1996， 56（7）：1690-1694.

［7］Myers-Irvin JM， Landsittel D， Getzenberg RH. Use of the novel marker BLCA-1 for the detection of bladder cancer［J］. J Urol，2005， 174（1）：64-68.

［8］Ishiguro T， Nakajima M， Naito M， et al. Identif ication of genes differentially expressed in B16 murine melanoma sublines with different metastatic potentials［J］. Cancer Res， 1996， 56（4）：875-879.

［9］Ishiguro T， Nagawa H， Naito M， et al. Analysis of novel metastasis-associated Gene TI-227［J］. Jpn J Cancer Res， 2000， 91（4）：390-394.

CHANGES AND SIGNIFICANCE OF BLCA-1 CONTENT IN PATIENTS WITH MUSCLE INVASIVE BLADDER CANCER

LI Hong-yang， WANG Zhi-yong， QIU Yu， et al
(Chengde Medical college, Hebei Chengde 067000, China)

Objective：To explore the changes and signifi cance of bladder cancer specifi c nuclear matrix proteins-1（BLCA-1） content in urine and serum of muscle invasive bladder cancer patients. Methods: Competitive ELISA assay was used to detect the BLCA-1 content in urine and serum of 22 muscle invasive bladder cancer patients， 21 healthy controls and 23 benign prostatic hyperplasia （BPH） patients. Results: The urine BLCA-1 content of muscle invasive bladder cancer patients was obviously higher than that of healthy controls and BPH patients （P＜0.05）； The serum BLCA-1 content of muscle invasive bladder cancer patients was obviously higher than that of healthy controls （P＜0.05）， but was no statistically signifi cant difference compared with BPH patients （P＞0.05）. In muscle invasive bladder cancer patients， the serum BLCA-1 content was concerned with age and pathological grading （P＜0.05）： The serum BLCA-1 content of patients higher than 60 years was obviously higher than that lower than 60 years； the serum BLCA-1 content of high grade patients was obviously higher than that of low grade patients. There was no signifi cant difference in sensitivity of urine and serum BLCA-1 （77.28% vs 56.37%） of patients with bladder cancer （P＞0.05）； The specifi city of urine BLCA-1 was obviously higher than serum BLCA-1 （93.18% vs 59.09%） of patients with bladder cancer （P＜0.05）. Conclusions: BLCA-1 may has certain diagnosticvalue for muscle invasive bladder cancer.

Muscle invasive bladder cancer；Bladder cancer specifi c nuclear matrix proteins-1； ELISA； Diagnosis

R737.14

A

1004-6879（2016）05-0372-03

（2015-12-07）