田晴晴, 羅 樂(lè), 張夏麗, 陳 敏, 李 潔, 高雪梅, 張明升, 張軒萍△
(1山西醫(yī)科大學(xué)藥理教研室, 2山西職工醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室,山西 太原 030001)
?
白楊素對(duì)大鼠主動(dòng)脈舒張作用的影響*
田晴晴1,羅樂(lè)1,張夏麗1,陳敏1,李潔1,高雪梅2,張明升1,張軒萍1△
(1山西醫(yī)科大學(xué)藥理教研室,2山西職工醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室,山西 太原 030001)
目的: 研究白楊素(chrysin)對(duì)離體大鼠主動(dòng)脈肌源性反應(yīng)的影響,并探討其作用機(jī)制。方法:分離SD大鼠主動(dòng)脈,采用離體血管環(huán)灌流裝置觀察chrysin對(duì)血管環(huán)的基礎(chǔ)張力及對(duì)60 mmol/L KCl預(yù)收縮血管的舒張作用,并結(jié)合不同抑制劑處理,探討其作用于血管環(huán)的可能機(jī)制。結(jié)果:Chrysin(10-6mol/L、3×10-6mol/L、10-5mol/L、3×10-5mol/L 和10-4mol/L)對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)血管無(wú)明顯影響,但對(duì)60 mmol/L KCl預(yù)收縮的血管環(huán)具有濃度依賴性舒張作用,并且去內(nèi)皮組舒張作用弱于內(nèi)皮完整組(P<0.05)。NOS抑制劑L-NAME(10-4mol/L)處理血管后,chrysin的舒張血管作用部分被抑制(P<0.05),COX抑制劑吲哚美辛(10-5mol/L)處理血管后無(wú)明顯抑制作用。鉀通道阻滯劑4-氨基吡啶(10-3mol/L)、氯化鋇(10-4mol/L)、格列苯脲(10-5mol/L)和四乙胺(10-3mol/L)預(yù)孵后,chrysin舒張血管作用均被部分抑制(P<0.05)。Chrysin(10-6mol/L、10-5mol/L和10-4mol/L)可濃度依賴性抑制2.5 mmol/L CaCl2引起的主動(dòng)脈收縮。結(jié)論:Chrysin能夠濃度依賴性舒張大鼠主動(dòng)脈,其作用機(jī)制可能與促進(jìn)一氧化氮釋放、激活4種K+通道及減少細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度有關(guān)。
白楊素; 主動(dòng)脈環(huán); 一氧化氮合酶; 環(huán)氧合酶; 鉀通道; 鈣
白楊素(chrysin)是從紫葳科植物木蝴蝶中提取的一種天然食源性黃酮,廣泛存在于多種植物、蜂蜜和蜂膠中[1-3]。Chrysin具有廣泛的藥理學(xué)作用,包括抗病毒[4]、抗高血糖[5]、抗高血壓[6]、抗腫瘤[7]、抗糖尿病腎病[8]等,是合成抗癌、抗菌、防治心腦血管疾病、降血脂、消炎等藥物的原料。血管疾病是目前影響人類健康的主要疾病之一,導(dǎo)致血管產(chǎn)生疾病的原因多樣,其中大部分是由于病變使管腔狹窄,繼而發(fā)生受供器官或肢體的缺血以至壞死。大量臨床資料表明,chrysin對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓等血管疾病有治療作用[5-6, 9],但其具體作用機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn)利用離體器官恒溫灌流系統(tǒng),觀察chrysin對(duì)大鼠離體主動(dòng)脈環(huán)靜息張力及對(duì)氯化鉀(KCl,60 mmol/L)預(yù)收縮血管的舒張作用,同時(shí),通過(guò)研究chrysin對(duì)去內(nèi)皮、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制劑、環(huán)氧合酶(cyclooxygenase,COX)抑制劑、鉀離子通道抑制劑等引起的血管收縮作用的影響,進(jìn)一步探討其舒張血管作用的可能機(jī)制,為chrysin的臨床應(yīng)用及進(jìn)一步研究、利用及開(kāi)發(fā)新藥提供理論依據(jù)。
1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
Sprague-Dawley成年雄性大鼠,體重200~240 g,由山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,許可證號(hào)為SCXK(晉)2009-0001。動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境溫度為22~23 ℃,濕度50%~55%,自由攝食飲水。
2主要試劑
乙酰膽堿(acetylcholine,ACh)、苯腎上腺素(phenylephrine,PE)、氯化鋇(BaCl2)、四乙胺(tetraethylammonium,TEA)、4-氨基吡啶(4-aminopyridine, 4-AP)、格列本脲(glibenclamide,Gli)、左旋硝基精氨酸甲酯(L-nitroarginiemethylester,L-NAME)、吲哚美辛(indometacin,Indo)、二甲基亞砜(dimethyl sulpho-xide,DMSO)和HEPES均購(gòu)自Sigma;白楊素購(gòu)自大連美侖生物;其余試劑均為分析純,購(gòu)自武漢博士德公司。
3實(shí)驗(yàn)儀器
PowerLab 生物信號(hào)采集分析系統(tǒng)、DMT張力記錄儀(澳大利亞埃德公司); HSS-1B 數(shù)字式超級(jí)恒溫泵(成都儀器廠);微量加樣器(上海求精生化試劑儀器有限公司);精密天平(北京賽多利斯儀器有限公司); PHS-3C 精密pH 計(jì)(上海雷磁);SartoriusBS124S 精密天平(北京賽多利斯)。
4主要方法
4.1血管環(huán)的制備大鼠斷頭處死后,立刻取其主動(dòng)脈,置于4 ℃ 100% O2飽和的PSS液中,PSS液具體成分為:NaCl 144 mmol/L,KCl 5.8 mmol/L,CaCl22.5 mmol/L,MgCl24.2 mmol/L,Glucose 11.1 mmol/L,HEPES 5 mmol/L,pH 7.4。去除離體主動(dòng)脈周?chē)Y(jié)締組織及脂肪后,剪成長(zhǎng)度3 mm~4 mm 的血管環(huán)。主動(dòng)脈環(huán)隨機(jī)分為去內(nèi)皮組和內(nèi)皮完整組,去內(nèi)皮組采用與血管內(nèi)徑相適的棉棒去除其內(nèi)壁的內(nèi)皮細(xì)胞,內(nèi)皮完整組不做處理。將制備好的主動(dòng)脈環(huán)用2根不銹鋼微型掛鉤貫穿血管管腔,將離體主動(dòng)脈水平懸掛在10 mL 浴漕內(nèi),下方固定,上方以一細(xì)鋼絲連于張力換能器。Powerlab 生物信號(hào)測(cè)定系統(tǒng)記錄血管張力變化。浴管內(nèi)持續(xù)通以100% O2、37 ℃的PSS液5 mL。調(diào)整基礎(chǔ)張力至2 g,平衡1 h,每15 min 換1次PSS溶液。
4.2血管內(nèi)皮功能檢測(cè)所有血管環(huán)用60 mmol/L KCl 進(jìn)行刺激,待其穩(wěn)定后, 即連續(xù)2次刺激所引起的收縮幅度差別小于5%,用PE(10-6mol/L)預(yù)收縮,收縮平穩(wěn)后加入10-5mol/L 的Ach,舒張幅度不超過(guò)收縮幅度的5%時(shí),認(rèn)為內(nèi)皮去除完全[10]。
4.3Chrysin對(duì)大鼠主動(dòng)脈環(huán)基礎(chǔ)張力的影響待血管環(huán)穩(wěn)定后,按照濃度累加法加入chrysin(10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L、10-4mol/L和10-3mol/L) 或等量的PSS液,觀察不同濃度的chrysin對(duì)大鼠主動(dòng)脈血管環(huán)基礎(chǔ)張力的影響。
4.4Chrysin對(duì)KCl 預(yù)收縮的內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組血管環(huán)的影響血管環(huán)穩(wěn)定后,內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組加入60 mmol/L KCl,收縮達(dá)坪值后,分別累積加入chrysin (10-6mol/L、3×10-6mol/L、10-5mol/L、3×10-5mol/L和10-4mol/L),對(duì)照組加入相同劑量的PSS液。以60 mmol/L KCl 誘發(fā)的主動(dòng)脈環(huán)最大收縮幅度作為100%,計(jì)算在加入不同濃度chrysin后舒張百分比變化,建立濃度效應(yīng)曲線。
4.5L-NAME 和Indo 對(duì)chrysin舒張作用的影響用L-NAME(10-4mol/L)或Indo(10-5mol/L) 孵育內(nèi)皮完整的血管環(huán)30 min,以KCl 預(yù)收縮,觀察chrysin(10-6mol/L、3×10-6mol/L、10-5mol/L、3×10-5mol/L 和10-4mol/L)對(duì)血管的舒張作用,對(duì)照組加入相同劑量PSS 液。以高鉀誘發(fā)的最大收縮幅度為100%,建立濃度效應(yīng)曲線。
4.6鉀通道阻斷劑對(duì)chrysin舒張作用的影響用4-AP(10-3mol/L)、BaCl2(10-4mol/L)、Gli(10-5mol/L)或TEA(10-3mol/L)孵育內(nèi)皮完整的血管環(huán)30 min,高鉀預(yù)收縮,觀察chrysin對(duì)血管環(huán)的舒張作用,對(duì)照組加入相同劑量PSS液。以高鉀誘發(fā)的最大收縮幅度為100%,建立濃度效應(yīng)曲線。
4.7Chrysin對(duì)外鈣內(nèi)流引起主動(dòng)脈收縮的影響血管環(huán)穩(wěn)定后,用含 EGTA 的無(wú)鈣 PSS液洗脫血管環(huán)。20 min 后,當(dāng)血管環(huán)張力回到基線時(shí),將浴液更換為不含 EGTA 的無(wú)鈣PSS 液。10 min 后,將浴液換為無(wú)鈣的60 mol/L KCl,孵育 10 min,向浴槽內(nèi)加入 2.5 mmol/L CaCl2,待血管環(huán)收縮達(dá)穩(wěn)定的坪臺(tái)時(shí),仍然用含 EGTA的無(wú)鈣PSS液去洗脫。20 min后,當(dāng)血管環(huán)張力再次回到基線時(shí),將浴液更換為不含 EGTA 的無(wú)鈣 PSS 液。10 min 后,向浴槽內(nèi)分別加入chrysin(10-6mol/L、10-5mol/L和10-4mol/L, chrysin一直存在于浴槽內(nèi)),孵育 15 min,然后將浴液換為無(wú)鈣的60 mmol/L KCl,孵育10 min,再次向浴槽內(nèi)加入 2.5 mmol/L CaCl2。以孵育chrysin前含鈣液中60 mmol/L KCl的收縮幅度為100%。
5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。采用GraphPad Prism 6 作圖,采用SPSS 20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,兩樣本之間比較采用t檢驗(yàn),多組間比較釆用one-way ANOVA及SNK法進(jìn)行顯著性檢驗(yàn),以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過(guò)非線性回歸計(jì)算IC50值(抑制50%最大收縮時(shí)所需要的藥物濃度)或RC50值(產(chǎn)生50%舒張時(shí)所需要的藥物濃度)。
1Chrysin對(duì)大鼠主動(dòng)脈環(huán)基礎(chǔ)張力的影響
Chrysin (10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L、10-4mol/L和10-3mol/L)對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)血管張力無(wú)明顯影響,見(jiàn)圖1。
Figure 1.The effect of chrysin on basic tension of normal rat aortic rings. Mean±SD.n=6.
圖1白楊素對(duì)大鼠離體主動(dòng)脈環(huán)基礎(chǔ)張力的影響
2Chrysin對(duì)KCl預(yù)收縮的內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組主動(dòng)脈血管環(huán)的影響
Chrysin 對(duì)60 mmol/L KCl預(yù)收縮的血管環(huán)產(chǎn)生濃度依賴性的舒張作用,并且內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組chrysin (10-4mol/L)的最大舒張率分別是(99.69±3.78)%和(58.94±9.62)%,RC50值分別為6.38×10-6mol/L和1.64×10-5mol/L;空白對(duì)照組幾乎對(duì)血管環(huán)張力沒(méi)有影響。兩兩比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P<0.01),見(jiàn)圖2。
3L-NAME和Indo對(duì)chrysin舒張作用的影響
Indo(10-5mol/L)組中,chrysin(10-4mol/L)最大舒張率是(94.10±10.18)%,RC50值為8.35×10-6mol/L,與對(duì)照組相比對(duì)chrysin的舒張作用無(wú)明顯影響;而L-NAME(10-4mol/L)組中,chrysin(10-4mol/L)最大舒張率是(63.04±8.67)%,RC50值為4.81×10-5mol/L,與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性(P<0.05),見(jiàn)圖3。
Figure 2.Chrysin-induced vasorelaxation in endothelium-intact (End+) or -denuded (End-) rat aorta rings precontracted with KCl. Relaxations were expressed as percentages of the maximal tension induced by 60 mmol/L of KCl. Mean±SD.n=6.**P<0.01vsEnd++ vehicle group;△△P<0.01vsEnd-+ vehicle vehicle group;##P<0.01vsEnd++chrysin group.
圖2白楊素對(duì)KCl預(yù)收縮的內(nèi)皮完整組和去內(nèi)皮組主動(dòng)脈血管環(huán)的影響
Figure 3.The effects of nitric oxide synthase inhibitor NG-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME, 10-4mol/L) and cyclooxygenase inhibitor indomethacin (Indo, 10-5mol/L) on the relaxation induced by chrysin in isolated thoracic aorta rings precontracted with KCl at 60 mmol/L. Mean±SD.n=6.**P<0.01vschrysin group.
圖3L-NAME和Indo對(duì)白楊素舒張大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)作用的影響
4鉀通道阻斷劑對(duì)chrysin舒張作用的影響
BaCl2(10-4mol/L)、TEA(10-3mol/L)、4-AP(10-3mol/L)和Gli(10-5mol/L)分別可以特異性阻斷KIR通道、KCa通道、KV通道及KATP通道。在鉀通道阻斷劑的基礎(chǔ)上,chrysin的最大舒張率分別為71.06%±8.95%、66.21%±14.65%、49.41%±5.69%和53.40%±8.99%;RC50值分別為3.16×10-5mol/L、4.43×10-5mol/L、9.72×10-5mol/L和4.43×10-5mol/L。結(jié)果表明BaCl2、TEA、Gli 和4-AP 均能抑制chrysin的舒張血管作用(P<0.05),見(jiàn)圖4。
Figure 4.The effects of BaCl2(10-4mol/L), TEA (10-3mol/L), Gli (10-5mol/L) and 4-AP (10-3mol/L) on chrysin-induced vasorelaxation in isolated rat thoracic aortic rings precontracted with KCl at 60 mmol/L. Mean±SD.n=6.**P<0.01vschrysin group.
圖4鉀通道阻斷劑對(duì)白楊素舒張大鼠離體主動(dòng)脈血管環(huán)作用的影響
5Chrysin對(duì)外鈣內(nèi)流引起主動(dòng)脈收縮的影響
在無(wú)鈣液中,60 mmol/L KCl 幾乎不引起主動(dòng)脈發(fā)生收縮,加入 2.5 mmol/L CaCl2后,血管發(fā)生收縮,且其收縮幅度與之前正常 PSS液中 60 mmol/L KCl引起的收縮幅度基本相當(dāng)。提前孵育chrysin(10-6mol/L、10-5mol/L和10-4mol/L)可濃度依賴性地抑制 2.5 mmol/L CaCl2引起的血管收縮,其IC50值為 4.84×10-5mol/L,見(jiàn)圖5。
Figure 5.The effects of chrysin on KCl (60 mmol/L)-induced contraction of isolated rat thoracic aorta rings with 2.5 mmol/L CaCl2. The vessels were incubated with chrysin at 10-6mol/L, 10-5mol/L and 10-4mol/L, and the vehicle for 15 min before addition of KCl. Mean±SD.n=6.**P<0.01vscontrol group.
圖5白楊素對(duì)外鈣內(nèi)流引起主動(dòng)脈收縮的影響
血管疾病主要包括心血管疾病、腦血管疾病和周?chē)芗膊?具有發(fā)病率高、致死率高和致殘率高的特點(diǎn),危害極大。資料表明,chrysin是一種黃酮類化合物,具有抗氧化、抗焦慮、抗炎癥、抗腫瘤、化療增敏等多種藥理作用[9, 11-13],而其抗氧化以及抗炎作用被認(rèn)為對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病等引起的心血管病變具有抑制作用,但其對(duì)血管的具體作用機(jī)制尚不明確。
課題組已經(jīng)證明chrysin對(duì)大鼠離體腎動(dòng)脈具有舒張作用[14]。本實(shí)驗(yàn)旨在研究chrysin對(duì)大鼠主動(dòng)脈的作用及作用機(jī)制,結(jié)果顯示chrysin對(duì)SD大鼠主動(dòng)脈靜息張力無(wú)明顯影響,對(duì)KCl預(yù)收縮的內(nèi)皮完整血管環(huán)和去內(nèi)皮血管環(huán)均有顯著舒張作用,并且對(duì)內(nèi)皮完整血管環(huán)的舒張作用更明顯,呈劑量依賴性。因此,chrysin對(duì)血管的舒張作用可能由兩部分組成,部分作用于血管內(nèi)皮,部分直接作用于血管平滑肌。
血管內(nèi)皮可通過(guò)釋放血管舒張因子和血管收縮因子主動(dòng)調(diào)節(jié)血管張力。其中內(nèi)皮細(xì)胞釋放的NO 和前列環(huán)素是調(diào)節(jié)血壓的主要因子,在維持血管基礎(chǔ)張力的過(guò)程中發(fā)揮重要的作用[15]。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用非特異性一氧化氮合酶抑制劑L-NAME 作用于大鼠主動(dòng)脈環(huán)后,chrysin的血管舒張作用部分被阻斷,提示NO 參與chrysin的舒張血管作用。前列環(huán)素通過(guò)激活腺苷酸環(huán)化酶,進(jìn)而可以激活cAMP 依賴性的蛋白激酶A,從而介導(dǎo)其舒張血管等生理效應(yīng)。前列環(huán)素由花生四烯酸在血管內(nèi)皮細(xì)胞COX和前列環(huán)素合酶的作用下生成,其中,COX是花生四烯酸代謝過(guò)程中的重要限速酶之一。然而Indo 對(duì)chrysin的舒張作用無(wú)明顯影響,提示chrysin的舒張作用和前列環(huán)素?zé)o關(guān)。
Ca2+是導(dǎo)致血管平滑肌收縮的重要因子,通過(guò)細(xì)胞內(nèi)釋放和細(xì)胞外流入產(chǎn)生,Ca2+內(nèi)流途徑主要有受體調(diào)控的鈣通道和電壓依賴性鈣通道[16-17]。高鉀引起血管平滑肌收縮機(jī)制是由于細(xì)胞外高濃度K+引起細(xì)胞膜去極化,電壓依賴性鈣通道開(kāi)放,從而促使細(xì)胞外液中或與細(xì)胞膜疏松結(jié)合的Ca2+內(nèi)流,因此K+通道活性的改變可使血管平滑肌細(xì)胞膜電位超極化或去極化,是參與血管舒張和收縮調(diào)節(jié)的重要機(jī)制。
迄今為止,血管平滑肌上已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有4種類型的鉀通道,它們是電壓依賴性鉀通道(KV)、鈣激活的鉀通道(KCa)、ATP敏感性鉀通道(KATP)和內(nèi)向整流鉀通道(KIR)[18]。結(jié)果顯示,4-AP(10-3mol/L)、TEA(10-3mol/L)、BaCl2(10-4mol/L)和Gli(10-5mol/L)均可抑制chrysin的舒血管的作用,提示chrysin的舒血管作用可能與其開(kāi)放4種鉀通道有關(guān)。而孵育chrysin,可濃度依賴性地抑制 2.5 mmol/L CaCl2引起的血管收縮,提示chrysin舒張血管作用可能通過(guò)抑制電壓依賴性鈣通道的開(kāi)放,減少細(xì)胞外鈣內(nèi)流,使細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度下降而舒張血管。
[1]Jaganathan SK, Mandal M. Antiproliferative effects of honey and of its polyphenols: a review[J]. J Biomed Biotechnol, 2009, 40(10):1155-1167.
[2]Manzolli ES, Serpeloni JM, Grotto D, et al. Protective effects of the flavonoid chrysin against methylmercury-induced genotoxicity and alterations of antioxidant status,invivo[J]. Oxid Med Cell Longev, 2015, 2015:602360.
[3]Sun YM, Wu HI, Wang JY, et al. Simultaneous determination of eight flavonoids in propolis using chemometrics-assisted high performance liquid chromatography-diode array detection[J].J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci, 2014, 962:59-67.
[4]Suresh Babu K, Hari Babu T, Srinivas PV, et al. Synthesis and biological evaluation of novel C (7) modified chrysin analogues as antibacterial agents[J]. Bioorg Med Chem Lett, 2006, 16(1):221-224.
[5]El-Bassossy HM, Abo-Warda SM, Fahmy A. Chrysin and luteolin attenuate diabetes-induced impairment in endothelial-dependent relaxation: effect on lipid profile, AGEs and NO generation[J]. Phytother Res, 2013, 27(11):1678-1684.
[6]Li XW, Wang XM, Li S, et al. Effects of chrysin (5,7-dihydroxyflavone) on vascular remodeling in hypoxia-induced pulmonary hypertension in rats[J]. Chin Med, 2015, 10:4.
[7]Premratanachai P, Chanchao C. Review of the anticancer activities of bee products[J]. Asian Pac J Trop Biomed, 2014, 4(5):337-344.
[8]Ahad A, Ganai AA, Mujeeb M, et al.Chrysin, an anti-inflammatory molecule, abrogates renal dysfunction in type 2 diabetic rats[J]. Toxicol Appl Pharmacol, 2014, 279(1):1-7.
[9]Wang HK, Xia Y, Yang ZY, et al. Recent advances in the discovery and development of flavonoids and their analogues as antitumor and anti-HIV agents[J]. Adv Exp Med Biol, 1998, 439:191-225.
[10]Denniff M, Turrell H, Vanezis A, et al.The time-of-day variation in vascular smooth muscle contractility depends on a nitric oxide signalling pathway[J]. J Mol Cell Cardiol, 2014, 66:133-140.
[11]Oleary KA, Pascual-Teresa S, Needs PW, et al. Effect of flavonoids and vitamin E on cyclooxygenase-2 (COX-2) transcription[J]. Mutat Res, 2004, 551(2):245-254.
[12]Woodman O, Chan EC. Vascular and anti-oxidant actions of flavonols and flavones[J]. Clin Exp Pharmacol Physiol, 2004, 31(11):786-790.
[13]Gyemant N, Tanaka M, Antus S, et al.Invitrosearch for synergy between flavonoids and epirubicin on multidrug-resistant cancer cells[J]. In Vivo, 2005, 19(2):367-374.
[14]秦小江,侯曉敏,梁泰剛. 白楊素對(duì)大鼠離體腎動(dòng)脈的舒張作用[J]. 中國(guó)藥物與臨床, 2014, 14(8):1009-1011.
[15]Vita JA. Endothelial function[J]. Circulation, 2011, 124(25):e906-e912.
[16]Harraz OF, Altier C. STIM1-mediated bidirectional regulation of Ca2+entry through voltage-gated calcium channels (VGCC) and calcium-release activated channels (CRAC)[J]. Front Cell Neurosci, 2014, 8:43.
[17]Stutzmann G, Mattson MP. Endoplasmic reticulum Ca2+handling in excitable cells in health and disease[J]. Pharmacol Rev, 2011, 63(3):700-727.
[18]Silva MT, Ribeiro FP, Medeiros MA, et al. The vasorelaxant effect ofp-cymene in rat aorta involves potassium channels[J].Sci World J, 2015, 2015:458080.
(責(zé)任編輯: 陳妙玲, 羅森)
Effect of chrysin on relaxation of isolated rat aortic ring
TIAN Qing-qing1, LUO Le1, ZHANG Xia-li1, CHEN Min1, LI Jie1, GAO Xue-mei2, ZHANG Ming-sheng1, ZHANG Xuan-ping1
(1DepartmentofPharmacology,ShanxiMedicalUniversity,2DepartmentofPhysiology,ShanxiMedicalCollegeforConti-nuingEducation,Taiyuan030001,China.E-mail:yaolizxp@163.com)
AIM: To determine the effect of chrysin on the relaxation of isolated rat aortic rings and its mechanisms. METHODS: Onexvivoaortic ring perfusion device, the influence of chrysin on isolated aortic ring at basic condition or contraction of the aorta induced by KCl (60 mmol/L) was observed, and the effects of chrysin on the blood vessel reaction induced by various drugs were recorded. RESULTS: Chrysin (10-6mol/L, 3×10-6mol/L, 10-5mol/L, 3×10-5mol/L and 10-4mol/L) had no effect on isolated aortic ring at basic condition. Chrysin had stronger vasodilatation effect in intact group than that in non-intact group (P<0.05). Treatment of the arterial rings with eNOS inhibitor L-NAME, but not with indomethecin or endothelium denudation, obviously affected the relaxant effects of chrysin (P<0.05). When the contractions were induced by KCl, 4-aminopyridine (10-3mol/L), BaCl2(10-4mol/L), glibenclamide (10-5mol/L), and tetraethylammonium (10-3mol/L) weakened chrysin-induced diastolic effect (P<0.05). Chrysin significantly inhibited contracting effect of KCl on aorta rings in 2.5 mmol/L Ca2+medium (P<0.05). CONCLUSION: Chrysin exerts vasodilating effect on rat isolated aorta rings in a dose-dependent manner. The mechanism might be related to promoting NO release, activating K+channels and decreasing the concentration of cytoplasmic Ca2+.
Chrysin; Aorta rings; Nitric oxide synthase; Cyclooxygenase; Potassium channels; Calcium
1000- 4718(2016)04- 0618- 05
2015- 10- 20
2015- 12- 17
山西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No. 2011011034-3);山西省衛(wèi)生科研課題(No. 2015109)
Tel: 0351-4135423; E-mail: yaolizxp@163.com
R363
A
10.3969/j.issn.1000- 4718.2016.04.007
雜志網(wǎng)址: http://www.cjpp.net