王衛(wèi)娜

（南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 河南南陽 473000）

三七總皂甙對糖尿病早期大鼠腎臟轉(zhuǎn)化生長因子β1及ET的影響

王衛(wèi)娜

（南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 河南南陽 473000）

目的：探討三七總皂苷對糖尿病大鼠腎組織形態(tài)學(xué)及相關(guān)因子的影響。方法：將SD雄性大鼠隨機分為：對照組、糖尿病模型組、三七總皂甙治療組。三七總皂甙治療組分別給與低、中、高劑量灌胃，對照組、和模型組灌等體積的生理鹽水，利用放免法測定血NO、TGF-β1、ET含量。結(jié)果：結(jié)論：能夠一定程度的改善DN模型大鼠腎臟病理變化，抑制腎臟TGF-β表達(dá)和舒張血管是其部分作用機制。

糖尿病腎病 腎臟 三七總皂甙

糖尿病腎?。―iabeticn ephropathy, DN）已經(jīng)成為導(dǎo)致慢性腎功能衰竭的最常見原因之一,發(fā)病機制可能與腎臟組織細(xì)胞中的自由基或氧化應(yīng)激水平異常相關(guān)［1］,目前對糖尿病腎病的治療仍然缺乏有效的手段,因此探討糖尿病腎病的治療,提高患者的生存質(zhì)量,延長壽命,意義重大。三七總皂苷是三七的主要活性成分,有化瘀止血、活血定痛、補虛強壯的功效。本實驗擬通過觀察三七總皂苷對糖尿病大鼠腎臟TGF-β1、ET的表達(dá),以探討三七總皂苷防治DN的可能作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選擇3月齡SD大鼠,清潔級,雄性,35只,體重150-200g,鄭州大學(xué)實驗動物中心提供。大鼠飼養(yǎng)于清潔級動物室,室溫21-25℃。

1.2 試劑

鏈脲佐菌素（STZ）美國Sigma公司；血栓通膠囊,龍江珍寶島制藥有限公司產(chǎn)品,規(guī)格：每粒含三七總皂苷100mg；尿蛋白測定試劑盒、血糖測定試劑盒購至南京建成生物工程公司。

2.1 分組、模型制作與給藥方法

按數(shù)字隨機表法,將大鼠分為正常組、模型組、三七總皂甙治療組。以傳統(tǒng)方法制備糖尿病大鼠模型,三七總皂甙治療組以三七總皂甙100 mg/kg/d腹腔注射；正常組、模型組給予等量生理鹽水。

1.3 觀察指標(biāo)及測定

大鼠取血檢測血尿指標(biāo)： 用氧化酶法測定血糖（BS）；血尿肌酐采用自動生化儀測定,取腎測定腎臟指數(shù),腎臟組織經(jīng)多聚甲醛固定,以HE染色,經(jīng)腎小球圖像統(tǒng)計軟件分析腎小球系膜基質(zhì)（ECM）增生程度。酶聯(lián)免疫法測定TGF-β1；放免法測定一氧化氮（NO）、內(nèi)皮素（ET）的含量血尿肌酐采用自動生化儀測定

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS18.0軟件進行統(tǒng)計分析,計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示,多組間比較采用方差分析,兩兩組間比較采用LSD-t檢驗。

表1 三七總皂苷對糖尿病模型組大鼠ET水平、NOS活性等的影響

表2 三七總皂苷對DN大鼠TGF-β及尿量的影響

圖1 各組大鼠腎小球病例形態(tài)學(xué)變化（蘇木精-伊紅染色，×400）

2 結(jié)果

2.1 三七總皂苷治療對實驗大鼠腎臟形態(tài)學(xué)的影響

如圖所示,光鏡下,正常組大鼠腎臟基底膜無明顯增厚,系膜細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞無增多,糖尿病大鼠系膜區(qū)基質(zhì)增生明顯,腎小球體積增大成分葉狀,腎小球系膜基質(zhì)與腎小球面積的比值增高。三七總皂苷治療后腎小球體積減小,病理改變減輕。

2.三七總皂苷對糖尿病模型組大鼠和NO水平、NOS活性的影響

與正常組比較,糖尿病模型組大鼠NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數(shù)顯著增大（P＜0.05）,ET水平顯著降低（P＜0.05）；與模型組比較,治療組NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數(shù)顯著降低（P＜0.05）,ET水平顯著增大（P＜0.05）見表1。（±s）

2.2 三七總皂苷治療對實驗大鼠尿量及血清TGF-β 1的影響

與正常組比較,糖尿病模型組大鼠NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數(shù)顯著增大（P＜0.05）,ET水平顯著降低（P＜0.05）；與模型組比較,治療組NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數(shù)顯著降低（P＜0.05）,ET水平顯著增大（P＜0.05）見表1。（±s）

討論

糖尿病腎病作為糖尿病的嚴(yán)重微血管并發(fā)癥之一,早期的腎臟損害主要表現(xiàn)為腎臟肥大,既往許多研究已揭示高糖、TGF-β等與糖尿病腎臟肥大形成可能有關(guān)［1］。腎小球高濾過和高功能是糖尿病早期的病理生理狀態(tài)［2］,作為作用最強的血管舒張與收縮因子,NO和ET是今年被發(fā)現(xiàn),隨著糖尿病進展糖基化終末產(chǎn)物、氧自由基及多元醇通路的代謝產(chǎn)物增加,NOS的合成增加活性升高,NO產(chǎn)生增多［3］。NO影響腎臟濾過效率及腎皮質(zhì)血流量,是具有舒血管作用的活性因子。糖尿病時NO增多,促進炎癥產(chǎn)生與發(fā)展、對腎細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用［4］?？梢?NO作為血管活性物質(zhì)參與了腎小球高灌注高濾過的發(fā)生發(fā)展和腎細(xì)胞的損傷。

研究表明,三七總皂苷可以抑制TGF-β的表達(dá),減輕DN大鼠的腎臟肥大指數(shù),在一定程度上改善DN模型大鼠腎臟病理變化,具有保護腎臟的作用。

［1］錢軍；黃平絞股藍(lán)皂甙對早期糖尿病腎病大鼠腎臟TGF-β1蛋白含量影響的研究［期刊論文］-中國中醫(yī)藥科技2007（04）

［2］Elmarakby A A，Sullivan J C.Relationship between oxidative stress and inflammatory cytokines in diabetic nephropathy.［J］Cardiovascular Ther，2012，30（1）：49.

［3］ 賈育新，楊中高.醒胰降糖靈對試驗性糖尿病大鼠NO與ET-1的影響［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2010，16（9）：166.

［4］ 張翊玲，張旭華.被動吸煙對大鼠肺組織、肺泡灌洗液、血清中NO及NOS的影響［J］.廣東醫(yī)學(xué)，201l，32（3）：296.

R587

A

1674-2060（2016）03-0006-01

南陽市科技局科技攻關(guān)項目 2012GG069，2014GG040。南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校自然科學(xué)項目 12NYYZ2004。