王玉婷　袁艷麗　王明明

（江蘇省理化測試中心，江蘇南京210042）

茶葉中有機磷農藥殘留測定方法的改進

王玉婷*袁艷麗王明明

（江蘇省理化測試中心，江蘇南京210042）

目前，國內外針對茶葉中有機磷農殘的檢測方法很多，主要有氣相色譜火焰光度（GC-FPD）、氣相色譜-質普聯(lián)用（GC-MS）以及氣譜色譜-串聯(lián)質譜（GC-MS/MS）方法等。其中，GC-FPD方法因其配制簡單、對有機磷檢測具有高選擇性、可大大降低復雜基質中的干擾問題，而受到許多檢測機構的廣泛應用。在茶葉有機磷農殘前處理方面，QuEChERS方法作為一種快速、簡便、價格低廉、適用面廣的樣品前處理方法，其低成本高效的樣品處理技術，可用于絕大多數(shù)食品基質的寬泛的農藥殘留類別，已被多個國際農藥殘留分析機構采納。但是，樣品中大多有機磷農殘的濃度較低，為了準確測定，通常需要對其進行濃縮，以提高目標物濃度，而在此過程中會導致部分低沸點有機磷農殘揮發(fā)損失，從而影響對其的準確定量；且此過程耗時，不利于檢測效率的提高。對此，可采用大體積進樣技術，通過提高樣品的進樣量來提高對有機磷農殘檢測的靈敏度，不進行樣品濃縮，而達到與傳統(tǒng)進樣方式相同的靈敏度，從而簡化樣品前處理步驟。程序升溫大體積進樣技術，是目前應用最多的一種大體積進樣技術，它可以在略高于溶劑沸點的溫度下通過載氣將溶劑分流出襯管，然后快速升溫將目標物汽化轉移到色譜柱進行分離。在這一過程中，對于一些低沸點的農殘會隨著溶劑的分流而損失，并最終導致其檢測靈敏度降低。為了克服這一問題，另一種大體積進樣技術——同時溶劑濃縮進樣技術（SCR）通過預柱來承載大體積進樣的所有溶劑及目標物，然后緩慢蒸發(fā)溶劑通過色譜柱到達檢測器并放空，比溶劑沸點略高的目標物在溶劑之后達到檢測器被檢測，保證所有沸程的目標組分均由色譜柱分離達到檢測器，從而保證較高的檢測靈敏度。

鑒于此，本文采用改進的QuEChERS方法進行提取，經(jīng)Carbon-NH2復合柱凈化，采用GC-FPD結合大體積不分流進樣技術，不經(jīng)濃縮直接進樣來高效、靈敏地檢測茶葉中的有機磷農殘含量。

1　試驗材料

1.1儀器與試劑

1.1.1儀器

Trace 1310 GC-FPD氣相色譜儀，Thermo Fisher Scientific；Triplus RSH三合一自動進樣器，Thermo Scientific；TR-35MS色譜柱，30 m×0.25 mm× 0.25 μm，Thermo Fisher scientific，P/N：260C142P；大體積不分流套件，內含5 mm×0.32 mm預柱、玻璃兩通以及大體積不分流計算軟件，Thermo Fisher scientific，P/N：19050725。

1.1.2試劑、耗材

二溴磷、甲胺磷、速滅磷、滅線磷、甲基內吸磷、特丁硫磷、乙拌磷、樂果、甲基嘧啶磷、甲基對硫磷、馬拉硫磷、殺螟硫磷、對硫磷、溴硫磷標樣，質量濃度均為100 mg/L，購于國家標準物質中心；氯化鈉、無水硫酸鈉，分析純；Carbon-NH2復合柱（規(guī)格1 g），購于上海安普科技有限責任公司；乙酸乙酯（色譜純）、丙酮（色譜純），水為去離子水。

1.2提取溶劑及有機磷標樣的配制

提取溶劑：取450 mL乙酸乙酯與50 mL丙酮混合，配制成乙酸乙酯與丙酮體積比為9∶1的混合溶劑。

質量濃度為1.0 mg/L的14種有機磷農殘混標：分別取100 μL 100 mg/L的各有機磷農殘標樣儲備液，加入到10 mL容量瓶中，用提取液定容至刻度，得到質量濃度為1.0 mg/L的14種有機磷農殘混標。

1.3樣品前處理

精確稱取茶葉粉末樣品2.0 g于50 mL離心管中，加入10.0 mL去離子水，浸泡5 min；加入4.0 g NaCl和20.0 mL的乙酸乙酯丙酮混合溶劑，渦旋3 min；取10 mL乙酸乙酯丙酮混合溶劑活化Carbon-NH2復合柱（在上端加入2.0 g無水硫酸鈉），吹干后，取10 mL提取液上樣，過柱（流速約1滴/s）；裝入色譜瓶，進行GC-FPD分析。

1.4樣品加標

精確稱取茶葉粉末樣品2.0 g于50 mL玻璃瓶中，加入10.0 mL去離子水，浸泡5 min；分別加入1.0 mL及2.0 mL 1.0 mg/L的14種有機磷農殘混標；加入4.0 g NaCl和19.0 mL及18.0 mL的乙酸乙酯丙酮混合溶劑，渦旋3 min；取10 mL乙酸乙酯丙酮混合溶劑活化Carbon-NH2復合柱（在上端加入2.0 g無水硫酸鈉），吹干后，取10 mL提取液上樣，過柱（流速約1滴/s）；裝入色譜瓶，進行GC-FPD分析。

1.5色譜條件

柱溫：75℃（7 min），20℃/min到200℃，10℃/min到280℃（6 min）；不分流進樣，不分流時間7 min；進樣口溫度：280℃；載氣：高純氮（99.999%），恒流模式，1.2 mL/min；液體進樣模式，進樣量30.0 μL，進樣速度100 μL/s；FID檢測器：基座溫度300℃，檢測池溫度150℃，空氣流速115 mL/min，氫氣流速90 mL/min。

2　結果與討論

2.1標準品色譜圖

圖1為質量濃度100 μg/L的14種有機磷農殘，采用大體積不分流進樣（進樣體積30 μL、黑色）和標準不分流進樣（進樣體積1 μL）的色譜圖。從圖1中可以看出，采用大體積不分流進樣能夠顯著提高各有機磷農殘的靈敏度。經(jīng)計算，采用大體積不分流進樣30 μL，大部分有機磷農殘的峰面積比標準不分流進樣1 μL，平均提高近25倍（見表1）。

圖1　大體積不分流進樣和標準不分流進樣的14種有機磷農殘標準溶液色譜圖

表1　各有機磷農殘的峰面積

2.2線性以及方法的檢出限

對于系列有機磷農殘標樣，采用自動配標曲功能進行配制，各質量濃度分別為：20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L和500 μg/L。采用上述方法分別進樣分析，考察在20 μg/L～500 μg/L濃度范圍內的線性，計算得出14種有機磷農殘的線性方程及其相關系數(shù)；以3倍信噪比計算其檢出限，結果見表2。試驗結果表明，在設定的質量濃度范圍內，14種有機磷農殘的響應值與其質量濃度呈良好的線性關系，相關系數(shù)均大于0.998。

表214　種有機磷農殘的標準曲線、檢出限

2.3回收率和重復性

按照上述方法在不含待測有機磷農殘的茶葉樣品中加入0.5 mg/kg和1.0 mg/kg的14種有機磷農殘標樣，分別進行前處理和GC-FPD分析，并按照加標量和實際測定量計算其回收率，結果見表3。試驗結果表明，在上述2個加標水平下，14種有機磷農殘除了二溴磷回收率大于120%，其他均在75%～110%之間，且平行測定6次的相對標準偏差均低于4%，能夠很好地符合對農藥多殘留檢測的需求。

表314　種有機磷農殘的加標回收率及相對標準偏差（n=6）

3　總結

本文采用GC-FPD配合大體積不分流組件，以改進的QuEChERS方法（去離子水浸泡、乙酸乙酯丙酮混合溶劑對茶葉中的有機磷農殘進行提?。?，經(jīng)Carbon-NH2復合柱凈化，不經(jīng)濃縮直接進樣分析。在進樣體積為30 μL時，對各有機磷農殘的檢測相比傳統(tǒng)不分流進樣1 μL，靈敏度提高了近25倍。該方法的操作步驟簡單、穩(wěn)定，無需繁瑣、耗時的除溶劑步驟，可以避免揮發(fā)性農殘的損失。同時對茶葉樣品進行了0.5 mg/kg和1.0 mg/kg2個水平的加標回收試驗，14種有機磷農殘除了二溴磷回收率大于120%，其他均在75%～110%之間，能夠滿足對有機磷農殘的日常檢測需求。

［1］BIEDERMANN M，F(xiàn)ISCALINI A，GROB K.Large volume splitless injection with concurrentsolvent recondensation：Keeping the sample inplace in the hot vaporizing chamber［J］.J.Sep.Sci，2004，27：1 157-1 165.

［2］MAGNI P，PORZANO T.Concurrent solvent recondensation large samplevolume splitless injection［J］.J.Sep. Science，2003，26：1 491-1 498.

Method im provementoforganophosphorus pesticide residues detection in tea

WANGYuting*YUAN YanliWANG Mingming
（physical and chemical testing center of jiangsu province，Jiangsu Nanjing 210042，China）

采用氣相色譜-火焰光度法（GC-FPD）結合大體積不分流進樣技術，建立高效、靈敏測定茶葉中有機磷農殘的檢測方法。對茶葉樣品，采用改進的QuEChERS方法，以去離子水浸泡、乙酸乙酯丙酮混合溶劑對茶葉中的有機磷農殘進行提取，經(jīng)Carbon-NH2復合柱凈化，不經(jīng)濃縮直接進樣分析。通過試驗發(fā)現(xiàn)，使用大體積不分流進樣技術，進樣體積為30 μL時，對各有機磷農殘的檢測相比傳統(tǒng)不分流進樣1 μL，靈敏度提高了近25倍。試驗結果表明，采用GC-FPD結合大體積不分流進樣技術對茶葉中有機磷農殘檢測是一種非常靈敏、高效的檢測方法，能夠大大縮短前處理時間，并具有較高的檢測靈敏度。

茶葉；有機磷農殘；大體積不分流；氣相色譜-火焰光度法

In the paper，a efficient，sensitive detection method for determination of organophosphorus pesticide residues in tea is established with gas chromatography-flame photometric detection（GC-FPD）combined with big volume don't shunt injection technology.Of tea samples，using the improved QuEChERS method，by soaking in the deionized water，acetone，ethyl acetate mixed solvent toextraction oforganophosphorus pesticide residues in tea，the Carbon-NH2composite column purification，without direct sampling analysis.Through the study found that，using large volume don't shunt sample，sample size is 30 μL，to detect the organophosphorus pesticide residues than traditional shunt sample 1 μL，increased sensitivitynearly25 times.The results show that the GC-FPDwith bigvolume don't shunt injection technology for organophosphorus pesticide residues in tea is a very sensitive and efficient detection method，can greatly shorten the processing time before，and has high detection sensitivity.

tea；organophosphorus pesticide residues；large volume don't shunt；gas chromatography-flame photometric detection

TS272.7

A

1673-6044（2016）03-0061-03

10.3969/j.issn.1673-6044.2016.03.017

*王玉婷，女，1989年出生，黑龍江中醫(yī)藥大學食品科學與工程專業(yè)，助理工程師。

2016-06-27