管雅琳　于長申　張　瑩　陸　卉　劉淑玲　張雅靜　石志鴻　紀(jì)　勇

(天津市環(huán)湖醫(yī)院，天津　300060)

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急性缺血性腦血管病患者血清ox-LDL及PAPP-A水平變化及臨床意義

管雅琳于長申張瑩陸卉劉淑玲張雅靜石志鴻紀(jì)勇

(天津市環(huán)湖醫(yī)院，天津300060)

目的探討急性缺血性腦血管病患者血清氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)及妊娠相關(guān)血漿蛋白(PAPP)-A水平及臨床意義。方法選擇86例急性缺血性腦血管病患者作為實驗組，同期入院行健康體檢者30例作為對照組。比較兩組以及實驗組發(fā)病24 h內(nèi)、治療后第7天、治療后第14天血清ox-LDL及PAPP-A水平。觀察動脈內(nèi)-中膜厚度(IMT)、不同性質(zhì)頸動脈斑塊的血清ox-LDL及PAPP-A水平。結(jié)果實驗組血清ox-LDL及PAPP-A水平顯著高于對照組(P<0.05)；實驗組治療后第7、14天血清ox-LDL及PAPP-A水平顯著低于發(fā)病24 h內(nèi)(P<0.05)；頸動脈硬化組血清ox-LDL及PAPP-A水平顯著高于IMT增厚組，IMT增厚組血清ox-LDL及PAPP-A水平顯著高于IMT正常組。易損斑塊組血清ox-LDL及PAPP-A水平顯著高于穩(wěn)定斑塊組。結(jié)論通過檢測血清ox-LDL及PAPP-A水平，可提示急性缺血性腦血管病早期發(fā)生，判斷預(yù)后，值得臨床推廣應(yīng)用。

急性缺血性腦血管??；氧化型低密度脂蛋白；妊娠相關(guān)血漿蛋白A

急性缺血性腦血管疾病根據(jù)病因可分為栓塞性及血栓形成性兩大類，局部腦缺血癥狀在24 h內(nèi)完全緩解者稱之為短暫腦缺血發(fā)作〔1〕，癥狀持續(xù)超過24 h以上經(jīng)一定時間消失為可逆性缺血性腦損害，缺血癥狀持續(xù)24 h不消失稱為局限性腦梗死〔2〕。動脈粥樣硬化不穩(wěn)定斑塊破裂，繼發(fā)血栓形成，氧化應(yīng)激可誘導(dǎo)、加劇炎癥反應(yīng)為本病主要病理生理基礎(chǔ)〔3〕。諸多臨床研究證實〔4～6〕，氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導(dǎo)的毒性反應(yīng)在動脈粥樣硬化發(fā)生至血栓形成中貫穿始終，而妊娠相關(guān)血漿蛋白(PAPP)-A可通過多種途徑參與動脈粥樣硬化斑塊的去穩(wěn)定化及破裂。本研究觀察治療前后血清ox-LDL及PAPP-A水平改善情況，探討這兩種指標(biāo)在急性缺血性腦血管病中的臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料選擇我院2010年8月至2015年8月收治的86例急性缺血性腦血管病患者為研究對象，所有患者入院時均符合急性腦血管病臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)〔7〕。86例急性缺血性腦血管病患者作為實驗組，實驗組根據(jù)頸動脈內(nèi)-中膜厚度(CIMT)分為：頸動脈硬化組，血管內(nèi)-中膜厚度(IMT)增厚組，IMT正常組；根據(jù)頸動脈斑塊性質(zhì)分為易損斑塊組及穩(wěn)定斑塊組。同時選擇同期入院行健康體檢30例作為對照組。實驗組男56例，女30例；年齡42～80〔平均(62.3±3.8)〕歲。對照組男19例，女11例；年齡42～80〔平均(62.5±3.6)〕歲。兩組性別、年齡等一般資料比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入排除標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：實驗組年齡在40歲以上，符合急性缺血性腦血管病臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)病時間在14 d內(nèi)，經(jīng)實驗室輔助檢查頭顱多普勒、頸動脈彩超。頭顱磁共振成像等檢查證實。所有患者檢測前未服用影響血小板功能及前列腺素代謝類藥物。健康體檢者年齡、性別構(gòu)成比、文化程度、職業(yè)構(gòu)成等盡量與實驗組保持一致。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)CT、MRI或臨床診斷為血管畸形、腦腫瘤、腦膿腫、多發(fā)性硬化、出血性、血管炎性腦疾病。(2)血管成形術(shù)、血管外科手術(shù)及缺血性腦筋導(dǎo)致的醫(yī)源性缺血性腦血管病患者。

1.3方法

1.3.1儀器與試劑溫育箱購自河北黃驊航天儀器廠，ox-LDL試劑盒購自TPI公司，PAPP-A試劑盒購自上海朗頓公司。酶標(biāo)儀購自Bio-Rad公司。

1.3.2檢測方法采集實驗組患者發(fā)病24 h內(nèi)，治療后第7、14天清晨空腹靜脈血4 ml，注入含100 g/L乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)30 μl+抑肽酶400 IU的試管中，混勻后，以3 000 r/min離心10 min，分離血漿，-20℃保存待檢。以相同方法采集對照組入院體檢時空腹靜脈血4 ml，分離血漿后保存待檢。ox-LDL檢測采用酶聯(lián)免疫吸附法：(1)每孔加入100 μl稀釋后的樣本、質(zhì)控認(rèn)識(CAL)、陽性對照、陰性對照組，恐怖對照組加入稀釋液，采用Tris鹽酸緩沖液(TSP)封閉。(2)室溫孵育1 h后，移除TSP，室溫干燥1 h后置于封閉盒中。(3)每孔用250 μl洗滌液洗滌3次，棄去液體并控干。(4)每孔加100 μl四甲基聯(lián)苯胺底物溶液(SUBS TMB)，室溫孵育10 min。(5)每孔加100 μl固化終止液(SOLN STOP)終止反應(yīng)，并于30 min內(nèi)在酶標(biāo)儀上450 nm檢測。PAPP-A檢測采用ELISA法，步驟參考o(jì)x-LDL法。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS20.0軟件行t檢驗。

2　結(jié)　果

2.1實驗組與對照組血清ox-LDL及PAPP-A水平比較實驗組發(fā)病24 h內(nèi)，治療后第7、14天血清ox-LDL及PAPP-A水平顯著高于對照組(P<0.05)。實驗組治療后第7、14天血清ox-LDL及PAPP-A水平顯著低于發(fā)病24 h內(nèi)(P<0.05)。見表1。

2.2頸動脈粥樣硬化、不同性質(zhì)頸動脈斑塊與血清ox-LDL及PAPP-A水平的關(guān)系頸動脈硬化組血清ox-LDL〔(574.3±102.5)mg/ml〕及PAPP-A水平〔(8.6±3.2)μU/ml〕顯著高于IMT增厚組〔(451.6±86.3)mg/ml、(6.2±2.4)μU/ml〕，IMT增厚組血清ox-LDL及PAPP-A水平顯著高于IMT正常組〔(372.5±80.1)mg/ml、(4.3±1.5)μU/ml,P<0.05〕。易損斑塊組的血清ox-LDL及PAPP-A水平分別為(613.5±106.2)mg/ml與(9.8±3.1)μU/ml，顯著高于穩(wěn)定斑塊組的(506.2±96.3)mg/ml與(6.5±2.4)μU/ml(t=10.783，2.353，P<0.05)。

表1　兩組血清ox-LDL及PAPP-A水平

與對照組相比：1)P<0.05；與發(fā)病24 h內(nèi)相比：2)P<0.05

3　討　論

氧化應(yīng)激、炎癥反正在動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用，氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)共同促進(jìn)了動脈粥樣硬化不穩(wěn)定斑塊的形成〔8〕。Ox-LDL與PAPP-A是與動脈粥樣硬化密切相關(guān)的兩種指標(biāo)。在多種危險因子的共同作用下，血管壁受損，血管內(nèi)皮通透性增強(qiáng)，釋放大量氧自由基形成氧化應(yīng)激，使循環(huán)中LDL向內(nèi)皮下聚集，被氧化修飾成ox-LDL，從而導(dǎo)致脂紋出現(xiàn)，凝集素樣ox-LDL受體介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞激活，介導(dǎo)單核細(xì)胞募集、激活、向內(nèi)皮遷移等改變。臨床研究證實〔9〕，ox-LDL可激活血小板，刺激多種細(xì)胞產(chǎn)生氧自由基，加速動脈粥樣硬化過程。還可促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，介導(dǎo)斑塊細(xì)胞外基質(zhì)中蛋白成分及靶細(xì)胞基膜降解，加速斑塊破裂。且循環(huán)中ox-LDL濃度與斑塊局部ox-LDL濃度也可對冠狀動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性造成影響。

本組研究中，血清ox-LDL水平在急性腦缺血患者中顯著高于正常人群，且治療后血清ox-LDL水平逐漸恢復(fù)至正常水平，提示血清ox-LDL水平可用于判斷是否發(fā)生急性腦缺血及判斷急性腦缺血預(yù)后。而血清ox-LDL水平與急性腦缺血相關(guān)性需加大樣本量，通過相關(guān)性分析獲得，在本次研究中尚未涉及。進(jìn)一步觀察提示循環(huán)中ox-LDL水平與腦動脈粥樣硬化進(jìn)展、斑塊破裂有關(guān)，可反應(yīng)局部病變嚴(yán)重程度。

近年來的研究顯示，在不穩(wěn)定斑塊內(nèi)，PAPP-A表達(dá)顯著增加，血清中PAPP-A水平可反應(yīng)局部炎癥程度?？赏ㄟ^以下途徑導(dǎo)致動脈粥樣硬化形成及斑塊破裂：(1)特異性降解IGF結(jié)合蛋白4、5，釋放IGF，激活胰島素樣生長因子(IGF)受體及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，使斑塊去穩(wěn)定化。(2)降解細(xì)胞外基質(zhì)，使斑塊去穩(wěn)定化。(3)介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，使斑塊去穩(wěn)定化〔10〕。本組研究中，急性缺血性腦血管病患者血清PAPP-A水平較正常人群顯著升高，治療后逐漸恢復(fù)至正常水平。提示血清PAPP-A可用于判斷是否發(fā)生急性缺血性腦血管病及判斷急性缺血性腦血管病預(yù)后。

綜上，ox-LDL與PAPP-A與急性缺血性腦血管病及動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，可反映急性缺血性腦血管病患者動脈粥樣硬化程度，通過檢測血清ox-LDL及PAPP-A水平，可提示急性缺血性腦血管病早期發(fā)生，判斷預(yù)后，值得推廣。

1郝洪軍，金海強(qiáng)，劉冉，等.急性缺血性腦血管病患者TXB2、6-keto-PGF1α、oxLDL和Lp(α)水平分析〔J〕.臨床檢驗雜志，2015；33(1)：29-32.

2生曉娜，楊揚(yáng)，張曉煒，等.急性缺血性腦血管病患者血清ox-LDL及PAPP-A水平與頸動脈粥樣硬化的相關(guān)性研究〔J〕.中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2015；32(5)：402-5.

3Sun Y，Chen D，Cao L，etal.MiR-490-3p modulates the proliferation of vascular smooth muscle cells induced by ox-LDL through targeting PAPP-A〔J〕.Cardiovasc Res，2013；100(2)：272-9.

4宋愛霞，紀(jì)蓉，邱波，等.急性腦梗死患者血清OX-LDL水平與頸動脈超聲用于動脈粥樣硬化性腦梗死監(jiān)測意義分析〔J〕.湖南師范大學(xué)學(xué)報醫(yī)學(xué)版，2015；12(2)：101-3.

5Hjortebjerg R，Lindberg S，Hoffmann S，etal.PAPP-A and IGFBP-4 fragment levels in patients with ST-elevation myocardial infarction treated with heparin and PCI〔J〕.Clin Biochem，2015；48(4-5)：322-8.

6張紅巖，盧玉娟，戎秀格.2型糖尿病合并冠心病患者血脂及氧化型低密度脂蛋白抗體測定的意義〔J〕.貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2013；35(6)：177-9.

7Mikkelsen JH，Steffensen LB,Oxvig C.Development of a recombinant antibody towards PAPP-A for immunohistochemical use in multiple animal species〔J〕.J Immunol Methods，2014；404(6)：33-40.

8文波，張彥燕，徐旖旎，等.卡維地洛對ox-LDL誘導(dǎo)的人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用〔J〕.貴陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2015；40(8)：789-92.

9朱潤秀，袁軍，李攀，等.急性腦梗死患者神經(jīng)功能缺損程度與ox-LDL、hs-CRP、Hcy、IMT的相關(guān)性研究〔J〕.北京醫(yī)學(xué)，2015；37(5)：441-4.

10李方江，王曉元，張文婷，等.冠心病血清hs-CRP、ox-LDL及Hcy水平的研究〔J〕.心腦血管病防治，2015;15(1)：4-5.

〔2015-12-30修回〕

(編輯袁左鳴)

紀(jì)勇(1962-)，男，博士，主任醫(yī)師，主要從事腦血管疾病、癡呆與認(rèn)知障礙研究。

管雅琳(1982-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事腦血管病方面的研究。

R743

A

1005-9202(2016)18-4482-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.18.038