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        甘肅省市售牛羊肉中雌激素殘留狀況分析

        2016-10-19 23:42:06李維紅熊琳高雅琴楊曉玲
        湖北農業(yè)科學 2016年6期
        關鍵詞:雌激素殘留牛羊肉

        李維紅 熊琳 高雅琴 楊曉玲

        摘要:以甘肅省蘭州市、靖遠縣、臨夏州、張掖地區(qū)牛羊肉為試驗材料,分析了甘肅省市售牛羊肉中己烯雌酚、雌二醇、戊酸雌二醇和苯甲酸雌二醇等4種雌激素殘留狀況。結果表明,80份樣品中(4個地方牛羊肉各10份)所測定的4種雌激素均未檢出,甘肅省市售牛羊肉中無論是天然的雌二醇還是己烯雌酚、戊酸雌二醇和苯甲酸雌二醇3種人工合成雌激素均沒有殘留。

        關鍵詞:牛羊肉;雌激素;殘留;甘肅省

        中圖分類號:R155.5+5 文獻標識碼:A 文章編號:0439-8114(2016)06-1538-02

        DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.06.044

        激素類藥物具有提高牛羊的繁殖性能、促進生長,改善牛羊肉品質、促進泌乳羊的產奶量等作用[1]。激素通過食物鏈在人體內積累,可誘發(fā)癌變,對生殖與神經等系統帶來影響,還可造成嚴重的環(huán)境污染問題[2],并能使男性生殖器官發(fā)生異常與病變以及使女性乳腺癌和子宮內膜發(fā)生異位[3]。因此,對牛羊肉的監(jiān)測也是保證食品安全的措施之一。在己烯雌酚、雌二醇、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇中,雌二醇是惟一的天然型雌激素,其余3種均為人工合成雌激素。本研究采用HPLC法對甘肅省市售牛羊肉中己烯雌酚、雌二醇、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇4種雌激素殘留狀況進行分析,以期了解甘肅省市售牛羊肉中4種雌激素的殘留狀況。

        1 材料與方法

        1.1 樣品來源

        分別于甘肅省蘭州市、靖遠縣、臨夏州、張掖地區(qū)的屠宰場、農貿市場和超市采集牛羊肉樣品各10份,共計80份。

        1.2 試劑

        甲醇(色譜純)、磷酸二氫鈉(NaH2PO4·2H2O)(國藥集團化學試劑上海有限公司);雌二醇(Sigma-Alorich公司)、己烯雌酚(Sigma-Alorich公司)、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇標準品(中國藥品生物制品檢定所)。

        雌二醇、己烯雌酚、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇標準儲備液:精密稱取50 mg雌二醇、己烯雌酚、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇標準品,分別用甲醇定容在50 mL容量瓶中,即得到每個單標的儲備液為1 mg/mL。然后分別吸取2.5 mL雌二醇、己烯雌酚、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇標準儲備液混合,再將混合儲備液用甲醇分別稀釋至0.4、0.5、1.0 mg/mL,保存于4 ℃?zhèn)溆肹4]。

        1.3 儀器及條件

        Waters e2695高效液相色譜儀,配有2998 PAD檢測器;超聲波清洗器;離心機(10 000 r/min);色譜柱:C18,ODS(5 μm,4.6 mm×150 mm);流動相:甲醇∶磷酸氫二鈉=80∶20(V/V);流速:1.0 mL/min;柱溫:40 ℃;檢測波長:280 nm。分別取雌二醇、己烯雌酚、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇的單個標準品及0.4、0.5、1.0 mg/mL的混合標樣經0.45 μm的有機濾膜過濾,取10 μL依次進行HPLC中,先用標準品的出峰時間定性,再用混合標樣做定量標準工作曲線。

        1.4 測定方法

        稱取粉碎樣品5.0 g置于20 mL帶蓋離心管中,加甲醇10.0 mL,超聲萃取20 min后4 000 r/min離心10 min。殘渣中再加10.0 mL甲醇,再超聲萃取20 min,4 000 r/min離心10 min,合并上清液于80 ℃水浴蒸干。用20 mL甲醇溶解殘渣,經0.22 μm 1次性有機濾膜過濾,準備上機。

        1.5 計算公式

        X=2C/mV

        式中,X為樣品中某一種雌激素的含量;C為在標準曲線上查出來的某一種雌激素的濃度(μg/mL);V為進樣體積(μL);m為樣品質量(g)。

        2 結果與分析

        由表1可知,雌二醇、己烯雌酚、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇濃度在0~100 ng/mL之間,濃度與峰面積之間有較好的線性關系,其相關系數分別為0.999 5、0.999 3、0.999 2和0.999 4。4種雌激素的檢出限分別為1.5、3.0、1.0和2.0 ng/mL。用1.0 mg/mL加標樣品提取液進樣10 μL,進樣6次求出變異系數(表2),分別為0.36%、0.35%、0.12%和0.78%。以羊肉樣品為樣本,添加0.4、0.5、1.0 μg/mL 3個濃度水平的標樣測定回收率,其范圍為85.96%~101.56%,符合標準要求(80%~120%)(表3)。

        該方法的線性范圍、精密度和回收率均良好,能夠滿足分析要求。依據上述方法,對甘肅省蘭州市、靖遠縣、臨夏州、張掖地區(qū)的屠宰場、農貿市場和超市的80份牛羊肉樣品進行了雌二醇、己烯雌酚、苯甲酸雌二醇和戊酸雌二醇的檢測,從表4可以看出,無論是天然型雌二醇還是人工合成雌激素均未檢出。

        3 小結與討論

        肉中天然雌激素以雌二醇為代表,其濃度約為10 ng/g[5]。80份樣品中無論是天然型雌二醇還是人工合成其余3種雌激素均未檢出。80份樣品來源于甘肅省的4個牛羊肉產區(qū),每個區(qū)又從不同的途徑取樣,所以樣品具有很好的代表性。樣品中未檢出3種人工合成的雌激素,說明沒有添加或經過休藥期已經沒有殘留。至于天然雌激素雌二醇也未檢出,檢測結果與田軍等[6]的研究結果一致,認為雌激素僅作用和存在于靶器官,肌肉中并不含雌激素。但與林奕芝等[7]的研究結果相悖,其檢測的深圳市市售牛羊肉均檢測出了雌二醇。而本研究中可能是市售牛羊肉的雌激素含量較低而未檢出,也有可能是有待于更精密的儀器仔細篩查。

        參考文獻:

        [1] TYLER C R, JOLBING S, SUMPTER T P. Endocrine disruption in wildlife:A critical review of the evidence[J].Critical Reviews in Toxicology,1998,28:319-361.

        [2] RUDEL R. PREDICTING. Health effects of exposure to compounds with estrogenic activity: Methodological issues[J]. Environ Health Perspect,1997,105(s3):655-663.

        [3] 張靜云,呂 劍,何義亮.環(huán)境雌激素的生物檢測與應用[J].環(huán)境科學與技術,2007,30(2):100-102.

        [4] GB/T 5009.108-2003,畜禽肉中己烯雌酚的測定[S].

        [5] 楊惠芬.食品衛(wèi)生理化檢驗標準手冊[M].北京:中國標準出版社,1998.

        [6] 田 軍,夏 夢,朱 晨,等.閹割與不閹割對生長肥育母豬生長速度的影響及血液、肌肉中雌激素含量的測定[J].養(yǎng)豬,2012(5):47-48.

        [7] 林奕芝,司徒潮滿,劉 奮,等.深圳市市售肥牛、羊肉中雌激素殘留狀況分析[J].現代預防醫(yī)學,2009,36(6):1168-1169.

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