姚清華，顏孫安，郭清雄，王寶珍，陸　鵬，林　虬*

(1.福建省精密儀器農(nóng)業(yè)測試重點實驗室，福建　福州　350003；2.農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風險評估實驗室(福州)，福建　福州　350003；3.福建省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術研究所，福建　福州　350003；4.福建正源飼料有限公司，福建　莆田　351111；5.福建省晉江市農(nóng)業(yè)局水產(chǎn)技術服務中心，福建　泉州　362200)

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羽毛肽粉對瓦氏黃顙魚稚魚生長、體成分和消化酶活性的影響

姚清華1,2,3，顏孫安1,2,3，郭清雄4，王寶珍5，陸鵬4，林虬1,2,3*

(1.福建省精密儀器農(nóng)業(yè)測試重點實驗室，福建福州350003；2.農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風險評估實驗室(福州)，福建福州350003；3.福建省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術研究所，福建福州350003；4.福建正源飼料有限公司，福建莆田351111；5.福建省晉江市農(nóng)業(yè)局水產(chǎn)技術服務中心，福建泉州362200)

為研究羽毛肽粉替代魚粉對瓦氏黃顙魚Pelteobagrusvachelli幼魚生長、體成分和消化酶活力的影響，以基礎飼料為對照，分別在基礎飼料中添加5%、10%、15%、20%羽毛肽粉，飼喂 初始體重(25±2)g試驗魚60 d。結果表明，試驗黃顙魚增重率、特定生長率隨羽毛肽粉添加水平升高呈先升后降趨勢，添加水平為10%時，增重率達到最大值117.48%。當添加水平為15%、20%時，增重率、特定生長率顯著下降(P<0.05)；攝食總量隨著羽毛肽粉的添加水平也呈先升后降趨勢，在10%時，攝食總量達到最大值。飼料系數(shù)隨著羽毛肽粉添加水平增加呈升高趨勢，5%添加組與對照組無顯著性差異(P>0.05)，其余各組均顯著高于對照組(P<0.05)；羽毛肽粉在20%添加水平內(nèi)對瓦氏黃顙魚幼魚體蛋白質(zhì)、灰分、脂肪、水分無顯著性影響(P>0.05)；試驗黃顙魚肝胰腺胰蛋白酶活力隨羽毛肽粉添加水平的升高呈升高趨勢，5%添加水平組與對照組無顯著差異(P>0.05)，但顯著低于其余各組(P<0.05)；試驗黃顙魚腸胰蛋白酶活力與肝胰腺蛋白酶活力呈相似的變化趨勢，當添加水平達15%時，腸胰蛋白酶活力與胰胰蛋白酶活力比值顯著下降(P<0.05)；不同添加水平羽毛肽粉對試驗黃顙魚淀粉酶活性無顯著性影響(P>0.05)；5% 羽毛肽粉添加組的腸、肝胰腺脂肪酶活力最低，顯著低于其他羽毛肽粉添加組與對照組(P<0.05)；羽毛肽粉添加水平至10%時，腸脂肪酶活力與對照組無顯著性差異(P>0.05)，至15%時，肝胰臟脂肪酶活力與對照組無顯著差異(P>0.05)；羽毛肽粉添加組瓦氏黃顙魚腸胃蛋白酶活性顯著高于對照組(P<0.05)，15%、20%添加組>5%、10%添加組>對照組，各組間肝胰腺胃蛋白酶活性無顯著性差異。在瓦氏黃顙魚飼料中可以適量添加羽毛肽粉，添加水平在10%以內(nèi)時，可以顯著提高瓦氏黃顙魚攝食量，促進其生長。

瓦氏黃顙魚；幼魚；羽毛肽粉；生長；體成分；消化酶；營養(yǎng)

近年來，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模日益擴大及海洋捕撈漸達峰值，飼料主要蛋白質(zhì)源魚粉的價格不斷上揚，尋找水產(chǎn)飼料替代蛋白質(zhì)源、降低養(yǎng)殖成本已成為水生動物營養(yǎng)研究的熱點之一，研究替代種類包括豆粕、棉籽粕、玉米蛋白粉、花生粕、菜籽粕等，養(yǎng)殖對象涉及魚類、蝦類、貝類，如草魚Ctenopharyngodonidellus、真鯛Pagrosomusmajor、尼羅羅非魚Tilapianilotica、凡納濱白對蝦Litopenaeusvannamei、中華絨螯蟹、方斑東風螺等[1-8]。我國畜禽養(yǎng)殖業(yè)發(fā)達，羽毛粉資源豐富、蛋白質(zhì)含量高、價格便宜，是潛在的飼料蛋白質(zhì)源。但是，由于羽毛粉中的角蛋白消化率低、氨基酸平衡性差等因素限制了其在水產(chǎn)動物飼料中的應用[9]。與魚粉相比，羽毛蛋白質(zhì)中必需氨基酸組成極不平衡[9]。胃蛋白酶對未處理羽毛樣品的體外消化率僅為10.5%[10]。建鯉對膨化羽毛粉和酶解羽毛粉的粗蛋白質(zhì)表觀消化率僅為66.51%和75.64%[11]。以上研究表明，當飼料中添加羽毛粉時，會由于其消化率低、適口性差[8-10]而影響水生動物的生長。由此可見，要解決羽毛粉在水產(chǎn)飼料中的應用瓶頸，關鍵是要解決其角蛋白消化率低、適口性差的問題。項目組前期通過對羽毛粉進行預處理，獲得了具自主知識產(chǎn)權的羽毛肽粉[12]，具有良好的消化吸收率及適口性，并在鰻鱺飼料中得到應用[13]。

瓦氏黃顙魚Pelteobagrusvachelli具有高蛋白質(zhì)、低脂肪的營養(yǎng)特點，味道鮮美、肉質(zhì)細嫩、無肌間刺，深受消費者喜愛，具有較高的經(jīng)濟價值，近年養(yǎng)殖發(fā)展迅速，其營養(yǎng)需求的研究已有一些報道[14-17]。本試驗通過在配合飼料中添加羽毛肽粉飼喂瓦氏黃顙魚幼魚，研究不同羽毛肽粉添加水平對瓦氏黃顙魚幼魚生長性能、體成分及消化酶活性的影響，探討羽毛肽粉作為瓦氏黃顙魚配合飼料蛋白質(zhì)源時的適宜添加量，以期降低瓦氏黃顙魚養(yǎng)殖飼料成本，并為羽毛肽粉在其他水產(chǎn)動物配合飼料中的應用提供參考。

1　材料與方法

1.1試驗設計

試驗用魚平均體重(25±2)g，外觀正常、規(guī)格整齊，購自漳州龍海黃顙魚養(yǎng)殖場，飼養(yǎng)容器為直徑90 cm、高100 cm PVC桶，經(jīng)5 d馴養(yǎng)后，分設5個處理，每個處理3個重復， 每重復30尾試驗魚。試驗期間，水溫控制在26～28℃，pH 7.8～8.0。每日分別于8:00和18:00投喂試驗飼料，飽食投喂，1 h后用虹吸器吸底，清除殘餌，檢出死苗并稱重記錄。試驗周期60 d。

根據(jù) DB35/T 1054-2010黃顙魚配合飼料要求，等氮等能配制黃顙魚基礎飼料，各組羽毛肽粉添加量依次為5%、10%、15%、20%，試驗飼料營養(yǎng)成分見表1，氨基酸組成見表2。根據(jù)GB/T 6435-2014、GB/T 6438-2007、GB/T6432-1994、GB/T6433-2006、GB/T 18246-2000測定飼料水分、粗灰分、粗蛋白、粗脂肪和氨基酸。

注：(1)預混料為每kg飼料提供：MnSO489 mg; NaCl 3 000 mg; ZnSO4150 mg; FeSO465 mg; CuSO428 mg; KI 11 mg; VA 84 000 IU; VD 2 400 IU; VE 100 mg; VK 1 mg; VC 270 mg; VB12 mg; VB27 mg; VB66 mg; VB121 mg;泛酸鈣32 mg；煙酸25 mg; 生物素; 葉酸7.5 mg; 肌醇440mg。 (2)營養(yǎng)水平為實測值。

1.2取樣與分析方法

試驗結束后，停食24 h后取樣。

1.2.1魚體生長性能指標計算公式： 增重率/%=[(平均末質(zhì)量-平均初質(zhì)量)/平均初質(zhì)量]×100%；特定生長率/%=[(ln平均末質(zhì)量-ln平均初質(zhì)量)/試驗天數(shù)]×100%；存活率/%=(終尾數(shù)/初始尾數(shù))×100%。

1.2.2魚體體成分測定每個重復隨機取5條，每試驗組共15條瓦氏黃顙魚用于體成分的測定。根據(jù)GB 5009.3-2010、GB 5009.5-2010、GB 5009.6-2010、GB 5009.4-2010測定魚體水分、蛋白質(zhì)、脂肪、灰分等。

1.2.3消化酶活力測定于0℃冰上，解剖獲得腸道及肝臟，使用酶活測試試劑盒進行測定，所用蛋白定量測試盒、淀粉酶測試盒、胰蛋白酶測試盒、胃蛋白酶測試盒、脂肪酶測試盒均購自南京建成科技有限公司，考馬斯亮藍染色法測定組織勻漿液蛋白濃度。

注：表中數(shù)據(jù)為3個重復的平均值；*呈味氨基酸

1.3統(tǒng)計分析

采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析，采用Duncan氏多重比較組間差異，P<0.05表示差異顯著。

2　結果與分析

2.1羽毛肽粉對瓦氏黃顙魚生長性能的影響

表3顯示，飼料中添加羽毛肽粉后，增重率、特定生長率均呈先升后降趨勢，添加率低于10%以內(nèi)時，增重率、特定生長率顯著提高(P<0.05)，添加率為10%時，增重率最高。當添加率為20%時，魚體增重率、特定生長率顯著下降(P<0.05)。攝食總量隨著羽毛肽粉的添加水平也呈先升后降趨勢，5%、10%、15%添加組均與對照組有顯著性差異(P<0.05)，添加10%時，攝食總量達到最大值；添加量為20%，攝食總量與對照組無顯著性差異(P>0.05)。飼料系數(shù)隨著羽毛肽粉添加水平增加呈升高趨勢，5%添加組與對照組無顯著性差異(P>0.05)，其余各組間均存有顯著性差異(P<0.05)。以羽毛肽粉添加率為x，特定生長率為y，通過二次曲線回歸分析得出，二者存有y=-0.001 8x2+0.029x+1.138 6(R2=0.911 9)的回歸，求導可知羽毛粉最佳添加量為8.06%。

表3　羽毛肽粉添加水平對瓦氏黃顙魚生長性能的影響

注：同列數(shù)據(jù)肩標小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

2.2羽毛肽粉對瓦氏黃顙魚體成分的影響

飼料中添加羽毛肽粉對黃顙魚肌肉水分、脂肪、灰分、蛋白含量均無顯著影響(P>0.05)，見表4。

表4　羽毛肽粉對黃顙魚體成分影響(濕重)

2.3羽毛肽粉對瓦氏黃顙魚消化酶活性的影響

表5顯示，試驗黃顙魚的胰蛋白酶活性隨羽毛肽粉添加水平升高呈升高趨勢，添加水平為5%時，肝胰腺、腸胰蛋白酶活性與對照組無顯著差異(P>0.05)，但顯著低于其余各組(P<0.05)。腸胰蛋白酶活力與肝胰腺胰蛋白酶活力呈相似的變化趨勢。腸胰蛋白酶活力與胰胰蛋白酶活力比值隨羽毛肽粉添加水平升高顯著下降，當添加率低于10%時，無顯著性差異(P>0.05)，但顯著高于15%添加組和20%添加組(P<0.05)。不同水平的羽毛肽粉添加對瓦氏黃顙魚幼魚淀粉酶活性的影響不顯著(P>0.05)。5%羽毛肽粉添加組的腸/肝胰腺脂肪酶活力最低(79.2、422.1 mU·mg-1)，顯著低于其他羽毛肽粉添加組與對照組(P<0.05)。羽毛肽粉添加水平至10%時，腸脂肪酶活力與對照組無顯著性差異(P>0.05)；至15%時，肝胰臟脂肪酶活力與對眼組無顯著差異(P>0.05)。羽毛肽粉添加組瓦氏黃顙魚腸胃蛋白酶活性顯著高于對照組(P<0.05)，15%、20%添加組>5%、10%添加組>對照組。

表5　羽毛肽粉添加水平對瓦氏黃顙魚消化酶活力的影響

3　討論與結論

3.1羽毛肽粉添加水平對瓦氏黃顙魚生長性能和體成分的影響

研究表明[3-4,18-19]，非魚粉蛋白質(zhì)源作為飼料中唯一蛋白質(zhì)源時，大多數(shù)水生動物的生長都會受到影響，其添加量應控制在一定的范圍內(nèi)。本試驗中當羽毛肽粉添加水平在10%范圍內(nèi)時，瓦氏黃顙魚的增重率、特定生長率均顯著高于對照組，而15%以上呈下降趨勢。可見，在配合飼料中添加10%羽毛肽粉，可以減少魚粉用量，降低飼料成本。羽毛肽粉富含風味氨基酸[20]，具有良好的誘食作用，增加瓦氏黃顙魚的攝食量，與其在鰻鱺中的研究結果一致[13]。但當配合飼料中羽毛肽粉含量高于10%時，飼料中部分必需氨基酸(組氨酸His、賴氨酸Lys、甲硫氨酸Met)不足，對瓦氏黃顙魚生長產(chǎn)生抑制作用，飼料系數(shù)顯著增大。因此，在配合飼料中適當補充富含His、Lys的蛋白質(zhì)源(如富含Lys的蠶豆粉漿蛋白粉、血粉，富含His的豆粕、玉米粉等)或?qū)⒂兄谶M一步提高飼料的氨基酸平衡性，拓寬其在水產(chǎn)動物配合飼料中的應用前景。

國內(nèi)外就蛋白質(zhì)源對水生動物體成分影響研究結論不盡相同，不同蛋白質(zhì)源及其添加水平對養(yǎng)殖對象不同營養(yǎng)指標影響各異。陳亮[21]的研究表明，棉籽粕添加水平對中華絨螯蟹幼蟹全蟹水分含量無顯著影響，而對照組灰分含量顯著低于66%棉籽粕添加組，蛋白質(zhì)含量顯著高于66%棉籽粕添加組。伍代勇等[22]發(fā)現(xiàn)，棉籽粕添加水平對南美白對蝦肌肉成分無顯著性影響。Yue等[4]和El-Saidy等[3]研究均表明，棉籽粕添加水平對尼羅羅非魚肌肉成分無顯著影響。本試驗結果表明當羽毛肽粉添加水平在20 %范圍內(nèi)時，對瓦氏黃顙魚肌肉營養(yǎng)成分無顯著性影響。但蛋白質(zhì)源對水生動物體成分的影響機理尚未明確，有待進一步深入研究。

3.2羽毛肽粉添加水平對瓦氏黃顙魚消化酶活性的影響

水產(chǎn)動物消化酶活性高低及變化情況是衡量水產(chǎn)動物對飼料適應性的方法之一，直接反映其對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力，并與營養(yǎng)物質(zhì)含量呈正相關[18]。本試驗結果表明，瓦氏黃顙魚腸道消化酶活力遠遠超過肝胰腺，胰蛋白酶活性顯著高于胃蛋白酶，這與其他水產(chǎn)動物的情況是相似的[18,23-25]，可能是由于肝胰腺所分泌的蛋白酶是酶原，在腸道被激活成具有活性的酶。腸壁比面積大，具較強的酶吸附能力可能也是造成上述現(xiàn)象的原因之一。此外，研究發(fā)現(xiàn)當添加水平小于5%時，胰蛋白酶活性變化不顯著，隨著添加水平的繼續(xù)增加，胰蛋白酶活力顯著上升：肝胰腺中胃蛋白酶活力變化不顯著。羽毛粉添加組的腸道胃蛋白酶較魚粉組有顯著提高，但不同添加水平羽毛肽粉組間并無顯著性差異。分析認為這與羽毛肽粉的氨基酸組成特點有關，與魚粉相比，羽毛肽粉限制性必需氨基酸主要有：賴氨酸、組氨酸、色氨酸、蛋氨酸、胱氨酸。這與其他研究結果相一致[18]。

在仔稚魚發(fā)育過程中，胰腺外分泌能力的大小是仔稚魚消化系統(tǒng)成熟與否的標志之一[26]。腸胰蛋白酶活力與胰臟胰蛋白酶活力比值的大小是反映胰腺外分泌能力高低的指標[27]。本試驗中魚粉組的腸胰蛋白酶活力與胰臟胰蛋白酶活力比值顯著高于15% 處理組和20% 處理組，但與5%處理組和10% 處理組無顯著性差異。這說明添加水平低于10%時，瓦氏黃顙魚的胰腺外分泌功能不受影響。

試驗黃顙魚脂肪酶的變化規(guī)律與飼料中脂肪含量變化相一致，這與部分學者[28-29]的研究結果相一致。飼料脂肪水平對水產(chǎn)動物脂肪酶活性有顯著性影響，其活性隨著飼料脂肪水平的變化呈現(xiàn)相似的變化趨勢，水產(chǎn)動物消化器官可根據(jù)攝入營養(yǎng)物質(zhì)的營養(yǎng)特征，調(diào)整相應消化酶的活性，以便更好地吸收及利用飼料中的營養(yǎng)。

淀粉酶活力在仔稚魚的發(fā)育中隨著胰腺外分泌的發(fā)育而下降[23]。淀粉酶活力在羽毛肽粉0%～20%添加水平范圍內(nèi)時無顯著差異，這表明羽毛肽粉在20%范圍內(nèi)添加對瓦氏黃顙魚幼魚胰腺外分泌功能的發(fā)育無影響。淀粉酶活力可能主要受飼料淀粉含量的誘導影響，張琴等[30]研究發(fā)現(xiàn)，用不同餌料投喂方格星蟲SipunculusnudusLinnaeus時，飼料的糖脂比對其淀粉酶活力有顯著性影響。王重剛等[31]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中的淀粉含量與真鯛Pagrosomusmajor稚魚淀粉酶活力呈正相關關系。張珊等[23]利用晶體氨基酸替代魚粉飼養(yǎng)半滑舌鰨CynoglossussemilaevisGünther時也有相似的結論。因此，本試驗中的淀粉酶活性無顯著性變化可能也與飼料配制時維持淀粉含量穩(wěn)定密切相關。

飼料中添加10%以內(nèi)的羽毛肽粉，可以顯著提高瓦氏黃顙魚攝食量，促進其生長，添加15%以上，魚體生長速度受到抑制。如何進一步改善配方，解決高水平添加條件下配合飼料的適口性及氨基酸營養(yǎng)平衡性有待進一步研究。

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(責任編輯：柯文輝)

Effect of Feather Peptide Meal on Growth, Body Composition, and Digestive Enzymes of Darkbarbel Catfish(Pelteobagrusvachelli)

YAO Qing-hua1,2,3，YAN Sun-an1,2,3，GUO Qing-xiong4，WANG Bao-zhen5，LU Peng4，LIU Qiu1,2,3*

[1.FujianKeyLaboratoryofPrecisionMeasurementofforAgriculture，F(xiàn)uzhou，F(xiàn)ujian350003，China；2.LaboratoryofQualityandSafetyRiskAssessmentforAgro-products(Fuzhou),MinistryofAgriculture，F(xiàn)uzhou，F(xiàn)ujian350003，China；3.InstituteofQualityStandardsandTestingTechnology,FujianAcademyofAgriculturalSciences，F(xiàn)uzhou，F(xiàn)ujian350003，China；4.FujianZhengyuanFeedCo.,Ltd.,Putian,Fujian351111,China；5.CenterofFisheryTechnologyServiceinJinjiangAgricultureBureau,Quanzhou，F(xiàn)ujian362200,China]

Effects of peptide meal made from feathers in the feed on the growth, body composition, and digestive enzymes of the darkbarbel catfish,Pelteobagrusvachelli, were studied. Triplicate groups of 30 fish with an averaging weight of 25(2 gin each group were randomly selected to be fed ondiets formulated with the addition of 0, 5, 10, 15, or 20% of the peptide meal for 60 days. The results showed that(1) the peptide meal significantly affected the weight gain rate(WGR), specific growth rate(SGR), and total feed intake(TFI) on the fish (P<0.05); (2) a 10% addition of the meal in the feed was determined to be appropriatefora diet that produced a WGR of 117.48% on the fish; (3) the WGR and SGR of the fish decreased significantly when the meal addition increased to 15% or 20%; (4) with increasing amount of the peptide meal, the feed conversation ratio increased gradually; (5)no significant differences were found among all groups on the muscle moisture, lipid, protein,or ash content on the fish fed on diet with 20% peptide meal addition (P>0.05); (6)the trypsinactivity in thehepatopancreas of the fishsignificantly increased with increasing meal addition (P<0.05), but no significant differences were found between 5% meal addition and control; (7) the trypsin activities in the intestine and hepatopancreas showed a similar trend, however, the ratio of intestinal trypsin/hepatopancreatic trypsinsignificantly decreased at 15% meal addition; (8) no significant differences was observedon the amylase activities among all groups (P>0.05); (9) at 5% meal addition, the lipase activity in the intestine or hepatopancreas of the fish was lowest among all groups (P<0.05); (10)with a 10% meal addition, there was no significant differenceobserved in the intestinal lipase activity, and the hepatopancreatic lipase activityremain same as control up to 15% of the meal addition; (11)the pepsin activities in the stomach of the fishfed with different diets were significant higher than control, and the 15% and 20% meal addition were higher than5%, while 10% addition was higher than control (P<0.05); (12)no significant differences were evidenton the stomach pepsin activities in the hepatopancreas of the fish from all groups. It appeared that a 10% addition of the feather peptide meal to the basal diet could be satisfactorily applied for feeding juvenile darkbarbel catfish.

Pelteobagrusvachelli;juvenile;feather peptide meal;growth;body composition;digestive enzyme; nutrition

姚清華，顏孫安，郭清雄，等.羽毛肽粉對瓦氏黃顙魚稚魚生長、體成分和消化酶活性的影響[J].福建農(nóng)業(yè)學報，2016，31(6)：580-585.

YAO Q-H，YAN S-A，GUO Q-X，et al.Effect of Feather Peptide Meal on Growth, Body Composition, and Digestive Enzymes of Darkbarbel Catfish(Pelteobagrusvachelli)[J].FujianJournalofAgriculturalSciences，2016，31(6)：580-585.

2016-03-21初稿；2016-04-12修改稿

姚清華(1985-)，男，助理研究員，研究方向：水生動物營養(yǎng)與質(zhì)量安全(E-mail: yaoyaoshuimu@163.com)

林虬(1963-)，男，副研究員，主要從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與標準研究(E-mail:linqiu3163@163.com))

福建省科技計劃項目——省屬公益類科研院所基本科研專項(2014R1025-6)；福建省農(nóng)業(yè)科學院青年創(chuàng)新基金(2013DQB-10、2014DQB-9)

S 963

A

1008-0384(2016)06-580-06