侯素麗，姜　利，湯有宏，2，劉國英，2，張光耀

（1.安徽古井貢酒股份有限公司，安徽亳州236820； 2.安徽省固態(tài)發(fā)酵工程技術(shù)研究中心，安徽亳州236800）

超聲固相萃取-GC-QQQ法測定稻殼中六六六與滴滴涕農(nóng)藥殘留的探討

侯素麗1，姜利1，湯有宏1，2，劉國英1，2，張光耀1

（1.安徽古井貢酒股份有限公司，安徽亳州236820； 2.安徽省固態(tài)發(fā)酵工程技術(shù)研究中心，安徽亳州236800）

采用三重串聯(lián)四級桿氣質(zhì)聯(lián)用儀建立了稻殼中六六六和滴滴涕農(nóng)藥殘留的快速檢測方法。采用乙腈提取，經(jīng)全自動固相萃取儀凈化，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮；經(jīng)DB-1701毛細(xì)管柱分離后進(jìn)行質(zhì)譜分析，采用選擇性離子檢測模式，以子離子豐度比定性，內(nèi)標(biāo)法定量。六六六與滴滴涕在4～160 ppb質(zhì)量濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（相關(guān)系數(shù)均大于0.99），方法檢出限為0.10～2.15 ppb。稻殼中六六六與滴滴涕的兩個添加水平的回收率在84.2%～109.7%，重復(fù)性的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在4.3%～7.4%之間。該方法準(zhǔn)確可靠，適用于稻殼中六六六與滴滴涕農(nóng)藥殘留的定性定量分析。

三重串聯(lián)四級桿氣質(zhì)聯(lián)用儀； 全自動固相萃取儀； 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀； 稻殼； 六六六和滴滴涕

全球施用在作物上的農(nóng)藥超過1000種，由于濫用農(nóng)藥以及病蟲抗藥性的增強(qiáng)，農(nóng)藥殘留問題日益凸顯。20世紀(jì)40年代，DDT和六六六2種有機(jī)氯殺蟲藥開始使用，由于它們防治面廣，藥效比當(dāng)時的其他農(nóng)藥好，以及急性毒性低，且殘留毒性尚未被發(fā)現(xiàn)，因而廣泛用于防治作物的害蟲。六六六與滴滴涕的缺點是不易被生物分解，造成殘留而污染環(huán)境，至今仍在全球范圍的各種環(huán)境介質(zhì)中廣泛存在。有機(jī)氯農(nóng)藥因其高殘留性及高危害性引起了人們的廣泛重視［1-2］。稻殼是白酒釀造的重要輔料，雖然經(jīng)過高溫處理，減少了農(nóng)藥殘留量，但仍有一部分可能會由于生產(chǎn)工藝原因而殘留在酒中，形成潛在威脅。因此建立一種可準(zhǔn)確、靈敏分析稻殼中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的檢測方法具有重要意義［3］。

目前國內(nèi)外有關(guān)有機(jī)氯農(nóng)殘檢測的研究報道很多，主要是以GC-ECD、GC-MS為主，樣品前處理是農(nóng)殘檢測的關(guān)鍵步驟，樣品的前處理方法主要有固相萃取法［4］、基質(zhì)分散固相萃?。?-7］、固相微萃取法［8-9］、凝膠滲透［10］等。本實驗采用乙腈提取，全自動固相萃取凈化，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行濃縮，建立了三重串聯(lián)四級桿氣質(zhì)聯(lián)用儀MRM方法測定稻殼中六六六與滴滴涕的方法。該方法定性準(zhǔn)確，靈敏度與準(zhǔn)確度均能滿足稻殼中農(nóng)殘的分析要求。

1　材料與方法

1.1材料、試劑及儀器

樣品：市售稻殼。

儀器設(shè)備：Agilent 7890B GC/7000C QQQ三重串聯(lián)四級桿氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（配EI源）（美國Agilent公司）；MassHunter工作站（美國Agilent公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、全自動固相萃取儀、恒溫控制超聲儀等。

試劑：有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)品（六六六4種異構(gòu)體：α-666、β-666、γ-666和δ-666；DDT的4種異構(gòu)體：p.p'-DDT、o.p'-DDT、p.p'-DDE和p.p'-DDD，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測所）；環(huán)氧七氯（100 mg/L，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測所）；乙腈（HPLC）；超純水；氯化鈉（分析純）。

1.2實驗方法

1.2.1色譜條件

色譜柱：安捷倫DB-1701石英毛細(xì)管柱［30m×0.25mm（內(nèi)徑）×0.25 μm］［1］；進(jìn)樣口溫度：250℃；傳輸線溫度：280℃；載氣：氦氣，純度≥99.999%；流速：1 mL/min；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣體積：1 μL［12-13］。

1.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

吸取六六六與滴滴涕的混合標(biāo)準(zhǔn)品，加入一定量的環(huán)氧七氯，用丙酮定容分別配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在MRM方法條件下測定，以環(huán)氧七氯為內(nèi)標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.3樣品前處理方法

樣品的提取：準(zhǔn)確稱取1.0 g稻殼于250 mL三角瓶中，加入10 mL蒸餾水使其呈濕潤狀態(tài)，加入25 mL乙腈超聲萃取30 min，過濾后加入5 g氯化鈉，靜置后分層，取上清液10 mL，以備凈化分析用。

樣品的凈化：將10 mL稻殼提取液放入全自動固相萃取進(jìn)樣管中，進(jìn)行上樣過柱凈化。把收集管中的液體轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中進(jìn)行濃縮后加入環(huán)氧七氯作內(nèi)標(biāo)，定容至1 mL后，經(jīng)有機(jī)相濾膜過濾后上樣分析。

1.2.4樣品的定性

若樣品中待測物質(zhì)與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時間一致，同時所選的定性離子的相對豐度比與標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)的離子相對豐度比一致或偏差在允許范圍內(nèi)，即可進(jìn)行定性確認(rèn)，判定樣品陽性檢出。

2　結(jié)果與討論

2.1質(zhì)譜儀器條件的優(yōu)化

通過試驗，選定六六六、滴滴涕與環(huán)氧七氯9種物質(zhì)的母離子、子離子以及碰撞能。具體內(nèi)容見表1。

表1　MRM參數(shù)的確定

2.2線性關(guān)系與定量限

按1.2.2方法，以六六六和滴滴涕化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，定量離子對的峰面積為縱坐標(biāo)對一系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，各物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)含量在4～160 ppb范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，其相關(guān)系數(shù)均大于0.99，滿足定量要求。本方法采用空白基質(zhì)進(jìn)行加標(biāo)試驗，以其定量離子色譜峰的信噪比（S/N）≥3確定六六六與滴滴涕4種異構(gòu)體的檢出限為0.10～2.15 ppb。圖1為六六六、滴滴涕標(biāo)準(zhǔn)溶液（MRM）譜圖。

圖1　六六六、滴滴涕標(biāo)準(zhǔn)溶液（MRM）GC-QQQ圖

2.3方法重現(xiàn)性與加標(biāo)回收率試驗

取同一稻殼樣品共12份，平均分為2組，各組分別添加不同濃度的六六六與滴滴涕混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行樣品加標(biāo)回收實驗，每個水平測定6次，在2個濃度添加水平上，六六六與滴滴涕的平均回收率均在84.2%～109.7%（表2）。

表2　各農(nóng)藥組分的回收率

3　結(jié)論

研究建立了GC-QQQ法檢測稻殼中的六六六與滴滴涕殘留的快速測定方法，該方法樣品前處理操作簡便，測定結(jié)果線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2均大于0.99，檢出限為0.10～2.15 ppb，加標(biāo)回收率為84.2%～109.7%，精密度和準(zhǔn)確度較好，回收率和重現(xiàn)性能滿足稻殼中的六六六與滴滴涕殘留的定性和定量檢測要求，適用于進(jìn)行稻殼中六六六與滴滴涕的監(jiān)控檢測及質(zhì)量安全評估［14］。

［1］樓小華，高川川，朱文靜，等.GC-MS-MS法同時測定煙草中113種有機(jī)磷、有機(jī)氯及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留［J］.中國煙草科學(xué)，2013（33）：83-89.

［2］楊抗震，張云，李潔莉，等.食品中六六六和滴滴涕殘留檢測方法研究進(jìn)展［J］.北京農(nóng)業(yè)，2012（3）：108-109.

［3］李俊，王震，龐宏宇，等.白酒中多種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留檢測方法［J］.釀酒科技，2013（11）：98-100.

［4］于彥彬，王淑菊，譚培功，等.固相萃取氣相色譜法測定水果中克菌丹和來菌丹［J］.分析化學(xué)，2008（6）：750-754.

［5］朱學(xué)良，戚向陽，岳晶念，等.基質(zhì)固相分散色譜電子捕獲檢測器測定葡萄酒中5種農(nóng)藥殘留［J］.分析化學(xué)研究簡報，2007，35 （2）：259-262.

［6］陳武瑛，豐收，劉新剛，等.分散固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)法快速測定蘋果中代森錳鋅殘留［J］.分析化學(xué)，2010（4）：508-512.

［7］張渝，張新申，楊坪，等.分散式固相萃取凈化-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用測定土壤中的鄰苯二甲酸酯［J］.分析化學(xué)，2009（10）：1535-1538.

［8］朱文輝，楊柳，楊紅燕，等.熱重、差熱分析-固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)的建立與應(yīng)用［J］.分析化學(xué)，2010（4）：527-531.

［9］沈麗娜，趙賢廣，朱明新，等.固相微萃取-氣相色譜分析飲用水中三鹵甲烷［J］.環(huán)境污染與防治，2010（4）：67-69.

［10］張志罡，李勇，朱兆洲.GC-MS分析中的樣品制備和前處理技術(shù)［J］.生命科學(xué)儀器，2010（8）：31-33.

［11］王蓉，袁東，付大友，等.氣質(zhì)聯(lián)用測定白酒中的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留［J］.釀酒科技，2007（12）：102-104.

［12］李媛，肖麗和，殷果，等.分散固相萃取-氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜法測定蒺藜中17種農(nóng)藥殘留［J］.藥物分析雜志，2013，33（4）：661-668.

［13］施家威，李績革，王玉飛，等.固相萃取-氣相色譜/三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜分析蔬菜中43種農(nóng)藥殘留［J］.色譜，2010（12）：1137-1143.

［14］安徽省標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會.蔬菜、水果、糧食、茶葉中30種有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多殘留同時測定方法-氣相色譜法：DB34/T 1075—2009［S］.

Determination of BHC and DDT Residues in Rice Husk by Ultrasound&Solid-Phase Extraction-GC-QQQ

HOU Suli1，JIANG Li1，TANG Youhong1，2，LIU Guoying1，2and ZHANG Guangyao1
（1.Anhui Gujing Gongjiu Co.Ltd.，Bozhou，Anhui 236820；2.Anhui Engineering Research Center of Solid-state Brewing，Bozhou，Anhui 236800，China）

A rapid determination method of BHC and DDT residues in rice husk had been developed by triple tandem quadrupole GC-MS.Organic phase was extracted by methylene chloride，then purified by automatic solid-phase extraction apparatus，and further condensed by rotavapor.After the separation by DB-1701 capillary column，MS was performed by using selective ion detection mode which could identify the ratio of ion abundance to determine its chemical formula，and internal standard method was used to quantitate.Within mass concentration of 4～160 ppb，BHC and DDT had good linear relationships（correlation coefficient were greater than 0.99），and the detection limit was 0.10～2.15 ppb.With two addition levels of BHC and DDT in rice husk，the recovery rates of BHC and DDT varied from 84.2%to 109.7%，and its RSD was between 4.3%and 7.4%.The method was accurate and reliable，and it was suitable for qualitative and quantitative analysis of BHC and DDT residues in rice husk.

triple tandem quadrupole GC-MS；automatic solid-phase extraction apparatus；rotavapor；rice husk；BHC and DDT

TS261.7；TS261.2；TS262.3

A

1001-9286（2016）09-0079-02

10.13746/j.njkj.2016155

2016-05-06

侯素麗，女，從事釀酒發(fā)酵技術(shù)研究。

優(yōu)先數(shù)字出版時間：2016-07-11；地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20160711.1339.008.html。