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        三七總皂甙對糖尿病早期大鼠腎臟轉(zhuǎn)化生長因子β1及ET的影響

        2016-10-27 09:13:25王衛(wèi)娜
        生物技術(shù)世界 2016年3期
        關(guān)鍵詞:總皂苷皂苷腎小球

        王衛(wèi)娜

        (南陽醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校 河南南陽 473000)

        三七總皂甙對糖尿病早期大鼠腎臟轉(zhuǎn)化生長因子β1及ET的影響

        王衛(wèi)娜

        (南陽醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校 河南南陽 473000)

        目的:探討三七總皂苷對糖尿病大鼠腎組織形態(tài)學(xué)及相關(guān)因子的影響。方法:將SD雄性大鼠隨機(jī)分為:對照組、糖尿病模型組、三七總皂甙治療組。三七總皂甙治療組分別給與低、中、高劑量灌胃,對照組、和模型組灌等體積的生理鹽水,利用放免法測定血NO、TGF-β1、ET含量。結(jié)果:結(jié)論:能夠一定程度的改善DN模型大鼠腎臟病理變化,抑制腎臟TGF-β表達(dá)和舒張血管是其部分作用機(jī)制。

        糖尿病腎病 腎臟 三七總皂甙

        糖尿病腎?。―iabeticn ephropathy, DN)已經(jīng)成為導(dǎo)致慢性腎功能衰竭的最常見原因之一,發(fā)病機(jī)制可能與腎臟組織細(xì)胞中的自由基或氧化應(yīng)激水平異常相關(guān)[1],目前對糖尿病腎病的治療仍然缺乏有效的手段,因此探討糖尿病腎病的治療,提高患者的生存質(zhì)量,延長壽命,意義重大。三七總皂苷是三七的主要活性成分,有化瘀止血、活血定痛、補(bǔ)虛強(qiáng)壯的功效。本實(shí)驗(yàn)擬通過觀察三七總皂苷對糖尿病大鼠腎臟TGF-β1、ET的表達(dá),以探討三七總皂苷防治DN的可能作用機(jī)制。

        1 材料與方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

        選擇3月齡SD大鼠,清潔級,雄性,35只,體重150-200g,鄭州大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。大鼠飼養(yǎng)于清潔級動(dòng)物室,室溫21-25℃。

        1.2 試劑

        鏈脲佐菌素(STZ)美國Sigma公司;血栓通膠囊,龍江珍寶島制藥有限公司產(chǎn)品,規(guī)格:每粒含三七總皂苷100mg;尿蛋白測定試劑盒、血糖測定試劑盒購至南京建成生物工程公司。

        2.1 分組、模型制作與給藥方法

        按數(shù)字隨機(jī)表法,將大鼠分為正常組、模型組、三七總皂甙治療組。以傳統(tǒng)方法制備糖尿病大鼠模型,三七總皂甙治療組以三七總皂甙100 mg/kg/d腹腔注射;正常組、模型組給予等量生理鹽水。

        1.3 觀察指標(biāo)及測定

        大鼠取血檢測血尿指標(biāo): 用氧化酶法測定血糖(BS);血尿肌酐采用自動(dòng)生化儀測定,取腎測定腎臟指數(shù),腎臟組織經(jīng)多聚甲醛固定,以HE染色,經(jīng)腎小球圖像統(tǒng)計(jì)軟件分析腎小球系膜基質(zhì)(ECM)增生程度。酶聯(lián)免疫法測定TGF-β1;放免法測定一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素(ET)的含量血尿肌酐采用自動(dòng)生化儀測定

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

        采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,多組間比較采用方差分析,兩兩組間比較采用LSD-t檢驗(yàn)。

        表1 三七總皂苷對糖尿病模型組大鼠ET水平、NOS活性等的影響

        表2 三七總皂苷對DN大鼠TGF-β及尿量的影響

        圖1 各組大鼠腎小球病例形態(tài)學(xué)變化(蘇木精-伊紅染色,×400)

        2 結(jié)果

        2.1 三七總皂苷治療對實(shí)驗(yàn)大鼠腎臟形態(tài)學(xué)的影響

        如圖所示,光鏡下,正常組大鼠腎臟基底膜無明顯增厚,系膜細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞無增多,糖尿病大鼠系膜區(qū)基質(zhì)增生明顯,腎小球體積增大成分葉狀,腎小球系膜基質(zhì)與腎小球面積的比值增高。三七總皂苷治療后腎小球體積減小,病理改變減輕。

        2.三七總皂苷對糖尿病模型組大鼠和NO水平、NOS活性的影響

        與正常組比較,糖尿病模型組大鼠NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數(shù)顯著增大(P<0.05),ET水平顯著降低(P<0.05);與模型組比較,治療組NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數(shù)顯著降低(P<0.05),ET水平顯著增大(P<0.05)見表1。(±s)

        2.2 三七總皂苷治療對實(shí)驗(yàn)大鼠尿量及血清TGF-β 1的影響

        與正常組比較,糖尿病模型組大鼠NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數(shù)顯著增大(P<0.05),ET水平顯著降低(P<0.05);與模型組比較,治療組NO水平、NOS活性、腎臟肥大指數(shù)顯著降低(P<0.05),ET水平顯著增大(P<0.05)見表1。(±s)

        討論

        糖尿病腎病作為糖尿病的嚴(yán)重微血管并發(fā)癥之一,早期的腎臟損害主要表現(xiàn)為腎臟肥大,既往許多研究已揭示高糖、TGF-β等與糖尿病腎臟肥大形成可能有關(guān)[1]。腎小球高濾過和高功能是糖尿病早期的病理生理狀態(tài)[2],作為作用最強(qiáng)的血管舒張與收縮因子,NO和ET是今年被發(fā)現(xiàn),隨著糖尿病進(jìn)展糖基化終末產(chǎn)物、氧自由基及多元醇通路的代謝產(chǎn)物增加,NOS的合成增加活性升高,NO產(chǎn)生增多[3]。NO影響腎臟濾過效率及腎皮質(zhì)血流量,是具有舒血管作用的活性因子。糖尿病時(shí)NO增多,促進(jìn)炎癥產(chǎn)生與發(fā)展、對腎細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用[4]??梢?NO作為血管活性物質(zhì)參與了腎小球高灌注高濾過的發(fā)生發(fā)展和腎細(xì)胞的損傷。

        研究表明,三七總皂苷可以抑制TGF-β的表達(dá),減輕DN大鼠的腎臟肥大指數(shù),在一定程度上改善DN模型大鼠腎臟病理變化,具有保護(hù)腎臟的作用。

        [1]錢軍;黃平絞股藍(lán)皂甙對早期糖尿病腎病大鼠腎臟TGF-β1蛋白含量影響的研究[期刊論文]-中國中醫(yī)藥科技2007(04)

        [2]Elmarakby A A,Sullivan J C.Relationship between oxidative stress and inflammatory cytokines in diabetic nephropathy.[J]Cardiovascular Ther,2012,30(1):49.

        [3] 賈育新,楊中高.醒胰降糖靈對試驗(yàn)性糖尿病大鼠NO與ET-1的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2010,16(9):166.

        [4] 張翊玲,張旭華.被動(dòng)吸煙對大鼠肺組織、肺泡灌洗液、血清中NO及NOS的影響[J].廣東醫(yī)學(xué),201l,32(3):296.

        R587

        A

        1674-2060(2016)03-0006-01

        南陽市科技局科技攻關(guān)項(xiàng)目 2012GG069,2014GG040。南陽醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校自然科學(xué)項(xiàng)目 12NYYZ2004。

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