梁春靈，曹鳳，張玉婷，王沁.福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬人民醫(yī)院，福建省人民醫(yī)院血液科，福建 福州 350004 .廣東省中醫(yī)院珠海醫(yī)院血液科，廣東 珠海 59000

參芪白血飲對(duì)緩解期急性白血病患者血清sIL-2R和TNF-α的影響

梁春靈1，曹鳳2，張玉婷2，王沁2
1.福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬人民醫(yī)院，福建省人民醫(yī)院血液科，福建 福州 350004 2.廣東省中醫(yī)院珠海醫(yī)院血液科，廣東 珠海 519000

目的：觀察參芪白血飲對(duì)緩解期急性白血病患者血清可溶性白細(xì)胞介素-2受體（sIL-2R）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的影響。方法：將40例急性白血病緩解期患者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組。對(duì)照組采用常規(guī)鞏固化療方案；治療組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上，予以參芪白血飲口服。治療4周。用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)2組治療前后外周血血清sIL-2R、TNF-α水平的變化。結(jié)果：治療組治療后sIL-2R、TNF-α水平較治療前下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；對(duì)照組治療前后sIL-2R、TNF-α比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后2組sIL-2R、TNF-α水平比較，治療組均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。治療組AML及ALL患者治療后的sIL-2R、TNF-α水平均較治療前下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，P＜0.05）。對(duì)照組AML及ALL治療前后sIL-2R、TNF-α水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：參芪白血飲可降低緩解期急性白血病患者血清sIL-2R和TNF-α水平，從而可能通過兩種因子的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，增強(qiáng)對(duì)緩解期患者微小殘留白血病細(xì)胞的抑制或殺傷，減少復(fù)發(fā)。

急性白血??；緩解期；參芪白血飲；可溶性白細(xì)胞介素-2受體；腫瘤壞死因子-α

急性白血病（Acute Leukemia，AL）經(jīng)過誘導(dǎo)化療達(dá)到完全緩解（Complete Remission，CR）后，機(jī)體仍殘存109以下的白血病細(xì)胞，稱為微小殘留?。∕inimal Residual Disease，MRD）。MRD是白血病復(fù)發(fā)的根源［1］。調(diào)動(dòng)自身免疫功能，清除殘存白血病細(xì)胞，減少復(fù)發(fā)，是急性白血病緩解期的治療原則。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為急性白血病緩解期患者因邪毒、藥毒的攻伐，呈現(xiàn)邪去正衰、正虛邪伏、氣陰兩虛的特點(diǎn)，提出以益氣養(yǎng)陰、補(bǔ)腎健脾、扶正補(bǔ)虛為主，輔以解毒抗癌、活血祛瘀的治療原則［2］。本研究采用益氣養(yǎng)陰方參芪白血飲聯(lián)合化療治療氣陰兩虛型急性白血病患者，通過酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)緩解期急性白血病患者血清可溶性白細(xì)胞介素-2受體（sIL-2R）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的表達(dá)水平，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　臨床資料

1.1診斷標(biāo)準(zhǔn)急性白血病分型診斷標(biāo)準(zhǔn)及完全緩解標(biāo)準(zhǔn)參照《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》［3］中急性白血病診斷及完全緩解標(biāo)準(zhǔn)。

1.2辨證標(biāo)準(zhǔn)參照全國中西醫(yī)結(jié)合虛證研究專業(yè)委員會(huì)1986年修訂的《中醫(yī)虛證診斷與辨證參考標(biāo)準(zhǔn)》［4］及《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則（試行）》［5］中的有關(guān)內(nèi)容擬定。氣陰兩虛辨證診斷標(biāo)準(zhǔn)：具備氣陰兩虛主癥，結(jié)合舌脈可以診斷；或具備氣陰兩虛主癥2項(xiàng)以上，次癥任意一項(xiàng)以上，結(jié)合舌脈可以診斷。主癥：神疲乏力、自汗或盜汗、五心煩熱、咽干舌燥；次癥：氣短懶言、兩顴潮紅、午后低熱；舌脈：舌淡胖或有齒痕、脈細(xì)無力或舌紅少苔、脈細(xì)無力或細(xì)數(shù)。

1.3納入標(biāo)準(zhǔn)年齡14～70歲，符合急性白血病完全緩解診斷標(biāo)準(zhǔn)及辨證標(biāo)準(zhǔn)，完全緩解后進(jìn)行鞏固治療，無其它系統(tǒng)嚴(yán)重并發(fā)癥及慢性病史。

1.4一般資料觀察病例均來源于2013年4月—2015年4月廣東省中醫(yī)院血液科住院或門診患者，共40例，隨機(jī)分為2組各20例。同期納入20例健康體檢者作為健康組。治療組20例，急性髓系白血病（AML）12例，急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）8例；女 11例，男 9例；年齡 15～69歲，平均（39.50±17.75）歲；緩解時(shí)間2～24月，平均（5.25±6.04）月。對(duì)照組20例，AML 10例，ALL 10例；女10例，男10例；年齡15～66歲，平均（39.17±17.65）歲；緩解時(shí)間2～24月，平均（7.00±6.42）月。2組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。健康組20例，為本院體檢者，女8例，男12例；年齡18～60歲，平均（42.85±12.35）歲。

2　治療方法

2.1對(duì)照組按常規(guī)化療方案進(jìn)行鞏固化療。對(duì)并發(fā)癥按統(tǒng)一原則處理，如感染、發(fā)熱者，給予抗感染、退熱等處理；如血紅蛋白或血小板減少，可輸注紅細(xì)胞懸液或血小板；如粒細(xì)胞缺乏，可使用粒細(xì)胞集落刺激因子等。

2.2治療組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上加用參芪白血飲，處方：太子參、女貞子、白術(shù)、補(bǔ)骨脂各15 g，黃芪25 g，黃精、柴胡、黃芩各10 g。水煎，每次口服150 mL，每天2次。

2組均4周為1療程。

3　觀察項(xiàng)目與統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3.1標(biāo)本采集清晨空腹采集外周靜脈血2～3 mL，3000 r/min，離心10 min，吸出上層血清置于-80℃冰箱保存。

3.2血清細(xì)胞因子檢測(cè)治療前及治療后分別檢測(cè)患者及健康對(duì)照者的血清sIL-2R以及TNF-α。sIL-2R試劑盒（96T）購自美國Thermo Fisher Scientific公司；TNF-α試劑盒（96T）購自美國Invitrogen公司。操作均按試劑盒說明書進(jìn)行。

3.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法運(yùn)用SPSS19.0軟件包統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)；等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)。

4　結(jié)果

4.1各組血清sIL-2R及TNF-α表達(dá)水平比較見表1。治療前，治療組與對(duì)照組患者血清sIL-2R以及TNF-α水平均高于健康組（P＜0.01，P＜0.05）。治療組治療后 sIL-2R、TNF-α水平較治療前下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；對(duì)照組治療前后sIL-2R、TNF-α比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后2組sIL-2R、TNF-α水平比較，治療組明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療組與對(duì)照組治療后 sIL-2R、TNF-α水平仍高于健康組（P＜0.01，P＜0.05）。

表1　各組血清sIL-2R及TNF-α表達(dá)水平比較（±s）

表1　各組血清sIL-2R及TNF-α表達(dá)水平比較（±s）

與健康組比較，①P＜0.01，②P＜0.05；與本組治療前比較，③P＜0.01；與對(duì)照組同期比較，④P＜0.05

組別治療組n對(duì)照組健康組20 20 20 20 20時(shí)間治療前治療后治療前治療后sIL-2R（U/mL）1318.78±793.90①766.18±281.18①③④1211.65±987.32①2043.83±453.65①533.43±208.84 TN F-α（pg/mL）32.41±8.39①26.23±5.25②③④27.66±6.95②29.85±9.13①24.37±7.94

4.22組AML、ALL患者治療前后sIL-2R、TNF-α水平比較見表2。治療組AML、ALL患者治療后的sIL-2R、TNF-α水平均較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，P＜0.05）。對(duì)照組AML、ALL治療前后sIL-2R、TNF-α水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

5　討論

緩解期急性白血病患者體內(nèi)殘留的白血病細(xì)胞是急性白血病復(fù)發(fā)的根源［6～7］。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為白血病多為正氣虧虛，氣血不足，臟腑經(jīng)絡(luò)失調(diào)，同時(shí)遭熱毒之邪氣、藥食之毒侵襲，內(nèi)攻骨髓所致。氣陰虧虛為病之本，痰瘀邪毒為病之根［2］。初發(fā)白血病患者經(jīng)一系列積極治療后達(dá)到完全緩解狀態(tài)，此時(shí)患者本就不勝正氣，再經(jīng)邪毒以及藥毒的打擊則進(jìn)一步虧損，而余留之邪氣尚未完全除去，蟄伏體內(nèi)，伺機(jī)而發(fā)，故整體上呈現(xiàn)以正虛為主，正虛邪戀的狀態(tài)。這與微小殘留病導(dǎo)致急性白血病復(fù)發(fā)的機(jī)制是相對(duì)應(yīng)的。針對(duì)急性白血病緩解期“氣陰兩虛，正虛邪伏”的病機(jī)，采用益氣養(yǎng)陰解毒為法，以達(dá)扶正祛邪之效。

表2　2組AML、ALL患者治療前后sIL-2R、TNF-α水平比較（±s）

表2　2組AML、ALL患者治療前后sIL-2R、TNF-α水平比較（±s）

與本組治療前比較，①P＜0.01，②P＜0.05

組　別診斷A M L n治療組12 12 A LL 8 8 A M L對(duì)照組A LL 10 10 10 10時(shí)間治療前治療后治療前治療后治療前治療后治療前治療后sIL-2R（U/mL）1299.89±870.88 818.314±305.42①1375.44±577.90 609.79±91.07②1125.31±737.83 2948.10±2517.39 1310.38±1293.97 1320.42±871.71 TN F-α（pg/mL）32.25±8.66 26.60±5.74②32.88±8.46 25.09±3.62②25.29±5.81 28.04±6.83 28.25±9.25 31.28±10.77

參芪白血飲由太子參、黃芪、黃精、女貞子、補(bǔ)骨脂、白術(shù)、柴胡、黃芩等組成。具有益氣養(yǎng)陰，扶正補(bǔ)虛，滋腎健脾、解毒抗癌的作用，對(duì)于延長白血病患者緩解期，延緩復(fù)發(fā)，維持生存有明顯療效［8～9］。既往的研究已表明參芪白血飲對(duì)緩解期急性白血病患者T細(xì)胞及其亞群、NK細(xì)胞均具有正向調(diào)控作用［10］，一定程度說明了其扶正作用的免疫學(xué)基礎(chǔ)。sIL-2R和TNF-α是參與腫瘤免疫和機(jī)體生物學(xué)反應(yīng)的重要細(xì)胞因子，是反映機(jī)體免疫應(yīng)答和惡性腫瘤活性的標(biāo)志物。為進(jìn)一步揭示參芪白血飲對(duì)緩解期急性白血病患者的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，筆者在本實(shí)驗(yàn)觀察了參芪白血飲治療前后sIL-2R和TNF-α水平的變化。

白血病細(xì)胞可自發(fā)地、持續(xù)地分泌sIL-2R以及TNF-α，血液中sIL-2R以及TNF-α表達(dá)水平可一定程度上反映白血病細(xì)胞增殖活性和體內(nèi)白血病細(xì)胞負(fù)荷［11～12］。緩解期急性白血病患者血清sIL-2R、TNF-α水平明顯高于健康人，說明患者體內(nèi)仍有一定數(shù)量的白血病細(xì)胞負(fù)荷，這些殘留白血病細(xì)胞仍不斷產(chǎn)生sIL-2R，導(dǎo)致sIL-2R水平高于正常水平，這意味著患者仍存在不同程度的免疫功能缺陷，存在復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。

治療組運(yùn)用參芪白血飲治療后外周血sIL-2R水平較治療前明顯降低，且明顯低于對(duì)照組，提示化療聯(lián)合參芪白血飲可能通過調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答，抑制了sIL-2R的產(chǎn)生，降低了sIL-2R的水平，從而可能減少IL-2與sIL-2R的結(jié)合，使得更多的IL-2可以與T細(xì)胞膜上的mIL-2R結(jié)合，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞活化增殖，從而誘導(dǎo)活化效應(yīng)細(xì)胞如TC細(xì)胞、B細(xì)胞、LAK細(xì)胞以及NK細(xì)胞等，進(jìn)而更有效地殺傷殘留的白血病細(xì)胞。參芪白血飲治療后外周血TNF-α的水平較治療前明顯降低，且顯著低于對(duì)照組，提示參芪白血飲可能降低了腫瘤細(xì)胞或免疫活性細(xì)胞對(duì)TNF-α的分泌，也可能通過促進(jìn)TNF-α對(duì)白血病細(xì)胞的免疫殺傷，增加了TNF-α的消耗，從而降低了外周血中TNF-α的水平。TNF-α水平的降低，既可能是腫瘤細(xì)胞活性降低的結(jié)果，也可能成為降低腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移、浸潤風(fēng)險(xiǎn)，改善白血病患者預(yù)后的有利條件，對(duì)增強(qiáng)緩解期急性白血病患者免疫功能，防止復(fù)發(fā)，有著積極意義。

筆者認(rèn)為，參芪白血飲可以降低氣陰兩虛型緩解期急性白血病患者sIL-2R和TNF-α水平，從而可能調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答，增強(qiáng)免疫功能，有助于殺傷體內(nèi)殘留白血病細(xì)胞，減少復(fù)發(fā)。關(guān)于參芪白血飲對(duì)緩解期急性白血病患者的長期療效及作用機(jī)制尚需進(jìn)一步研究與探討。

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（責(zé)任編輯：馬力）

Effect of Shenqi Baixue Yin on Serum sIL-2R and TNF-α of Patients with Acute Leukemia in Catabasis

LIANG Chunling，CAO Feng，ZHANG Yuting，WANG Qin

Objective：To observe the effect of Shenqi Baixue Yin on Serum Soluble Interleukin-2 Receptor（sIL-2R）and Tumor Necrosis Factor-α（TNF-α）of patients with acute leukemia in catabasis.Methods：Forty cases of patients with acute leukemia in catabasis were divided into the treatment group and the control group randomly.Conventional consolidated chemotherapy regimens were given to the control group，the treatment group received additional treatment of Shenqi Baixue Yin，for 4 weeks.Detected the level changes of peripheral blood serum sIL-2R and TNF-α in two groups before and after treatment by the method of enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）.Results：The levels of sIL-2R and TNF-α in the treatment group were lower than those before treatment（P＜0.01）.The difference of sIL-2R and TNF-α in the control group before and after treatment was not significant（P＞0.05）.The levels of sIL-2R and TNF-α in the treatment group were all lower than those in the control group after treatment（P＜0.05）.The levels of sIL-2R and TNF-α of patients with acute myeloid leukemia（AML）and acute lymphoblastic leukemia（ALL）in the treatment group were all lower than those before treatment（P＜0.01，P＜0.05）.The difference of levels of sIL-2R and TNF-α in the control group before and after treatment was not significant（P＞0.05）.Conclusions：Shenqi Baixue Yin can reduce serum sIL-2R and TNF-α，and thus strengthen inhibition and killing of minimal residual leukemia cells and reduce the chance of relapse by immune regulation of two factors.

Acute Leukemia；Catabasis；Shenqi Baixue Yin；Soluble Interleukin-2 Receptor（sIL-2R）；Tumor Necrosis Factor-α（TNF-α）

R552

A

0256-7415（2016）07-0094-03

10.13457/j.cnki.jncm.2016.07.042

2015-11-12

廣東省中醫(yī)藥局建設(shè)中醫(yī)藥強(qiáng)省科研課題（20131045）

梁春靈（1989-），女，住院醫(yī)師，碩士，研究方向：血液病的中西醫(yī)診療。

王沁，E-mail：1023457470@qq.com。