甲基苯丙胺檢測方法研究進展

甲基苯丙胺（Methamphetamine，MA），是微有苦味的結(jié)晶體，因其外觀形似冰，俗稱“冰毒”，屬于苯丙胺類毒品，具有藥物依賴性（主要是精神依賴性）、中樞神經(jīng)興奮、致幻、食欲抑制和擬交感能效應等藥理、毒理學特征，是聯(lián)合國精神藥品公約管制的精神活性物質(zhì)。根據(jù)《2016年中國毒品形勢報告》，冰毒已經(jīng)取代海洛因成為我國目前濫用程度最為嚴重的毒品，因此加強對甲基苯丙胺濫用的檢驗對嚴厲打擊涉冰毒違法犯罪活動具有重要的意義，本文即對實驗室檢測甲基苯丙胺的方法進行綜述。

氣相色譜（GC）法

GC具有高靈敏度、高選擇性等優(yōu)點，可以與多種檢測器聯(lián)用，由于MA含氮元素，因此NPD比FID對MA具有更好的選擇性和響應，這一點在沈敏等人的實驗中得到證實，尿液樣本堿化后，用環(huán)己烷提取，GC/FID法對MA的檢出限為25ng/mL，而GC/NPD法對MA的檢出限為5ng/mL。

由于MA的熱穩(wěn)定性較差，通過衍生化可提升其熱穩(wěn)定性，從而改善其色譜行為。趙冰等人用環(huán)己烷提取尿液樣本中的MA后，分別用幾種酰化試劑衍生化后，選用ECD檢測器進行GC/ECD分析，發(fā)現(xiàn)3，5-二硝基苯甲酰衍生化方法靈敏度最高，檢出限可達到5.8ng/mL。李雯佳等人堿化血液和尿液樣本后，用氯仿提取，三氟乙酸酐衍生化后，采用8CB熔融石英毛細管柱的GC/NPD法分析，最低可以檢測到血液中0.8ng/mL和尿液中1.6ng/mL的MA。

改變從生物檢材中提取MA的方法，可以回得較高的萃取率。孫洪鋒等人采用微波萃取法萃取血液樣品中的MA，萃取率達到81.4%，經(jīng)過GC/FID法分析，血液樣品中的MA的檢測限為220ng/mL。郭鵬等人采用固相萃取技術(shù)萃取尿液樣品中的MA，直接用AB-5毛細管柱的GC/NPD法進行分析，發(fā)現(xiàn)MA的質(zhì)量濃度與其峰面積在0.1～10.0μg/mL范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，尿液樣品中MA的檢出限為62 ng/mL，萃取率達到87.3%。而劉曉云等人用環(huán)己烷提取堿化的尿液樣品后直接進樣，用DB-5MS毛細管柱的GC法分析，尿液樣品中的MA回收率達到79.82%。

在實際案件中，提取的生物檢材的種類對MA的檢驗具有重要的作用。趙蒙等人采用固相萃取方法從血液、尿液、胃內(nèi)容物、肝、腦組織中提取MA，用HP-5石英毛細管柱進行GC/NPD分析，從而發(fā)現(xiàn)了口服MA引起的中毒途徑情況下，胃內(nèi)容物中MA含量最高，其次是尿液、肝、腦、血液組織，證實了胃內(nèi)容物或尿液是此類中毒案件的理想檢材。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）法

GC-MS法是將毛細管氣相色譜的高分離性與質(zhì)譜儀的高靈敏度相結(jié)合，同事參照標準物質(zhì)數(shù)據(jù)庫實現(xiàn)對檢測樣本的定性和定量分析，具有快速、準確、重復性好、多種毒物可同時分析等優(yōu)點，被認為是最可靠的定性技術(shù)，從而在藥物分析與毒物分析中得到了廣泛的應用。

王玉瑾等人將生物樣本堿化后經(jīng)乙醚提取，三氟乙酸酐衍生化后，程序升溫，色譜傳輸線溫度250℃，建立基于GC-MS儀器對MA的定性和定量的方法，測得MA在血清中的線性范圍為0.01～5.0μg/mL，檢出限為0.005μg/ mL，在尿液中的線性范圍為0.1～50.0μg/mL，回收率超過74.3%。陳朝陽等人采用同樣的方法，最低可以檢測到血漿中0.005μg/mL的MA和肝臟中0.01μg/mL的MA，但是，回收率超過92%。曹潔等人用環(huán)己烷在40℃條件下萃取尿液樣本中的MA，用七氟丁酸酐衍生化以后，將色譜傳輸線溫度升到280℃，建立基于GC-MS/MS的多重反應監(jiān)測（MRM）分析方法，線性范圍為0.1～25μg/mL，檢出限能達到0.04μg/mL。

李宏森等人利用頂空固相微萃取技術(shù)直接萃取尿液中的MA，優(yōu)化萃取條件后發(fā)現(xiàn)MA在0.05～2μg/mL濃度范圍內(nèi)線性良好，檢測限為0.02 ng/mL，一步完成取樣、萃取、富集和進樣。李學博等人用KOH/NaCl溶液處理尿液樣本后，用SPME萃取頭萃取MA，用GC-MS法檢測，其線性范圍為0.002～2μg/mL，MA的檢測限為0.5ng/mL，而且將每份樣品分析測定的總時間限定在8min以內(nèi)。同樣，朱丹等人將毛發(fā)在堿液中消解后用氯仿漩渦提取，離心后抽取有機相進行GC-MS法檢測，MA的檢出限可達500pg/ mL。劉豐將尿液樣本堿化后，室溫下用乙酸乙酯萃取后濃縮，直接進樣，測得MA在尿液中的線性濃度范圍為0.5～20μg/ mL，檢測限為0.05μg/mL，避免了衍生化和固相萃取，實現(xiàn)了快速定性、定量檢測尿液中的MA。

質(zhì)譜分析（MS）法

基質(zhì)輔助激光解吸飛行時間質(zhì)譜（MALDI-TOFMS）是一種新型的質(zhì)譜分析技術(shù)，與傳統(tǒng)的色譜分析方法相比，其除了具有高靈敏度的優(yōu)點外，因為無色譜分離過程，還具有分析速度快、適合大量樣品同時分析的特點。MALDI-TOF-MS法采用碳納米管作為基質(zhì)，可以克服常規(guī)基質(zhì)帶來的干擾。沈保華等人用碳納米管直接提取尿液和酸解頭發(fā)液體中的MA，應用MALDI-TOF-MS法分析，測得尿液中MA的線性范圍為0.5～100.0μg/ mL，頭發(fā)中MA的線性范圍為0.4～60.0ng/mg，并對實際案例中的尿液和頭發(fā)樣本進行了檢測，效果良好。

高效液相色譜（HPLC）法

高效液相色譜技術(shù)是以不同極性的單一溶劑或混合溶液作為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)泵入裝有固定相的色譜柱，樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相，樣品中的各組分不停地在兩相之間進行吸附-解吸附的分配過程，從而被分離進入檢測器。色譜柱、熒光衍生化技術(shù)和檢測器的發(fā)展，促進了其在MA檢測領域的發(fā)展。Dirbashi等利用實驗室合成的熒光衍生化試劑先后建立了尿液、毛發(fā)中MA及其代謝產(chǎn)物的HPLC分析方法。傅強等人利用C18反相柱和二極管陣列檢測器（DAD）檢測器建立了MA的定量方法，發(fā)現(xiàn)MA在1.4～270μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，檢出限為0.73μg/mL。常穎等人采用XR-ODS柱和SPDM20A型檢測器建立了MA的超快液相色譜（UFLC）檢測技術(shù)。UPLC技術(shù)則是利用HPLC技術(shù)和色譜柱填充物低于2mm的小顆粒技術(shù)實現(xiàn)高效分離的，研究中發(fā)現(xiàn)MA在1～5000μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，檢出限為0.68μg/mL。而張小婷等人利用UPLC同時篩選檢驗MA等七種常見毒品，MA的檢出限可達0.2ng/mL。

如果對復雜樣品先進行前處理，可進一步提升HPLC法分析的靈敏度。朱波等人將尿液堿化后離心，上清用活化的分子印跡固相萃取柱凈化，洗脫液進行HPLC分析，可檢測到5ng/mL的MA，而且在0.05～15.0μg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。然后朱波使用Oasis? MCX固相萃取小柱對血液中的MA進行分離、富集，HPLC法可檢測到10ng/mL的MA。楊小紅等人使用Waters OASISTM HLB萃取小柱萃取血液樣品中的MA，HPLC法分析表明MA在血液中的濃度在0.036～1.438μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回收率超過96.1%。

高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）法

高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）技術(shù)是以HPLC作為分離系統(tǒng)，MS作為檢測系統(tǒng)，對揮發(fā)性差、熱穩(wěn)定差的極性化合物和大分子化合物具有較好的分析效果。

陳躍等人采用乙腈沉淀血液、尿液和唾液中的蛋白后，離心所得的上清進行HPLC-MS/MS分析，以多反應監(jiān)測模式掃描，有效降低了基質(zhì)本底的干擾，發(fā)現(xiàn)MA在1～500ng/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，MA的檢出限為0.1ng/mL。謝普等人將吸毒人員頭發(fā)樣品清洗、剪碎后，用甲醇、乙腈和甲酸銨的混合溶液提取，進行UPLC-MS/ MS分析，通過監(jiān)測MA的定量離子對和定性離子對，能檢測到0.498 ng/mL的MA。向麗君等人以甲醇為提取液，分別提取了濾紙、A4打印紙、塑料、玻璃載體上的血痕樣品中的MA，然后進行UPLC-MS/MS分析，可在濾紙和A4打印紙上提取的血痕樣品中檢測到0.4ng/mL的MA。

新技術(shù)在MA檢測中的應用

拉曼光譜分析技術(shù)作為檢測物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的一種無損分析方法， 可以快速、簡單地進行。張金萍等人對市售的可樂、脈動、橙汁三種飲料進行甲基苯丙胺不同加標濃度的表面增強拉曼光譜檢測，比對加標前后的拉曼光譜圖，確定991cm-1、1016cm-1、1201 cm-1特征峰可以作為鑒定此3種飲料中是否含有甲基苯丙胺的依據(jù)。王磊等人采用表面增強拉曼光譜技術(shù)，將自適應平滑濾波器和結(jié)合小波變換的支持向量機分類器有機組合，建立了低信噪比拉曼光譜的模式識別方法，實現(xiàn)了尿液中MA的定性微量分析。

電泳技術(shù)分離良好，空白無干擾。龔飛君等人用Oasis HLB固相萃取小柱直接提取血液中的MA，建立了毛細管區(qū)帶電泳檢驗方法，線性范圍為5～75μg/mL。

納米顆粒優(yōu)異的電學、光學性質(zhì)使其成為構(gòu)建分析策略的新寵。劉曉等人利用上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米顆粒為生物示蹤物，競爭模式免疫層析作為檢測平臺，建立了對尿液中MA進行定性、定量檢測的方法，在常規(guī)檢測條件下對MA的敏感性為100ng/mL，在10～5000 ng/mL之間可精確定量MA。蔣琳以魯米諾作為免疫探針，ITO作為基板，3-氨丙基三甲氧基硅烷作為ITO和金納米顆粒的連接劑，構(gòu)建MA的電化學發(fā)光免疫傳感器。傳感器在2～500 ng/mL有良好的線性響應，檢測限為0.3ng/mL，具有良好的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性。

展望

甲基苯丙胺的濫用日益嚴重，與其關(guān)聯(lián)的犯罪愈加猖獗，這就使得甲基苯丙胺的檢驗格外重要。甲基苯丙胺的檢驗在分析化學、生物技術(shù)、儀器分析等學科的輔助下已經(jīng)日益完善，但仍然存在一些不足。甲基苯丙胺的檢驗新技術(shù)將致力于提高特異性和靈敏度，減少假陽性，建立高機動性的檢驗平臺，以及提高現(xiàn)場辦案精準度。

10.3969/j.issn.1001- 8972.2016.19.029